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人脐带间充质干细胞移植对老年痴呆小鼠脑、肝组织中衰老相关基因表达的影响 被引量:13
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作者 崔渊博 马珊珊 +6 位作者 姚宁 渠瑞娜 王欣欣 孟楠 杨波 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2015年第1期25-29,共5页
目的:研究人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)静脉移植对APP+转基因鼠衰老的调控作用,并从衰老相关基因角度探讨MSCs延缓衰老的机制。方法:采用PCR技术对老年痴呆APP+转基因鼠进行分子鉴定;将传至第3代的h UC-MSCs细胞密度调整为1×106m... 目的:研究人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)静脉移植对APP+转基因鼠衰老的调控作用,并从衰老相关基因角度探讨MSCs延缓衰老的机制。方法:采用PCR技术对老年痴呆APP+转基因鼠进行分子鉴定;将传至第3代的h UC-MSCs细胞密度调整为1×106m L-1后进行尾静脉移植。移植h UC-MSCs 3周后,通过Morris水迷宫实验从行为学水平检测干细胞移植对APP+转基因鼠的延缓衰老作用(检测小鼠的学习记忆能力),然后采用荧光定量PCR和Western blot法检测h UC-MSCs移植后小鼠脑及肝脏组织中与衰老相关的基因及蛋白[沉默信息调节因子2(Sirt2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、p16、p21、p53]表达的变化。结果:该实验共鉴定出12只APP+转基因鼠。与对照组相比,移植组小鼠逃避潜伏期时间明显缩短、穿越平台次数增加、在平台所在象限停留的时间延长,差异具有统计学意义(P均<0.05)。移植组APP+转基因鼠的脑及肝脏组织中PCNA和Sirt2基因的mRNA和蛋白相对表达量升高,p21及p53基因相对表达量降低(P均<0.05),而p16基因表达变化不明显(P>0.05)。结论:APP+转基因鼠经h UC-MSCs静脉移植治疗,学习记忆能力显著提高,延缓衰老作用明显,涉及衰老标志基因p21、p53、PCNA、Sirt2等表达调控改变,这些衰老标志基因之间相互联系,可能构成细胞衰老的基因调控链。 展开更多
关键词 干细胞移植 衰老 阿尔茨海默病 衰老相关基因
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粪菌移植对阿尔茨海默病小鼠学习记忆能力的影响 被引量:13
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作者 杨璐 李庆华 +7 位作者 许玲 刘雯雯 刘艳霞 黄团结 李鹏 张乐 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第6期702-706,共5页
目的:观察粪菌移植(FMT)对阿尔茨海默病模型小鼠(APP+转基因小鼠)学习记忆能力及脑内β淀粉样蛋白(Aβ)沉积的影响。方法:将15只小鼠分为APP-组、APP+组、FMT组,每组5只。对FMT组APP+小鼠进行FMT,每天1次,连续4周,APP+组及APP-组用生理... 目的:观察粪菌移植(FMT)对阿尔茨海默病模型小鼠(APP+转基因小鼠)学习记忆能力及脑内β淀粉样蛋白(Aβ)沉积的影响。方法:将15只小鼠分为APP-组、APP+组、FMT组,每组5只。对FMT组APP+小鼠进行FMT,每天1次,连续4周,APP+组及APP-组用生理盐水灌肠处理。4周后,通过Morris水迷宫实验观察各组小鼠认知能力和学习记忆能力;采用Western blot法检测小鼠脑组织中衰老相关蛋白(P21、P53、Sirt1、Sirt2、PCNA)的表达情况;采用刚果红染色法观察小鼠脑内Aβ沉积的变化情况。结果:与APP-组相比,APP+组小鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,目标象限停留时间减少(P<0.05)。经FMT处理后,FMT组小鼠与APP+组小鼠相比,逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多,目标象限停留时间延长,Aβ沉积减少,脑组织中衰老相关蛋白P21、P53表达减少,而Sirt1、Sirt2、PCNA表达增多(P<0.05)。结论:FMT可以改善阿尔茨海默病小鼠的学习记忆能力,减缓衰老,减少脑组织Aβ沉积。 展开更多
关键词 小鼠 阿尔茨海默病 粪菌移植 肠道菌群 Β淀粉样蛋白
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hUC-MSCs和白藜芦醇对AD小鼠学习记忆能力及脑内SIRT1信号通路的影响 被引量:9
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作者 王欣欣 马珊珊 +5 位作者 孟楠 黄团结 程康 杨波 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第5期576-579,共4页
目的:探讨人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)移植联合白藜芦醇(RES)灌胃对AD小鼠学习记忆能力的影响及对脑内SIRT1信号通路的调控作用。方法:40只AD小鼠随机分为AD组、h UC-MSCs组、RES组、h UC-MSCs联合RES组(联合组),每组10只。干预8周后... 目的:探讨人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)移植联合白藜芦醇(RES)灌胃对AD小鼠学习记忆能力的影响及对脑内SIRT1信号通路的调控作用。方法:40只AD小鼠随机分为AD组、h UC-MSCs组、RES组、h UC-MSCs联合RES组(联合组),每组10只。干预8周后,用Morris水迷宫评估小鼠学习记忆能力;取小鼠脑组织,采用免疫组化法检测Nestin的表达,TUNEL检测神经细胞凋亡,qRT-PCR检测神经营养因子BDNF、NGF和NT-3 mRNA的表达水平,Western blot法检测SIRT1、PCNA、P53、P21和P16的表达。结果:h UC-MSCs与RES均可使AD小鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多,目的象限停留时间增加;海马区再生细胞增多,凋亡细胞减少,BDNF、NGF和NT-3mRNA表达水平升高,SIRT1和PCNA蛋白的表达增强,P53、P21、P16蛋白的表达减弱(P<0.05)。h UC-MSCs和RES联合对AD小鼠学习记忆能力、神经细胞再生、BDNF以及SIRT1蛋白的表达具有协同作用(P<0.05)。结论:h UC-MSCs移植和RES灌胃可能通过调控脑内SIRT1信号通路共同促进AD小鼠学习记忆能力的改善。 展开更多
关键词 白藜芦醇 人脐带间充质干细胞 阿尔茨海默症 SIRT1 小鼠
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人脐带间充质干细胞神经分化微环境的优化 被引量:6
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作者 马珊珊 +4 位作者 王欣欣 孟楠 黄团结 韩康 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第4期469-474,共6页
目的:探讨人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)体外定向分化为神经元细胞的适宜条件,提高h UC-MSCs的分化效率,为神经细胞移植提供新细胞来源。方法:采用组织贴壁法分离培养h UC-MSCs,并应用流式细胞术鉴定其表面抗原;利用经典诱导(方案1)和... 目的:探讨人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)体外定向分化为神经元细胞的适宜条件,提高h UC-MSCs的分化效率,为神经细胞移植提供新细胞来源。方法:采用组织贴壁法分离培养h UC-MSCs,并应用流式细胞术鉴定其表面抗原;利用经典诱导(方案1)和复合诱导(方案2)两种方法定向诱导h UC-MSCs分化为神经元细胞,并以只加培养基的h UC-MSCs作对照。倒置显微镜下观察细胞形态变化,免疫细胞化学检测神经元迁移蛋白(DCX)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,qRT-PCR检测各组神经分化标记基因DCX、NSE、Mash、Ngn1的转录水平。结果:与对照组相比,两种方案均能诱导hU C-MSCs分化为神经元样细胞,开始表达DCX和NSE;但是,与方案1相比,方案2组的细胞NSE的阳性表达率更高(P<0.05),各神经分化标记基因mRNA表达水平升高(P<0.05),向神经元样细胞分化更明显。结论:复合诱导方案能有效改善神经分化微环境,促进hU C-MSCs定向分化为神经元样细胞。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 神经元 诱导分化 微环境 优化
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重组人MG53蛋白对人脐带间充质干细胞氧化损伤的保护作用 被引量:5
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作者 黄团结 宋及时 +6 位作者 马珊珊 程康 李鹏 刘腾飞 杨波 关方霞 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2017年第1期35-44,共10页
目的建立人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)的H_2O_2氧化损伤模型,探讨重组人MG53蛋白(rh MG53)对h UC-MSCs氧化损伤的保护作用。方法使用组织块培养法从健康人脐带沃顿胶组织中分离培养h UC-MSCs,流式细胞仪检测细胞表型;CCK-8法检测h UC-... 目的建立人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)的H_2O_2氧化损伤模型,探讨重组人MG53蛋白(rh MG53)对h UC-MSCs氧化损伤的保护作用。方法使用组织块培养法从健康人脐带沃顿胶组织中分离培养h UC-MSCs,流式细胞仪检测细胞表型;CCK-8法检测h UC-MSCs的增殖和H_2O_2损伤程度。实验分为正常对照组(NC组)、rh MG53组、H_2O_2组和H_2O_2+rh MG53组。分别采用CCK-8法、Transwell小室、流式细胞术和β-半乳糖苷酶染色检测rh MG53蛋白对h UC-MSCs增殖、迁移、周期凋亡和衰老的影响。各组、各个时间点的吸光值采用析因设计的方差分析,组间比较采用单因素方差分析。结果 h UC-MSCs贴壁呈梭型生长,高表达间充质干细胞标志CD44、CD133、HLA-ABC,低表达CD34、CD45;H_2O_2对h UC-MSCs具有浓度和时间依赖性的损伤作用,确定200μmol/L的H_2O_2处理16 h为h UC-MSCs氧化损伤的最适条件。与NC组相比,H_2O_2组细胞增殖(0.994±0.011 vs 1.331±0.014)、迁移率(8.15﹪±2.47﹪vs 33.34﹪±3.62﹪)和S期细胞比例(29.67﹪±3.69﹪vs 34.33﹪±4.25﹪)显著降低,细胞衰老(44.07﹪±5.26﹪vs 5.7﹪±1.42﹪)和凋亡比例(52.63﹪±5.76﹪vs 4.65﹪±1.23﹪)显著增加,差异具有统计学意义(均P<0.05);rh MG53组细胞增殖(1.509±0.086 vs 1.331±0.014)和迁移率(52.13﹪±5.46﹪vs 33.34﹪±3.62﹪)显著提高,S期比例(35.27﹪±4.79﹪vs 34.33﹪±4.25﹪)变化差异无统计学意义(P>0.05),细胞衰老(3.92﹪±1.31﹪vs 5.7﹪±1.42﹪)和凋亡比例(3.96﹪±1.06﹪vs 4.65﹪±1.23﹪)显著降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。与H_2O_2组相比,H_2O_2+rhMG53组细胞增殖(1.252±0.056 vs 0.994±0.011)、迁移率(18.93﹪±3.12﹪vs8.15﹪±2.47﹪)和S期比例(34.84﹪±3.45﹪vs 29.67﹪±3.69﹪)显著提高,细胞衰老(17.89﹪±2.64﹪vs 44.07﹪±5.26﹪)和凋亡比例(4.65﹪±1.23﹪vs 17.63﹪±2.56﹪)显著降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论 rhMG53对H_2O_2造成的h UC-MSCs氧化损伤� 展开更多
关键词 磷蛋白类 脐带 间质干细胞 创伤和损伤 保护
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氯化锂联合hUC-MSCs移植对阿尔茨海默病小鼠的治疗作用 被引量:5
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作者 孟楠 马珊珊 +5 位作者 王欣欣 姚宁 宋及时 黄团结 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第2期157-161,共5页
目的:研究氯化锂(LiCl)联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对阿尔茨海默病小鼠(APP^+转基因小鼠)的干预作用。方法:PCR鉴定为APP^+转基因小鼠40只随机分为4组:APP^+组、hUC-MSCs移植组、LiCl注射组、联合处理组(LiCl注射^+hUC-MSCs移... 目的:研究氯化锂(LiCl)联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对阿尔茨海默病小鼠(APP^+转基因小鼠)的干预作用。方法:PCR鉴定为APP^+转基因小鼠40只随机分为4组:APP^+组、hUC-MSCs移植组、LiCl注射组、联合处理组(LiCl注射^+hUC-MSCs移植)。处理1个月后,Morris水迷宫检测小鼠的认知水平,酶标仪法和分光光度法检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,qRT-PCR和Western blot法检测小鼠海马组织中Wnt/β-catenin通路相关因子的表达。结果:与APP^+组比较,LiCl注射组APP^+小鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多,平台所在象限停留时间延长,MDA含量下降,小鼠海马组织中β-catenin、c-Myc mRNA和蛋白表达量增加,GSK-3βmRNA和蛋白表达量降低(P均<0.05);hUC-MSCs移植可使APP^+小鼠血清中SOD活性升高(P均<0.05),其他指标的变化与LiCl注射组相同;LiCl注射联合hUC-MSCs移植对平台所在象限停留时间、MDA含量、c-Myc蛋白表达的影响具有协同效应(P<0.05)。结论:LiCl联合hUC-MSCs移植对APP^+转基因小鼠具有明显的治疗作用。 展开更多
关键词 氯化锂 WNT/Β-CATENIN通路 干细胞移植 阿尔茨海默病 小鼠
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海藻酸钠浓度对新型神经组织工程支架结构与性能的影响 被引量:4
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作者 张琨 马珊珊 +3 位作者 孟楠 石振庆 关方霞 《郑州大学学报(理学版)》 CAS 北大核心 2015年第4期99-102,共4页
探讨海藻酸钠溶液的浓度变化对藻酸盐水凝胶新型组织工程支架结构与性能的影响.在氯化钙溶液浓度相同的条件下,改变海藻酸钠溶液的浓度,制备出不同原料配比的藻酸盐水凝胶,冷冻干燥后于光学显微镜下观察其微观结构变化,测定水凝胶的含... 探讨海藻酸钠溶液的浓度变化对藻酸盐水凝胶新型组织工程支架结构与性能的影响.在氯化钙溶液浓度相同的条件下,改变海藻酸钠溶液的浓度,制备出不同原料配比的藻酸盐水凝胶,冷冻干燥后于光学显微镜下观察其微观结构变化,测定水凝胶的含水率与凝胶质量分数;将无菌的海藻酸钠溶液及间充质干细胞混合后,与氯化钙溶液反应得到包载干细胞的藻酸盐水凝胶,倒置荧光显微镜下观察水凝胶所释放出细胞的存活情况.在氯化钙浓度一定的条件下,随着海藻酸钠浓度的减小,水凝胶的空间网络结构由致密变得疏松,更易于细胞的生存与释放.实验表明,海藻酸钠水凝胶作为组织工程支架,用于神经损伤后修复具有较好的应用前景. 展开更多
关键词 海藻酸钠 氯化钙 脐带间充质干细胞 神经组织工程支架
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p16基因高表达对293细胞衰老的影响 被引量:4
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作者 马珊珊 刘静 +6 位作者 姚宁 崔渊博 王梦然 郭天宇 杨波 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期622-625,共4页
目的:探讨p16基因高表达对293细胞衰老的影响。方法:实验设正常组、空质粒组和高表达组。RTPCR扩增人p16基因,构建p16基因高表达载体,利用脂质体将其转染293细胞。采用CCK-8法和流式细胞术检测p16基因高表达对293细胞增殖和细胞周期的影... 目的:探讨p16基因高表达对293细胞衰老的影响。方法:实验设正常组、空质粒组和高表达组。RTPCR扩增人p16基因,构建p16基因高表达载体,利用脂质体将其转染293细胞。采用CCK-8法和流式细胞术检测p16基因高表达对293细胞增殖和细胞周期的影响,β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老状态,RT-PCR和Western blot法检测p16、p21 mRNA和蛋白的表达。结果:p16基因高表达可抑制293细胞的增殖,并将细胞阻滞在G0/G1期(F=158.057,P<0.001);高表达组细胞p16和p21在mRNA和蛋白水平的表达明显增加(F=73.467、54.988、9.923、44.060,P均<0.05),β-半乳糖苷酶阳性细胞率明显增加(F=137.266,P<0.001)。结论:p16基因高表达可抑制293细胞的增殖,将细胞阻滞在G0/G1期,提高细胞中p16和p21的表达,促进细胞衰老。 展开更多
关键词 P16 高表达 细胞衰老 调控 293细胞
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sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞衰老的抑制作用 被引量:4
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作者 马珊珊 崔渊博 +5 位作者 姚宁 韩康 宋及时 张彦婷 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第1期10-14,共5页
目的:观察sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)衰老的影响。方法:扩增人sirt2 ORF序列,利用腺病毒载体构建sirt2基因高表达的重组腺病毒(p Ad-sirt2),空斑法测定病毒滴度;感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况;... 目的:观察sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)衰老的影响。方法:扩增人sirt2 ORF序列,利用腺病毒载体构建sirt2基因高表达的重组腺病毒(p Ad-sirt2),空斑法测定病毒滴度;感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况;实验分为P3组(第3代h UC-MSCs)、P15组(第15代h UC-MSCs)和感染组(用p Ad-sirt2腺病毒感染第15代h UC-MSCs),CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期变化,β-半乳糖苷酶染色后检测阳性细胞率。结果:成功制备p Ad-sirt2重组腺病毒,病毒滴度为1.8×1011pfu/L;荧光观察证实Sirt2蛋白在h UC-MSCs中有效表达;与P15组相比,sirt2高表达可促进h UC-MSCs增殖,并将细胞周期阻滞在S期,β-半乳糖苷酶阳性细胞率降低(P均<0.05)。结论:sirt2基因高表达可促进h UC-MSCs增殖,延长细胞周期,并有效抑制h UC-MSCs的衰老。 展开更多
关键词 sirt2 腺病毒 人脐带间充质干细胞 衰老
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脐带沃顿胶干细胞移植对脊髓损伤大鼠炎症因子表达的影响 被引量:3
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作者 马珊珊 渠瑞娜 +6 位作者 田毅 姚宁 崔渊博 韩康 杨波 关方霞 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第23期3729-3735,共7页
背景:免疫炎症反应促使大量炎症因子的产生和释放是继发性脊髓损伤的其对主要原因。目的:探讨脐带沃顿胶干细胞移植对急性脊髓损伤大鼠的神经修复作用及其对炎症因子单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素10表达的影响。方法:81只健康成年雄性S... 背景:免疫炎症反应促使大量炎症因子的产生和释放是继发性脊髓损伤的其对主要原因。目的:探讨脐带沃顿胶干细胞移植对急性脊髓损伤大鼠的神经修复作用及其对炎症因子单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素10表达的影响。方法:81只健康成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组和脐带沃顿胶干细胞移植组(n=27),后两组以脊髓半切方法建立急性脊髓损伤模型,造模后脐带沃顿胶干细胞移植组经尾静脉移植1×106个脐带沃顿胶干细胞。移植后不同时间通过BBB评分评价各组大鼠的运动功能;ELISA检测不同时间点各组大鼠血清中单核细胞趋化蛋白1的含量;qR T-PCR和Western分析不同时间点损伤脊髓组织中单核细胞趋化蛋白1及白细胞介素10的表达;免疫组织化学检测损伤组织中脐带沃顿胶干细胞的迁移和神经分化情况。结果与结论:与假手术组和模型组相比,脐带沃顿胶干细胞移植组大鼠的神经功能明显恢复(P<0.05)。脐带沃顿胶干细胞移植组大鼠血清中单核细胞趋化蛋白1水平显著低于模型组(P<0.05)。脐带沃顿胶干细胞移植组脊髓组织单核细胞趋化蛋白1 mR NA和蛋白表达显著低于模型组(P<0.05),白细胞介素10 mR NA和蛋白表达显著高于模型组(P<0.05)。移植组中脐带沃顿胶干细胞可迁移至损伤部位,并表达神经胶质纤维酸性蛋白。这些结果提示脐带沃顿胶干细胞可能通过调控脊髓损伤组织的炎症反应,促进神经修复,这也可能是脐带沃顿胶干细胞治疗脊髓损伤的机制之一。 展开更多
关键词 脊髓损伤 脐带 干细胞移植 白细胞介素10 干细胞 移植 沃顿胶干细胞 神经修复 单核细胞趋化蛋白1 国家自然科学基金
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干细胞衰老的调控机制 被引量:2
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作者 马珊珊 姚宁 +4 位作者 王欣欣 韩康 孟楠 关方霞 《河南医学研究》 CAS 2015年第12期56-58,共3页
干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞群体。干细胞在特定的微环境下可分化为骨、脂肪、神经、肝脏等组织细胞,同时分泌多种生长因子和活性物质,为维持机体稳态和损伤修复发挥重要作用。曾经,人们一度认为干细胞是永生的,... 干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞群体。干细胞在特定的微环境下可分化为骨、脂肪、神经、肝脏等组织细胞,同时分泌多种生长因子和活性物质,为维持机体稳态和损伤修复发挥重要作用。曾经,人们一度认为干细胞是永生的,随着年龄的增长或体外传代次数的增加,许多干细胞,如血液、大脑、骨骼肌、皮肤、间充质干细胞的自我更新能力下降, 展开更多
关键词 干细胞衰老 DNA损伤 线粒体功能障碍 端粒长度 衰老相关基因 表观遗传调控
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MG53蛋白对器官缺血再灌注损伤保护作用的现在与未来 被引量:2
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作者 刘腾飞 周建康 +7 位作者 黄团结 程康 李鹏 李东朋 杨波 马珊珊 关方霞 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第20期3248-3254,共7页
背景:近年来随着休克治疗的进步以及动脉搭桥术、溶栓疗法、经皮腔内冠状动脉成形术、心脏外科体外循环、心肺脑复苏,断肢再植和器官移植等方法的建立和推广应用,多种器官缺血后重新得到血液再灌注。但缺血一定时间的器官重新恢复血液... 背景:近年来随着休克治疗的进步以及动脉搭桥术、溶栓疗法、经皮腔内冠状动脉成形术、心脏外科体外循环、心肺脑复苏,断肢再植和器官移植等方法的建立和推广应用,多种器官缺血后重新得到血液再灌注。但缺血一定时间的器官重新恢复血液供应后,会出现损伤加重的表现。目的:总结MG53蛋白在5种器官缺血再灌注损伤保护中的研究和进展,并为其进一步研究提供有益的参考。方法:应用计算机检索1986至2016年Pub Med、读秀学术搜索和CNKI数据库相关文章,英文检索词为"MG53,TRIM,Mitsugumin53,ischemic,reperfusion,Preconditioning,Preconditioning,RISK,membrane damage,Connexin43,KCh IP2",中文检索词为"MG53蛋白,缺血再灌注"。根据纳入与排除标准,最终保留61篇文献进行综述。结果与结论:(1)内源性MG53蛋白作为一种肌特异性膜修复蛋白,能参与肌细胞膜损伤修复作用和缺血预适应、缺血后适应保护作用;(2)外源性重组人MG53蛋白不仅对多种肌和非肌细胞膜损伤发挥修复作用,而且对心肌、骨骼肌、脑、肺脏和肾脏在内的多种器官缺血再灌注损伤还具有保护作用。 展开更多
关键词 血管 缺血 器官移植 组织工程 组织构建 MG53蛋白 器官缺血再灌注 修复 保护 作用机制 国家自然科学基金
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曲古霉素A预处理的hUC-MSCs移植对小鼠脑损伤的神经修复作用 被引量:2
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作者 程康 马珊珊 +7 位作者 程田 黄团结 石振庆 张涛 刘雯雯 许玲 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第4期385-388,共4页
目的:探讨30 nmol/L曲古霉素A(TSA)预处理的人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)移植对脑损伤(TBI)小鼠的神经修复和促进作用。方法:利用颅脑打击器和立体定位仪制作中度脑损伤小鼠模型,并将造模成功的27只小鼠随机分为Veh组、MSCs组和TSA+M... 目的:探讨30 nmol/L曲古霉素A(TSA)预处理的人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)移植对脑损伤(TBI)小鼠的神经修复和促进作用。方法:利用颅脑打击器和立体定位仪制作中度脑损伤小鼠模型,并将造模成功的27只小鼠随机分为Veh组、MSCs组和TSA+MSCs组;术后3天,PI染色评估各组小鼠脑损伤周围的细胞坏死情况,术后第1、2、3、7、14、21和28天,采用神经功能缺损程度评分(NDS评分)和糖水偏好实验评估小鼠神经运动感觉和抑郁情况;术后第28天采用qRT-PCR检测组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)和神经元特异性相关基因(DCX、MAP2)的表达。结果:与Veh组相比,MSCs组和TSA+MSCs组小鼠脑损伤周围的坏死细胞数明显减少,其中TSA+MSCs组降低更为明显(P<0.001)。术后第1天,各组小鼠的NDS评分差异无统计学意义;从术后第3天开始,TSA+MSCs组小鼠NDS评分低于MSCs组和Veh组(P<0.001);术后第28天,与其他两组相比,TSA+MSCs组小鼠蔗糖偏嗜度增强、HDAC1表达量降低,MAP2、DCX的表达量增加(P<0.001)。结论:TSA预处理能够有效促进h UC-MSCs移植对TBI小鼠的神经修复。 展开更多
关键词 曲古霉素A 人脐带间充质干细胞 移植 脑损伤 神经修复
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人脐带间充质干细胞移植治疗创伤性颅脑损伤的研究进展 被引量:2
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作者 刘腾飞 周建康 +7 位作者 黄团结 许玲 张夏清 王亚苹 杨波 马珊珊 关方霞 《中华灾害救援医学》 2017年第11期655-660,共6页
创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是发生在中枢神经系统的一种常见疾病。近年来人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)移植为其治疗提供了新思路。间充质干细胞(mesenchymal stem cell... 创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是发生在中枢神经系统的一种常见疾病。近年来人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)移植为其治疗提供了新思路。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)能优先归巢到受损组织,分泌多种因子从而发挥营养、保护、清理、激活和桥接作用。但是,目前干细胞移植治疗TBI的研究大部分还处于实验动物模型阶段,其在临床上的安全性和有效性仍缺乏有效证据,还需要在大宗和长期的临床试验中进行评价和验证。笔者对hUC-MSCs移植治疗TBI的研究进展情况作一综述,为其开展更为广泛的研究提供有益参考。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 移植 创伤性颅脑损伤
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脐带间充质干细胞治疗脑胶质瘤:作用机制、安全性和未来应用前景 被引量:1
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作者 周馨魁 马珊珊 +6 位作者 刘腾飞 周建康 黄团结 王亚苹 杨波 关方霞 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第17期2740-2746,共7页
背景:脐带间充质干细胞是一类具有自我更新能力、高度增殖能力和多向分化潜能的细胞。脐带间充质干细胞的特性尤其是肿瘤嗜性能力使其成为神经胶质瘤细胞治疗的理想工具。这些细胞可以通过旁分泌或者作为基因和药物的递送系统起作用。... 背景:脐带间充质干细胞是一类具有自我更新能力、高度增殖能力和多向分化潜能的细胞。脐带间充质干细胞的特性尤其是肿瘤嗜性能力使其成为神经胶质瘤细胞治疗的理想工具。这些细胞可以通过旁分泌或者作为基因和药物的递送系统起作用。已经证明脐带间充质干细胞能够抑制脑胶质瘤的生长并改善移植入大脑后的存活。目的:总结脐带间充质干细胞在脑胶质瘤治疗中分子机制和安全性的研究和进展,并为其进一步研究提供有益的参考。方法:应用计算机检索2000至2017年Pub Med和CNKI数据库相关文章,英文检索词为"Glioma;Umbilical cord mesenchymal stem cells",中文检索词为"胶质瘤;脐带间充质干细胞;安全性;分子机制"。根据纳入与排除标准,最终保留55篇文献进行综述。结果与结论:(1)脐带间充质干细胞治疗脑胶质瘤有着明显的作用;(2)脐带间充质干细胞可以通过其归巢特征、旁分泌机制、作为基因载体和共培养对脑胶质瘤进行治疗;(3)脐带间充质干细胞在脑胶质瘤的治疗中具有一定的安全性。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 间质干细胞 组织工程 脑胶质瘤 脐带间充质干细胞 细胞治疗 分子机制 细胞因子 安全性 综述 干细胞
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HDAC1基因沉默的hUC-MSCs移植对创伤性脑损伤小鼠的神经保护作用 被引量:1
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作者 许玲 +8 位作者 马珊珊 程田 杨璐 黄团结 程康 刘雯雯 刘艳霞 李鹏 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第6期697-701,共5页
目的:观察组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因沉默的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)静脉移植对创伤性脑损伤小鼠神经功能恢复的影响。方法:80只健康成年C57BL/6小鼠,利用立体定位仪和颅脑打击器制作中度脑损伤模型,分为Sham组、Vehicle组、hUC... 目的:观察组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因沉默的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)静脉移植对创伤性脑损伤小鼠神经功能恢复的影响。方法:80只健康成年C57BL/6小鼠,利用立体定位仪和颅脑打击器制作中度脑损伤模型,分为Sham组、Vehicle组、hUC-MSCs移植组和联合组(n=20)。移植后第1、3、7、14、21和28天,采用改良神经功能损伤评分系统评价小鼠神经功能恢复情况;通过Morris水迷宫实验、挂线实验、新物体识别实验评价小鼠长期运动及认知功能。结晶紫染色评估小鼠的脑损伤体积和观察海马CA3区神经元形态学改变;湿重法检测脑含水量;伊文斯蓝染色检测血脑屏障的开放程度。结果:与Vehicle组相比,hUC-MSCs移植组和联合组小鼠神经功能损伤评分降低,水迷宫实验中逃避潜伏期增加、穿越平台次数及在平台象限停留时间增加,挂线时间和辨别指数增加,其中联合组各指标均有明显改善(P<0.05)。与hUC-MSCs移植组相比,联合组小鼠脑损伤体积减少、脑含水量降低、血脑屏障开放程度减轻(P<0.05),且海马CA3区神经元丢失减少。结论:HDAC1基因沉默的hU-MSCs移植对创伤性脑损伤小鼠有较好的神经保护作用。 展开更多
关键词 HDAC1 基因沉默 hUC-MSC 创伤性脑损伤 小鼠 神经保护
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rhMG53作为低温保护剂对小鼠BMSCs生物学特性的影响 被引量:1
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作者 黄团结 马珊珊 +7 位作者 周建康 刘腾飞 周馨魁 王亚苹 杨波 麻建杰 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2018年第6期710-714,共5页
目的:探讨重组人MG53蛋白(rhMG53)作为干细胞低温保护剂的特殊组分对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)冷冻保存后生物学特性的影响。方法:常规培养BMSCs,分为对照组(DMEM/F12培养基、FBS、DMSO的体积比为5∶4∶1并添加30 mg/L BSA)和rhMG53... 目的:探讨重组人MG53蛋白(rhMG53)作为干细胞低温保护剂的特殊组分对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)冷冻保存后生物学特性的影响。方法:常规培养BMSCs,分为对照组(DMEM/F12培养基、FBS、DMSO的体积比为5∶4∶1并添加30 mg/L BSA)和rhMG53组(DMEM/F12培养基、FBS、DMSO的体积比为5∶4∶1并添加30mg/L rhMG53)冻存。冻存1 a后,复苏细胞,qRT-PCR检测两组细胞冻存复苏后干性相关基因Nanog、OCT4和SOX2 mRNA的表达; CCK-8法检测细胞增殖;台盼蓝染色检测细胞存活能力;茜素红S染色和油红O染色分别检测两组干细胞的成骨和成脂分化;免疫荧光检测两组细胞成神经分化相关因子DCX和NSE的表达。结果:与对照组相比,rhMG53组BMSCs的Nanog、OCT4和SOX2 mRNA表达无明显变化(P> 0. 05),但细胞增殖能力增强,存活率升高,成骨、成脂和成神经分化效率增加(P均<0. 05)。结论:rhMG53作为保护剂的特殊组分对冷冻保存的BMSCs有较好的保护效果。 展开更多
关键词 rhMG53 骨髓间充质干细胞 冷冻保存 保护剂 生物学特性
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rhMG53蛋白对小鼠创伤性脑损伤的保护作用
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作者 黄团结 马珊珊 +8 位作者 程田 程康 石振庆 张涛 刘雯雯 许玲 杨波 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第2期112-116,共5页
目的:探讨重组人MG53(rh MG53)蛋白对小鼠创伤性脑损伤(TBI)的保护作用。方法:采用自由落体打击法建立小鼠TBI模型,将造模小鼠随机分为TBI组和TBI+MG53组,每组21只。造模术后第1、3、7、14、21、28天检测小鼠体重变化并进行神经功能缺... 目的:探讨重组人MG53(rh MG53)蛋白对小鼠创伤性脑损伤(TBI)的保护作用。方法:采用自由落体打击法建立小鼠TBI模型,将造模小鼠随机分为TBI组和TBI+MG53组,每组21只。造模术后第1、3、7、14、21、28天检测小鼠体重变化并进行神经功能缺损评分(m NSS);术后第3天,通过Western blot检测脑组织中MG53蛋白的表达,干湿重法检测小鼠脑含水量,ELISA法检测血清中SOD和MDA含量;术后第27天,采用新事物识别实验检测小鼠认知功能;术后第28天,通过强迫游泳实验检测小鼠抑郁情况,CV染色检测脑损伤体积,qRT-PCR检测小鼠脑组织中神经营养因子BDNF和NGF mRNA的表达。结果:MG53能够迁移并分布于脑损伤部位;与TBI组相比,TBI+MG53组小鼠体重增加,m NSS降低,抑郁程度减轻,认知功能改善,血清中SOD的表达增加,MDA含量降低,同时脑含水量减少,脑损伤体积减小,损伤部位BDNF和NGF mRNA的表达增强(P均<0.05)。结论:外源rhMG53蛋白对TBI小鼠有明显的保护作用。 展开更多
关键词 MG53蛋白 小鼠 创伤性脑损伤
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HDAC1重组腺病毒载体的构建及鉴定
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作者 马珊珊 张琨 +3 位作者 黄团结 程康 关方霞 《郑州大学学报(理学版)》 CAS 北大核心 2016年第2期101-104,126,共5页
利用Ad-Easy腺病毒表达系统构建含有人源性组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因的重组腺病毒,并检测其在脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中的表达及对h UC-MSCs增殖的影响.RT-PCR扩增人HDAC1 ORF序列,构建p Ad Track-CMV-HDAC1重组腺病毒穿梭质粒... 利用Ad-Easy腺病毒表达系统构建含有人源性组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因的重组腺病毒,并检测其在脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中的表达及对h UC-MSCs增殖的影响.RT-PCR扩增人HDAC1 ORF序列,构建p Ad Track-CMV-HDAC1重组腺病毒穿梭质粒,Pme I单切后将其转化进入E.coli BJ5183与腺病毒骨架质粒同源重组,Pac I单切线性化后转染至HEK293细胞中扩增和包装p Ad-HDAC1,采用空斑法鉴定病毒滴度;p Ad-HDAC1感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达,qRT-PCR和Western Blot分别检测细胞中HDAC1在mRNA水平和蛋白水平的表达,CCK-8实验检测HDAC1高表达对h UC-MSCs增殖的影响.结果显示成功扩增人HDAC1 ORF序列并构建p Ad-HDAC1重组腺病毒;病毒感染后h UC-MSCs中HDAC1 mRNA和蛋白表达水平明显增高,并且促进h UC-MSCs的增殖.成功构建HDAC1高表达的腺病毒,可有效提高h UC-MSCs中HDAC1的表达并促进细胞增殖. 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰化酶1 腺病毒载体 脐带间充质干细胞 增殖
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慢病毒介导的RNA干扰下调p16的表达对hUC-MSCs衰老的影响
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作者 韩康 马珊珊 +8 位作者 朱相展 孟楠 王欣欣 黄团结 韩莉 石振庆 杨波 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第4期446-450,共5页
目的:利用慢病毒(LV)介导的RNA干扰下调老龄人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中p16基因的表达,研究p16表达下调与h UC-MSCs衰老的关系。方法:实验分为第3代(P3)h UC-MSCs组(P3组)、P15 h UC-MSCs组(P15组)、LV-sip16感染P15 h UC-MSCs组(L... 目的:利用慢病毒(LV)介导的RNA干扰下调老龄人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中p16基因的表达,研究p16表达下调与h UC-MSCs衰老的关系。方法:实验分为第3代(P3)h UC-MSCs组(P3组)、P15 h UC-MSCs组(P15组)、LV-sip16感染P15 h UC-MSCs组(LV-sip16组)和LV-NC感染P15 h UC-MSCs组(空病毒组)。采用CCK-8法检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶染色计算衰老细胞率,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,qRT-PCR检测衰老相关基因p16、p21、p53、p CNA、sirt1、sirt2、Cyclin D1、CDK4 mRNA的表达。结果:LV-sip16感染能促进P15 h UCMSCs增殖,降低衰老细胞率,促使细胞周期进入S期,抑制h UC-MSCs的早期凋亡(P均<0.05);同时,LV-sip16组细胞中p16、p21、p53 mRNA表达量较P15组降低,而p CNA、sirt1、sirt2、Cyclin D1、CDK4 mRNA表达量升高(P均<0.05)。结论:下调P15 h UC-MSCs中p16基因的表达能够延缓和改善h UC-MSCs的衰老。 展开更多
关键词 siRNA P16 慢病毒 人脐带间充质干细胞 衰老
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