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运动处方对HIFU术后子宫腺肌病患者痛经的影响 被引量:4
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作者 温相霞 陈锦云 +3 位作者 余单 汪炼 若曦 白晋 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期759-764,共6页
目的:评估运动处方联合高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)对子宫腺肌病患者痛经的影响。方法:纳入2017年1月到2018年3月HIFU治疗的子宫腺肌病患者,据患者术后对运动处方医嘱(150 min/周有氧运动)的执行情况分组,... 目的:评估运动处方联合高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)对子宫腺肌病患者痛经的影响。方法:纳入2017年1月到2018年3月HIFU治疗的子宫腺肌病患者,据患者术后对运动处方医嘱(150 min/周有氧运动)的执行情况分组,随访术后3、6、12个月痛经视觉模拟评分法(visual analogue score,VAS)评分及子宫体积变化。结果:本研究纳入217例子宫腺肌病女性患者,115例患者执行运动处方列为'运动组',运动处方依从率53.0%,102例患者无运动列为'无运动组',2组患者基线资料及HIFU治疗方案差异无统计学意义,组间具有可比性(P>0.05)。运动组和无运动组术前VAS评分差异无统计学意义(P=0.092),术后3、6、12个月运动组VAS评分分别为3.0(2.0,4.0)、2.0(0.0,3.0)和2.5(1.0,4.0)分,均低于无运动组的3.5(3.0,5.0)、4.0(2.0,5.8)和4.5(2.0,6.0)分,差异有统计学意义(P<0.01);术后3、6个月运动组子宫体积缩小中位数为9.780、14.046 cm3,而无运动组为2.935、-2.432 cm3,运动组术后3、6个月子宫体积缩小程度均高于无运动组(P<0.01)。结论:HIFU术后结合运动处方能够更有效降低VAS评分,缓解痛经症状,缩小子宫体积;运动处方可以作为子宫腺肌病HIFU术后康复治疗的方案,改善患者自我评价。 展开更多
关键词 子宫腺肌病 高强度聚焦超声 运动处方 痛经 视觉模拟评分法
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稳定表达绿色荧光蛋白的C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型的建立 被引量:4
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作者 江进 王菲 +3 位作者 曹友德 若曦 孙志卫 陈俊良 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期922-924,共3页
目的 采用原位种植方法,建立可稳定遗传绿色荧光蛋白(GFP)的kwis肺癌(LLC)C57BL/6小鼠模型.方法 用Matrigel胶分别包裹1×103、1 ×104、1×105个表达GFP的LLC细胞,原位种植于6~8周龄雌性C57BL/6小鼠,在第7、14、21、2... 目的 采用原位种植方法,建立可稳定遗传绿色荧光蛋白(GFP)的kwis肺癌(LLC)C57BL/6小鼠模型.方法 用Matrigel胶分别包裹1×103、1 ×104、1×105个表达GFP的LLC细胞,原位种植于6~8周龄雌性C57BL/6小鼠,在第7、14、21、28天每组分别解剖3只,采用Sellstrom Z87荧光护目镜和激光二极管泵浦(LDP) 470 nm的蓝光手电筒直接快速地观察成瘤与转移,统计成瘤率与成瘤时间,并行组织病理形态观察与电镜观察.结果 3组小鼠成瘤均稳定表达GFP,成瘤率分别为25.00%、58.33%、91.67%,与剂量呈正相关(P<0.01);成瘤时间分别为(23.33±4.04)、(21.00±5.72)、(18.45±-7.84)d,与剂量无明显相关((P>0.05).结论 成功建立稳定表达GFP的Lewis肺癌小鼠模型,可用于治疗肺癌药物的快速筛选. 展开更多
关键词 动物模型 快速筛选 绿色荧光蛋白 LEWIS肺癌
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新型悬浮细胞连续培养法分离小鼠Lewis肺癌干细胞及鉴定 被引量:2
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作者 刘永利 孔亮盛 +2 位作者 孙志卫 王健宇 若曦 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第1期35-43,共9页
该文主要探索从小鼠Lewis肺癌亲代细胞系(Lewis lung carcinoma parental cell line,LLC-Parental)中分离能够在体外长期培养的肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)的方法。在体外贴壁条件下培养LLC-Parental细胞,通过连续富集悬浮生长... 该文主要探索从小鼠Lewis肺癌亲代细胞系(Lewis lung carcinoma parental cell line,LLC-Parental)中分离能够在体外长期培养的肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)的方法。在体外贴壁条件下培养LLC-Parental细胞,通过连续富集悬浮生长的细胞,经过8代后,成功富集出可悬浮成球的小鼠Lewis肺癌干细胞样细胞株(LLC-spheroid enrichment,LLC-SE)。为了验证其干细胞特性,我们使用荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测表示干细胞特性的基因Bmi1(B-cell-specifi c moloney murine leukemia virus insertion site 1)、Cd133(cluster of differentiation-133)、Aldh1a1(aldehyde dehydrogenase family 1,subfamily A1)、Oct4(octamer-binding transcription factor 4)、Sox2(sexdetermining region Y box 2)、Nanog和Klf4(Kruppel-like factor 4)的表达。6孔板琼脂成球实验检测其增殖和悬浮成球能力。96孔板单细胞克隆形成实验检测单个细胞的克隆形成能力。裸鼠皮下移植这一干细胞特性检测的经典模型检测其体内致瘤能力以及C57同源小鼠左肺原位种植模型检测其肿瘤转移能力。Real-time PCR结果显示,LLC-SE细胞中Bmi1的表达水平显著高于LLC-Parental细胞。6孔板琼脂成球实验、96孔板单细胞克隆形成实验表明,LLC-SE细胞的悬浮成球能力和单细胞克隆能力显著高于LLC-Parental细胞。动物实验表明,LLC-SE细胞的体内致瘤能力、肿瘤转移能力强于LLC-Parental细胞。该文首次运用连续8次悬浮聚球法分离获得大量的可稳定传代的具有干细胞特性的LLC-SE细胞,为建立肿瘤干细胞细胞模型提供了新的方法,为进一步研究肿瘤干细胞的生物学特性奠定了基础。 展开更多
关键词 小鼠肺癌干细胞 悬浮聚球 BMI1
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Sec23a基因对人乳腺癌类肿瘤干细胞的干性抑制作用研究
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作者 周仕霞 孙志卫 +1 位作者 王健宇 若曦 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第5期648-657,共10页
该文使用新型悬浮细胞连续培养法从人乳腺癌细胞MDA-MB-435中分离出类肿瘤干细胞株(MDA-435-spheroid enrichment,MDA-435-SE),并通过流式细胞术检测细胞表面标志物以及裸鼠皮下成瘤实验,对MDA-435-SE细胞的类肿瘤干细胞特性进行了验证... 该文使用新型悬浮细胞连续培养法从人乳腺癌细胞MDA-MB-435中分离出类肿瘤干细胞株(MDA-435-spheroid enrichment,MDA-435-SE),并通过流式细胞术检测细胞表面标志物以及裸鼠皮下成瘤实验,对MDA-435-SE细胞的类肿瘤干细胞特性进行了验证。然后对MDA-435-SE细胞进行慢病毒感染,建立了稳定敲低Sec23a基因表达的细胞株MDA-435-SE-sh Sec23a和阴性对照细胞株MDA-435-SE-LV3NC,通过Cell Counting Kit-8增殖实验、96孔板单克隆成球实验和裸鼠皮下成瘤实验探索Sec23a基因对乳腺癌类肿瘤干细胞MDA-435-SE的干性调控作用。在乳腺癌类肿瘤干细胞MDA-435-SE中敲低Sec23a基因后,细胞的增殖曲线和倍增时间并没有明显改变,但细胞的体外成球直径和单细胞克隆效率均显著增强。动物实验表明,Sec23a基因的敲低可以显著提高乳腺癌类肿瘤干细胞MDA-435-SE的体内成瘤能力。该研究使用新型悬浮细胞连续培养的方法获得来源于人乳腺癌的类肿瘤干细胞株,并使用体内和体外干性相关实验验证了敲低Sec23a基因后,可以显著提高乳腺癌类肿瘤干细胞MDA-435-SE的干性,对肿瘤干细胞的研究具有重要的参考意义。 展开更多
关键词 人乳腺癌类肿瘤干细胞 悬浮聚球 Sec23a
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敲低Sec23a基因对人乳腺癌寡灶型转移细胞株体外细胞生物学特性的影响
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作者 孙志卫 周仕霞 +1 位作者 王健宇 若曦 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2016年第12期1451-1459,共9页
针对来源于乳腺癌细胞MDA-MB-435的小鼠肺癌寡灶型转移肿瘤细胞株MDA-435-OL,利用慢病毒感染的方法建立稳定敲低Sec23a基因表达的细胞株MDA-435-OL-Sec23a-GFP和其阴性对照细胞株MDA-435-OL-LV3NC-GFP,通过CCK-8(Cell Counting Kit-8)... 针对来源于乳腺癌细胞MDA-MB-435的小鼠肺癌寡灶型转移肿瘤细胞株MDA-435-OL,利用慢病毒感染的方法建立稳定敲低Sec23a基因表达的细胞株MDA-435-OL-Sec23a-GFP和其阴性对照细胞株MDA-435-OL-LV3NC-GFP,通过CCK-8(Cell Counting Kit-8)增殖实验、Transwell小室细胞迁移实验、侵袭实验和琼脂克隆斑形成实验探索敲低Sec23a基因后,寡灶型转移肿瘤细胞株体外细胞生物学特性的改变。在寡灶转移细胞株中敲低Sec23a基因后,细胞生长曲线与倍增时间并没有显著差异(28.23 h和28.32 h,P>0.05),但Transwell小室迁移细胞数量(58.50±2.81和39.60±3.21)、侵袭细胞数量(54.40±3.33和34.60±1.44)和细胞体外克隆形成率(0.67±0.05和0.37±0.03),均较阴性对照组显著增加(P<0.001)。该研究结果表明,乳腺癌寡灶型细胞株稳定敲低Sec23a基因后,细胞的增殖特性并没有明显变化,但细胞的迁移、侵袭能力和克隆形成能力均增强。 展开更多
关键词 Sec23α 寡灶型转移 乳腺癌
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miR200c过表达对寡灶型转移细胞株体外特性的影响
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作者 陈俊良 孙志卫 +1 位作者 王健宇 若曦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期2486-2491,共6页
目的探索miR200c稳定过表达对寡灶型转移肿瘤细胞株体外癌症生物学特性的影响。方法通过慢病毒感染建立稳定上调miR200c表达的寡灶型转移细胞株MDA-435-OL-miR200c(实验组),并同时建立阴性对照组(感染空质粒LV3NC)和阳性对照组(多灶型... 目的探索miR200c稳定过表达对寡灶型转移肿瘤细胞株体外癌症生物学特性的影响。方法通过慢病毒感染建立稳定上调miR200c表达的寡灶型转移细胞株MDA-435-OL-miR200c(实验组),并同时建立阴性对照组(感染空质粒LV3NC)和阳性对照组(多灶型细胞株MDA-435-POL),通过CCK-8增殖曲线测定、琼脂平板克隆实验、Transwell小室迁移和侵袭实验来阐明上调miR200c对寡灶型转移细胞体外特性的影响以及上调目的基因后寡灶型与多灶型转移细胞株体外癌症生物学特性的不同和联系。结果在稳定寡灶转移细胞株中过表达miR200c对细胞体外克隆形成率为(0.69±0.02),迁移细胞数为(21.20±2.35),侵袭细胞数为(56.80±5.22),均较阴性对照组显著增加(P<0.05),与阳性对照组体外特性基本一致。但miR200c过表达对增殖能力没有显著的影响。结论寡灶型细胞株稳定上调miR200c后体外克隆形成能力、迁移能力和侵袭能力均有所提高,且呈现出多灶型细胞株的特性。 展开更多
关键词 miR200c 寡灶转移 多灶转移
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小鼠Lewis肺癌细胞非对称分裂细胞系的建立及其干性特征
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作者 孔亮盛 刘永利 +2 位作者 孙志卫 王健宇 若曦 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第3期317-323,共7页
目的从小鼠Lewis肺癌细胞中分离建立非对称分裂细胞系,并初步鉴定其干性特征,为研究非对称分裂在癌症生物学中的作用奠定基础。方法通过8次连续悬浮聚球,随后5次单细胞克隆的方法,从小鼠Lewis肺癌细胞亲代细胞(LLC-parental cells)中得... 目的从小鼠Lewis肺癌细胞中分离建立非对称分裂细胞系,并初步鉴定其干性特征,为研究非对称分裂在癌症生物学中的作用奠定基础。方法通过8次连续悬浮聚球,随后5次单细胞克隆的方法,从小鼠Lewis肺癌细胞亲代细胞(LLC-parental cells)中得到非对称分裂细胞系(LLC-ASD cells);通过Brdu标记的免疫荧光实验检测LLC-ASD cells中细胞非对称分裂;进行RT-qPCR、克隆斑成斑实验、单细胞琼脂球形成实验、单细胞克隆形成实验对比两细胞系干性特征;并通过同种小鼠肺部移植成瘤实验和裸鼠皮下成瘤实验分别对比两种细胞系体内转移和成瘤能力。结果 LLC-ASD cells的非对称分裂比例达50%。LLC-ASD cells的克隆斑、悬浮球形成数量和单细胞克隆形成率均分别高于LLC-parental cells(P<0.05),LLC-ASD cells原位种植转移能力较LLC-parental cells明显增强,LLC-ASD cells的裸鼠皮下接种致瘤能力也高于LLC-parental cells(P<0.05)。结论成功建立了小鼠Lewis肺癌细胞非对称分裂细胞系(LLC-ASD cells),并且它表现出了一定干性特征,为研究非对称分裂在肿瘤中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 非对称分裂 肿瘤干细胞 小鼠LEWIS肺癌
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