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USP22在糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用
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作者 苏家宝 陈果 +5 位作者 郑观利 邱弘博 蔡维维 侯豹 朱雪雪 张继如 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1247-1252,共6页
目的评价泛素特异性蛋白酶22(USP22)在糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠78只,6~8周龄,采用随机数字表法分为6组:假手术组(Sham组,n=12)、1型糖尿病+假手术组(T1D+Sham组,n=12)、心肌缺血再灌注损伤组(I/... 目的评价泛素特异性蛋白酶22(USP22)在糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠78只,6~8周龄,采用随机数字表法分为6组:假手术组(Sham组,n=12)、1型糖尿病+假手术组(T1D+Sham组,n=12)、心肌缺血再灌注损伤组(I/R组,n=12)、1型糖尿病+心肌缺血再灌注损伤组(DI/R组,n=12)、1型糖尿病+心肌缺血再灌注损伤+空载体质粒组(DI/R+V组,n=15)和1型糖尿病+心肌缺血再灌注损伤+USP22过表达组(DI/R+U组,n=15)。采用腹腔注射链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液的方法制备1型糖尿病模型。采用结扎左冠状动脉的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型。DI/R+U组和DI/R+V组于心肌缺血再灌注损伤造模前1 d分别于心脏原位注射USP22过表达质粒或者空载体质粒。心肌缺血再灌注24 h时,采用心脏超声检测心功能(左室射血分数和左室短轴缩短率)。随后处死小鼠,取心脏,测定心肌梗死面积,观察心肌组织病理学变化(HE染色),检测细胞凋亡率(TUNEL染色)和ROS活性(DHE染色),采用Western blot法、免疫荧光和免疫组化法检测USP22的表达。蛋白质组学分析USP22调控的下游蛋白质,通过免疫沉淀实验检测蛋白质相互作用。结果与Sham组相比,I/R组心功能指标下降,心肌细胞凋亡率和ROS活性升高,心肌组织USP22表达下调(P<0.05);与I/R组相比,DI/R组心肌梗死面积百分比增加,心功能指标下降,心肌细胞凋亡率和ROS活性升高,USP22表达上调(P<0.05),心肌组织病理学损伤加重;与DI/R+V组相比,DI/R+U组心肌梗死面积百分比减少,心功能指标升高,心肌细胞凋亡率和ROS活性降低,心肌组织USP22表达上调(P<0.05),心肌组织病理学损伤减轻。蛋白质组学结合免疫沉淀实验结果显示钙调蛋白1(CNN1)与USP22有相互作用。结论糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤时,USP22可能为其内源性保护机制;CNN1可能是USP22发挥保护作用的下游机制。 展开更多
关键词 心肌再灌注损伤 糖尿病 泛素特异性蛋白酶类
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