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鸽圆环病毒浙江株△Cap基因的克隆与原核表达
被引量：
16
1
作者
余旭平
刘晓宁
+3 位作者
郑新添
邬
栋
栋
刘江梅
竺春
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第9期680-684,共5页
根据已发表的鸽圆环病毒(PiCV)序列,在V1ORF保守序列部位设计引物(目的片段长度为629bp),对浙江某鸽养殖场的病料进行PCR扩增检测,获得阳性样品;应用设计的删除核定位信号外壳蛋白基因(△Cap)的引物,扩增获得680bp的△Cap基因,克隆于pMD...
根据已发表的鸽圆环病毒(PiCV)序列,在V1ORF保守序列部位设计引物(目的片段长度为629bp),对浙江某鸽养殖场的病料进行PCR扩增检测,获得阳性样品;应用设计的删除核定位信号外壳蛋白基因(△Cap)的引物,扩增获得680bp的△Cap基因,克隆于pMD18-T载体,进行测序;将△Cap基因亚克隆到原核表达载体pET-28a进行融合表达,SDS-PAGE电泳检测发现,△Cap融合蛋白经IPTG诱导后在大肠杆菌中以包涵体形式表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的22.1%。
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关键词
鸽
圆环病毒
核定位信号
△Cap蛋白
表达
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职称材料
血清1和3型多杀性巴氏杆菌铁调控外膜蛋白共同抗原的初步分析
被引量：
15
2
作者
余旭平
邬
栋
栋
+3 位作者
刘晓宁
胡东建
杜鑫
陈玉银
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期245-250,共6页
用普通BHI和缺铁BHI培养基培养禽多杀性巴氏杆菌C48-19(血清1型)、P1059株(血清3型),提取外膜蛋白(OMPs),SDS-PAGE电泳比较不同培养条件下两株细菌的外膜蛋白,发现缺铁培养时2株细菌均增加了87、81、79、64、60.5 ku铁调控外膜蛋白(IROM...
用普通BHI和缺铁BHI培养基培养禽多杀性巴氏杆菌C48-19(血清1型)、P1059株(血清3型),提取外膜蛋白(OMPs),SDS-PAGE电泳比较不同培养条件下两株细菌的外膜蛋白,发现缺铁培养时2株细菌均增加了87、81、79、64、60.5 ku铁调控外膜蛋白(IROMPs)。以C48-19株攻毒后耐过的鸡血清作为抗体进行免疫印迹,检测到其中的87、79和60.5 ku蛋白是2株细菌共同的、具有交叉免疫反应性的IROMPs,推测这3种蛋白可能是这2个菌株的共同抗原,并可能在C48-19感染的鸡体内特异表达;对鸡胚尿囊液中培养的C48-19株OMPs的SDS-PAGE电泳和免疫印迹试验,也观察到类似IROMPs的表达。这些IROMPs的发现为亚单位疫苗的研制提供了候选蛋白。
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关键词
禽多杀性巴氏杆菌
铁调控外膜蛋白
SDS-PAGE
免疫印迹
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职称材料
反向疫苗学及其在动物医学中的应用
被引量：
1
3
作者
邬
栋
栋
刘晓宁
余旭平
《上海畜牧兽医通讯》
2007年第4期55-57,共3页
关键词
反向疫苗学
动物医学
重组亚单位疫苗
重组活载体疫苗
应用
基因缺失疫苗
分子生物学
DNA疫苗
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职称材料
题名
鸽圆环病毒浙江株△Cap基因的克隆与原核表达
被引量：
16
1
作者
余旭平
刘晓宁
郑新添
邬
栋
栋
刘江梅
竺春
机构
浙江大学动物科学学院
龙岩学院生物科学与工程系
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第9期680-684,共5页
文摘
根据已发表的鸽圆环病毒(PiCV)序列,在V1ORF保守序列部位设计引物(目的片段长度为629bp),对浙江某鸽养殖场的病料进行PCR扩增检测,获得阳性样品;应用设计的删除核定位信号外壳蛋白基因(△Cap)的引物,扩增获得680bp的△Cap基因,克隆于pMD18-T载体,进行测序;将△Cap基因亚克隆到原核表达载体pET-28a进行融合表达,SDS-PAGE电泳检测发现,△Cap融合蛋白经IPTG诱导后在大肠杆菌中以包涵体形式表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的22.1%。
关键词
鸽
圆环病毒
核定位信号
△Cap蛋白
表达
Keywords
pigeon
circovirus
nuclear localization signal
△Cap protein
expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
血清1和3型多杀性巴氏杆菌铁调控外膜蛋白共同抗原的初步分析
被引量：
15
2
作者
余旭平
邬
栋
栋
刘晓宁
胡东建
杜鑫
陈玉银
机构
浙江大学动物预防医学研究所
浙江大学应用生物资源研究所
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期245-250,共6页
基金
国家自然科学基金项目(30571380)资助
文摘
用普通BHI和缺铁BHI培养基培养禽多杀性巴氏杆菌C48-19(血清1型)、P1059株(血清3型),提取外膜蛋白(OMPs),SDS-PAGE电泳比较不同培养条件下两株细菌的外膜蛋白,发现缺铁培养时2株细菌均增加了87、81、79、64、60.5 ku铁调控外膜蛋白(IROMPs)。以C48-19株攻毒后耐过的鸡血清作为抗体进行免疫印迹,检测到其中的87、79和60.5 ku蛋白是2株细菌共同的、具有交叉免疫反应性的IROMPs,推测这3种蛋白可能是这2个菌株的共同抗原,并可能在C48-19感染的鸡体内特异表达;对鸡胚尿囊液中培养的C48-19株OMPs的SDS-PAGE电泳和免疫印迹试验,也观察到类似IROMPs的表达。这些IROMPs的发现为亚单位疫苗的研制提供了候选蛋白。
关键词
禽多杀性巴氏杆菌
铁调控外膜蛋白
SDS-PAGE
免疫印迹
Keywords
avian Pasteurella multocida
IROMPs
SDS-PAGE
Western blotting
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
反向疫苗学及其在动物医学中的应用
被引量：
1
3
作者
邬
栋
栋
刘晓宁
余旭平
机构
浙江大学预防兽医研究所
出处
《上海畜牧兽医通讯》
2007年第4期55-57,共3页
关键词
反向疫苗学
动物医学
重组亚单位疫苗
重组活载体疫苗
应用
基因缺失疫苗
分子生物学
DNA疫苗
分类号
S852.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸽圆环病毒浙江株△Cap基因的克隆与原核表达
余旭平
刘晓宁
郑新添
邬
栋
栋
刘江梅
竺春
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
16
下载PDF
职称材料
2
血清1和3型多杀性巴氏杆菌铁调控外膜蛋白共同抗原的初步分析
余旭平
邬
栋
栋
刘晓宁
胡东建
杜鑫
陈玉银
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
15
下载PDF
职称材料
3
反向疫苗学及其在动物医学中的应用
邬
栋
栋
刘晓宁
余旭平
《上海畜牧兽医通讯》
2007
1
下载PDF
职称材料
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