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厌氧氨氧化细菌铜氧化酶异源表达及酶学分析
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作者 何沁霖 陈璇 +1 位作者 崇阳 陈猷鹏 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期80-86,共7页
厌氧氨氧化细菌是在地球生物氮循环过程中具有重要意义的一类微生物,利用其脱氮性能发展的厌氧氨氧化工艺是目前最具前景的污水生物脱氮技术,但是厌氧氨氧化细菌对环境变化敏感限制了实际工程的应用,因此有必要研究参与厌氧氨氧化细菌... 厌氧氨氧化细菌是在地球生物氮循环过程中具有重要意义的一类微生物,利用其脱氮性能发展的厌氧氨氧化工艺是目前最具前景的污水生物脱氮技术,但是厌氧氨氧化细菌对环境变化敏感限制了实际工程的应用,因此有必要研究参与厌氧氨氧化细菌应激机制的功能蛋白。铜氧化酶是细菌中参与细胞应激反应的一类蛋白,能够帮助细菌抵抗多种因素(如过氧化物、金属离子等)对细胞的侵害。该研究克隆了来自厌氧氨氧化细菌的铜氧化酶基因,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3)中过量表达,培养温度30℃,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷终浓度0.2 mmol/L为最佳诱导条件。对以包涵体形式存在的铜氧化酶进行纯化,经10%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,得知目的蛋白分子质量约为35 kD。优化了铜氧化酶的复性条件,获得了具有漆酶活性的目的蛋白,针对漆酶底物2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐的最适pH值是3,最适温度是35℃,在最适反应条件下,K_(m)为1538.91μmol/L,V_(max)为17.76μmol/(L·min),k_(cat)为1.09 s^(-1)。该研究为该类铜氧化酶在厌氧氨氧化细菌细胞应激过程中可能发挥的功能提供了新线索。 展开更多
关键词 铜氧化酶 异源重组表达 包涵体纯化复性 厌氧氨氧化
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甲泼尼龙冲击递减疗法治疗重症过敏性紫癜的临床疗效分析
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作者 崇阳 《基层医学论坛》 2014年第26期3527-3528,共2页
目的探讨应用甲泼尼龙冲击递减疗法治疗小儿重症过敏性紫癜(HSP)的临床效果。方法选择2012年3月—2013年11月在我院接受治疗的54例小儿重症HSP患儿,随机均分为观察组、对照组各27例。对照组给予常规琥珀酸氢化可的松治疗,观察组给予甲... 目的探讨应用甲泼尼龙冲击递减疗法治疗小儿重症过敏性紫癜(HSP)的临床效果。方法选择2012年3月—2013年11月在我院接受治疗的54例小儿重症HSP患儿,随机均分为观察组、对照组各27例。对照组给予常规琥珀酸氢化可的松治疗,观察组给予甲泼尼龙冲击递减疗法进行治疗,对2组治疗效果进行比较。结果对照组、观察组的总有效率分别为74.07%,96.30%,观察组明显高于对照组;观察组患者的腹痛缓解、皮疹消退、肾损害恢复等时间均明显短于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论应用甲泼尼龙冲击递减疗法对HSP患儿进行治疗,临床疗效显著,且安全性高。 展开更多
关键词 过敏性紫癜 重症 甲泼尼龙 冲击治疗递减
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羟胺对厌氧氨氧化污泥群落的影响 被引量:10
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作者 崇阳 范禹辰 +5 位作者 陈璇 郭劲松 申渝 晏鹏 方芳 陈猷鹏 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第7期3365-3372,共8页
目前,由于厌氧氨氧化(anaerobic ammonium oxidation,ANAMMOX)过程具有高效率、低能耗和污泥量少的优点,在污水除氮方面具有广阔的应用前景.羟胺既是厌氧氨氧化代谢的中间产物,同时也是一种抑制剂,但是目前关于厌氧氨氧化细菌颗粒如何... 目前,由于厌氧氨氧化(anaerobic ammonium oxidation,ANAMMOX)过程具有高效率、低能耗和污泥量少的优点,在污水除氮方面具有广阔的应用前景.羟胺既是厌氧氨氧化代谢的中间产物,同时也是一种抑制剂,但是目前关于厌氧氨氧化细菌颗粒如何应对羟胺的压力还没有很好的解释.通过羟胺批次添加实验,发现在投加不同浓度的羟胺情况下(40~80mg·L-1),厌氧氨氧化的反应活性受到了抑制作用,但是无法判断厌氧氨氧化细菌对羟胺的耐受阈值.然后基于实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测了不同反应器内肼氧化酶(HZO)的mRNA的表达量,发现HZO酶的表达量随着羟胺浓度的增加出现先升高后降低的趋势,由此本研究推测相对于3.12g·L-1的厌氧氨氧化颗粒污泥,其承受的羟胺浓度(以N计)阈值介于60~70mg·L-1.同时利用16S rRNA高通量测序的方法对反应器内的颗粒污泥微生物结构与功能进行分析,发现投加适量的羟胺(50mg·L-1)有助于增强颗粒污泥中细菌的细胞运动性,促进厌氧氨氧化细菌的组成,提供一个更佳的生态平衡. 展开更多
关键词 厌氧氨氧化(ANAMMOX) 羟胺 群落 肼氧化酶(HZO) 高通量测序
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