期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
农杆菌渗入法介导的基因瞬时表达技术及应用 被引量:34
1
作者 陶刚 +2 位作者 李奇科 刘作易 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第5期1032-1039,共8页
农杆菌渗入法是在植物中瞬时表达外源基因的一种方法,该方法通过在植物叶片上注射农杆菌,使目的基因转入植物细胞中进行快速表达。本文综述了农杆菌渗入法的原理、技术流程、影响因素及其应用,其应用主要涉及外源基因的表达、检测转基... 农杆菌渗入法是在植物中瞬时表达外源基因的一种方法,该方法通过在植物叶片上注射农杆菌,使目的基因转入植物细胞中进行快速表达。本文综述了农杆菌渗入法的原理、技术流程、影响因素及其应用,其应用主要涉及外源基因的表达、检测转基因的表达、启动子分析、转录后基因沉默、抑制子功能鉴定、细胞定位以及基因相互作用等方面。随着技术的进一步完善,我们相信该技术将成为转基因育种领域的重要的手段。 展开更多
关键词 农杆菌渗入法 转基因 瞬时表达
下载PDF
马铃薯Y病毒CP基因RNAi载体构建与干涉效果测定 被引量:11
2
作者 李奇科 陶刚 +4 位作者 迟胜起 朱英 刘作易 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期460-464,共5页
RNA沉默(RNAi)介导的植物抗病毒研究是近年来引起广泛关注的一项植物抗病毒基因工程策略。马铃薯Y病毒(PVY)在世界范围内引起马铃薯、烟草等重要经济作物的病害,并且造成严重的经济损失。本文以PVY的外壳蛋白(CP)基因为模板扩增300bp和3... RNA沉默(RNAi)介导的植物抗病毒研究是近年来引起广泛关注的一项植物抗病毒基因工程策略。马铃薯Y病毒(PVY)在世界范围内引起马铃薯、烟草等重要经济作物的病害,并且造成严重的经济损失。本文以PVY的外壳蛋白(CP)基因为模板扩增300bp和354bp两个片段,正向和反向分别插入植物表达载体pROKⅡ的35S启动子下游,从而构建了以PVY的CP基因为靶标的RNAi植物表达载体pROKY300,转入农杆菌EHA105中,以农杆菌渗入法在本氏烟中瞬时表达与PVYCP同源的hairpin RNA。结果表明,瞬时表达的hairpinRNA有效干涉了PVY侵染。 展开更多
关键词 马铃薯Y病毒 CP基因 RNAI 载体构建 农杆菌渗入法
下载PDF
TC-RT-PCR技术在马铃薯病毒检测及其基因克隆上的应用 被引量:8
3
作者 陶刚 +4 位作者 黄永会 李奇科 刘作易 朱英 郑世玲 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期329-331,共3页
利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)技术从马铃薯病毒发病叶片中检测并克隆到PVX、PVY和PLRV3种病毒及其外壳蛋白基因的全长序列,长度分别为714、804和627 bp。结果表明,TC-RT-PCR技术是一种简单,快捷,灵敏度高的方法,在马铃薯病毒的检测和... 利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)技术从马铃薯病毒发病叶片中检测并克隆到PVX、PVY和PLRV3种病毒及其外壳蛋白基因的全长序列,长度分别为714、804和627 bp。结果表明,TC-RT-PCR技术是一种简单,快捷,灵敏度高的方法,在马铃薯病毒的检测和相关基因的克隆中将会得到很好的应用。 展开更多
关键词 试管捕捉RT—PCR 马铃薯病毒 外壳蛋白基因
下载PDF
贵州马铃薯Y病毒外壳蛋白基因的克隆与遗传分析 被引量:5
4
作者 陶刚 +3 位作者 李奇科 刘作易 郑世玲 朱英 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第3期524-530,共7页
本研究从中国贵州不同海拔地区采集感染马铃薯Y病毒(PVY)病害叶片,利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)方法克隆到长度为804bp的8个目的片段,序列分析表明为PVY外壳蛋白(PVY-CP)基因。通过与已经发表的PVY-CP基因序列进行比较和遗传分析,并根... 本研究从中国贵州不同海拔地区采集感染马铃薯Y病毒(PVY)病害叶片,利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)方法克隆到长度为804bp的8个目的片段,序列分析表明为PVY外壳蛋白(PVY-CP)基因。通过与已经发表的PVY-CP基因序列进行比较和遗传分析,并根据PVY的CP基因全长和5'端序列构建系统发育树,结果表明,本研究分离的PVY,7株为O株系,1株为NTN株系。 展开更多
关键词 马铃薯Y病毒 外壳蛋白基因 遗传分析
下载PDF
瞬时表达比较2种不同的RNAi载体的干涉效果 被引量:1
5
作者 陶刚 +4 位作者 李奇科 朱英 迟胜起 刘作易 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期543-547,共5页
RNAi with natural defence mechanism of homologous RNA degradation is widely used in research of antiviral plant.It is important to construct a highly efficent RNAi vector for transgenic plants of virus resis-tance.In ... RNAi with natural defence mechanism of homologous RNA degradation is widely used in research of antiviral plant.It is important to construct a highly efficent RNAi vector for transgenic plants of virus resis-tance.In this study,part fragments of coat protein gene of Potato virus Y(PVY)(451-750 bp) were inserted into the two expression vectors.Vector pROKY300 without intron and pHelY300 with PDK and CAT introns on the hpRNA stem were constructed.The silence efficiency of virus resistance of the two vectors was investigated as 88%(22/25)for pROKY300 and 92%(23/25) for pHelY300 through transient expression mediated by agroinfiltration.The results showed that both vectors were highly antiviral and elucidated the validity of RNAi-medicates resistance to virus. 展开更多
关键词 RNAI载体 瞬时表达 马铃薯Y病毒 植物表达载体 干涉 反向重复序列 抗病毒 复合侵染
原文传递
成像流式细胞仪在细胞吞噬研究中的应用
6
作者 周俊松 阳艾珍 《健康之路》 2015年第10期1-1,共1页
目前分析吞噬的方法,主要限于流式细胞仪和手动成像分析,提供的信息有限,无法实现高通量的快速筛选和吞噬定位。本文应用高速成像流式细胞仪这一以成像为基础的自动化分析系统,定量分析吞噬过程的结合和内化。结果显示双阳性信号的细胞... 目前分析吞噬的方法,主要限于流式细胞仪和手动成像分析,提供的信息有限,无法实现高通量的快速筛选和吞噬定位。本文应用高速成像流式细胞仪这一以成像为基础的自动化分析系统,定量分析吞噬过程的结合和内化。结果显示双阳性信号的细胞中,约64%为吞噬了微珠的细胞,另有约36%为结合微珠的细胞。因此,运用成像流式细胞仪可以准确定量吞噬中真正发生内化的细胞,区别开处于结合状态的细胞,为研究者们提供了研究吞噬作用的高通量方法。 展开更多
关键词 细胞生物学 吞噬 内化 结合 成像流式细胞仪
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部