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基于8E5细胞的HIV-1病毒载量能力验证质控品制备及评估
1
作者 梅朋飞 米云婷 +7 位作者 朱禹静 周德 邓煜川 金聪 姚均 邢文革 潘品良 吕毅 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2024年第3期362-366,共5页
目的制备及评价基于8E5细胞的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)病毒载量能力验证质控品的均一性、稳定性和反复冻融性。方法将8E5细胞上清原液10倍梯度稀释得到浓度依次为106、105、104、103拷贝/ml的4组HIV-1... 目的制备及评价基于8E5细胞的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)病毒载量能力验证质控品的均一性、稳定性和反复冻融性。方法将8E5细胞上清原液10倍梯度稀释得到浓度依次为106、105、104、103拷贝/ml的4组HIV-1病毒载量能力验证质控品,应用病毒载量分析仪进行检测,将病毒拷贝数其换算成lg值,计算均值(xˉ)、标准差(s)、变异系数(coefficient of variation,CV)、变化趋势,并对质控品的均一性、稳定性和反复冻融性进行评价。结果在4个浓度梯度的均一性评价中,各浓度组质控品的CV分别为1.2%、2.6%、1.8%和3.2%。稳定性评价实验中,在-20℃条件下,各组质控品在5个月评价期间内,检测结果不随时间延长而改变(P>0.05)。在4℃条件下,各组质控品在5周评价期间内,检测结果随时间延长而未改变(P>0.05)。在25℃条件下,各组质控品在15 d评价期间内,检测结果随时间延长而减少(P<0.05)。冻融次数影响评价中,反复冻融次数对质控品影响不大,其检测结果均在(x±2s)范围浮动。结论基于8E5细胞上清液制备的质控品,在-20℃和4℃保存条件下均一性和稳定性较好,可作为HIV-1病毒载量能力验证质控品。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 病毒载量 RNA 8E5细胞 能力验证
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血浆HIV-1 RNA与干血斑HIV-1 DNA基因型耐药检测比较 被引量：2
2
作者 梅朋飞 朱禹静 +5 位作者 周德 吕毅 金聪 米云婷 邓煜川 姚均 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期9-13,共5页
目的通过对不同病毒载量的同一研究对象同时进行血浆HIV-1 RNA与干血斑HIV-1 DNA的基因型耐药检测并对结果进行比较,探讨HIV-1 DNA用于耐药检测的可行性和用途。方法2021年12月采集云南省、广西壮族自治区及新疆维吾尔自治区接受ART后1... 目的通过对不同病毒载量的同一研究对象同时进行血浆HIV-1 RNA与干血斑HIV-1 DNA的基因型耐药检测并对结果进行比较,探讨HIV-1 DNA用于耐药检测的可行性和用途。方法2021年12月采集云南省、广西壮族自治区及新疆维吾尔自治区接受ART后1年以上的HIV/AIDS患者静脉血5 mL,EDTA抗凝,分离血浆和制备成干血斑样本,分别提取病毒DNA和RNA进行pol区扩增,比较两种方法的扩增效率;并对同时扩增成功的序列利用MEGA7构建系统进化树并分析序列一致性。利用斯坦福大学HIV耐药数据库进行耐药位点分析,比较耐药性结果。结果209例样本中,来自云南82份(39.2%),来自广西壮族自治区69份(33.0%),来自新疆维吾尔自治区58份(27.8%)。105例VL<20拷贝/mL,25例20拷贝/mL≤VL<200拷贝/mL,42例200拷贝/mL≤VL<1000拷贝/mL,37例VL≥1000拷贝/mL。不同病毒载量的样本分类中,使用血浆中HIV-RNA pol区扩增成功率分别为12.4%、28.0%、69.0%、89.2%;使用干血斑中HIV-DNA pol区扩增成功率分别为39.0%、52.0%、59.5%、73.0%;血浆结合干血斑各组的扩增成功率为41.0%、56.0%、76.2%、89.2%。两种耐药检测方法同时扩增成功66例,耐药结果完全一致为98.5%,序列一致性99.7%。其中有58例(58/66,87.9%)配对样本耐药位点完全一致,8例配对样本耐药位点不完全一致。耐药位点不完全一致的配对样本中仅1例导致耐药结果不同,其他主要由混合碱基导致但未对耐药结果产生影响。结论应用干血斑HIV-1 DNA进行基因型耐药检测可以弥补目前血浆HIV-1 RNA耐药检测不足,特别是对病毒载量<1000拷贝/mL的样本,能够提高耐药检测效率。同时二者检测结果基因序列与耐药位点的一致性很好。结合干血斑样本容易制备、保存与运输的优点,提高了在偏远欠发达地区进行耐药监测的可及性。 展开更多
关键词 1型艾滋病病毒 病毒载量 脱氧核糖核酸 耐药 干血斑
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高效抗病毒治疗患者血浆中HIV-1 RNA与细胞中HIV-1 DNA定量研究 被引量：4
3
作者 朱禹静 梅朋飞 +3 位作者 徐晴晴 邓煜川 王爱玲 姚均 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期167-170,共4页
目的 探讨高效抗病毒治疗患者血浆中HIV-1RNA与细胞中HIV-1 DNA水平之间的关系及HIV-1 DNA定量在临床治疗疗效评价方面的意义。方法 选取云南省和广西壮族自治区216例接受高效抗病毒治疗的HIV感染者/AIDS患者纳入研究,收集同时期的血浆... 目的 探讨高效抗病毒治疗患者血浆中HIV-1RNA与细胞中HIV-1 DNA水平之间的关系及HIV-1 DNA定量在临床治疗疗效评价方面的意义。方法 选取云南省和广西壮族自治区216例接受高效抗病毒治疗的HIV感染者/AIDS患者纳入研究,收集同时期的血浆和干血斑样本,分别检测HIV-1 RNA和HIV-1 DNA载量。结果 216例患者中,58例血浆病毒载量低于检测下限(Lower than Detectable Level,LDL),有47例可检测到细胞中HIV-1 DNA,其中位数为2.15(1.55,2.83)log拷贝/10^(6)个细胞。158例可检测到血浆病毒载量,其水平为3.33(2.47,2.76)log拷贝/ml,其中149例可检测到细胞中HIV-1 DNA,其水平为2.50(1.94,2.98)log拷贝/10^(6)个细胞。血浆病毒载量与细胞中HIV-1 DNA定量值呈正相关(r=0.33,P<0.01)。结论 当接受长期抗病毒治疗患者的血浆病毒载量低于检测下限时,细胞中HIV-1 DNA的定量可以作为一种有效的辅助检测手段,为评价治疗效果提供更精准的依据。当血浆病毒载量可以检出时,细胞中HIV-1 DNA水平与血浆中病毒载量呈现正相关,提示HIV-1 DNA载量可以作为评价治疗效果的辅助指标。 展开更多
关键词 HIV-1 病毒载量 DNA定量 干血斑
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3例急性期HIV-1感染病例实验室检测及病毒亚型分析
4
作者 李佳 张京姬 +9 位作者 叶江竹 代漫 辛若雷 张琴 李砚萍 庞灿 邓煜川 李洁 黄春 卢红艳 《国际病毒学杂志》 2023年第1期71-74,共4页
目的对艾滋病筛查有反应而确证试验阴性或不确定病例进行随访和HIV-1核酸检测,分析感染毒株基因亚型。方法对3个艾滋病筛查有反应且免疫印迹试验(western blot,WB)阴性或不确定病例进行HIV-1核酸检测和随访。采用一步法RT-PCR扩增HIV-1 ... 目的对艾滋病筛查有反应而确证试验阴性或不确定病例进行随访和HIV-1核酸检测,分析感染毒株基因亚型。方法对3个艾滋病筛查有反应且免疫印迹试验(western blot,WB)阴性或不确定病例进行HIV-1核酸检测和随访。采用一步法RT-PCR扩增HIV-1 pol基因片段,构建系统进化树分析其基因亚型。结果3个HIV抗体筛查有反应病例,经WB检测病例1和3出现p24条、病例2未检测到特异条带。pol基因片段系统进化分析显示病例1和3均感染CRF07_BC毒株,病例2感染CRF01_AE毒株(第5簇)。对病例1和3进行2周后随访检测,WB条带有进展,HIV-1病毒载量分别为476385 cp/mL和103462 cp/mL,CD4^(+)T淋巴细胞计数分别为220个/µl和550个/µl。结论急性期HIV-1感染表现为筛查有反应而WB阴性或不确定,HIV-1核酸检测有助于提高急性期感染的发现和诊断能力。 展开更多
关键词 艾滋病病毒 急性期HIV-1感染 病毒载量 免疫印迹试验
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干血斑HIV-1 DNA定性检测用于HIV-1暴露婴儿早期诊断研究 被引量：1
5
作者 朱禹静 邓煜川 +2 位作者 梅朋飞 王爱玲 姚均 《中国病毒病杂志》 CAS 2022年第3期175-179,共5页
目的 评价精耐特(HIV-1)DNA检测试剂盒(简称精耐特试剂盒)与罗氏人类免疫缺陷病毒(1型)核酸检测试剂盒(简称罗氏试剂盒)用于诊断婴儿人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)感染的灵敏度、特异度和一致性。探究HIV-... 目的 评价精耐特(HIV-1)DNA检测试剂盒(简称精耐特试剂盒)与罗氏人类免疫缺陷病毒(1型)核酸检测试剂盒(简称罗氏试剂盒)用于诊断婴儿人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)感染的灵敏度、特异度和一致性。探究HIV-1 DNA定性检测用于我国婴儿早期诊断的可行性。方法 将169例来自云南、广西、四川、新疆的HIV阳性母亲所生婴儿纳入研究,每个婴儿至少收集1份出生后至3月龄内的干血斑样本,1份>18月龄的血浆样本。干血斑常温、血浆冷冻运送至中国疾病预防控制中心艾滋病预防控制中心参比室。分别用精耐特和罗氏试剂盒对干血斑样本提取HIV-1 DNA和HIV-1 RNA并进行检测,评价灵敏度、特异度和一致性。对>18月龄的血浆样本做酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunoassay,ELISA)抗体筛查和重组免疫印迹试验(recombination immunoblotassay,RIBA)确证,根据国家标准《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断(WS 293—2019)》判断婴儿最终感染状态。用Excel进行数据分组、整理,用SAS 9.2进行统计学分析。结果 纳入的169个婴儿,最终41例感染HIV,128例未感染。共收集到237份干血斑样本,精耐特和罗氏试剂盒灵敏度均为100.00%,特异度分别为98.87%、99.44%。两种试剂盒检测结果不一致3例,检测结果一致率为98.73%(234/237),Kappa值为0.967,95%可信区间(CI):0.930~1.000,P<0.001。结论 精耐特HIV-1 DNA定性检测试剂盒用于干血斑进行婴儿早期HIV感染诊断具有很好的灵敏度和特异度,且检测结果与罗氏HIV-1 RNA定性试剂盒检测结果具有较好的一致性,可用于我国婴儿的早期诊断,特别是可以为偏远欠发达地区HIV-1暴露婴儿早诊断、早治疗提供便利。 展开更多
关键词 HIV-1 婴儿早期诊断 干血斑 定性检测
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未经抗病毒治疗的HIV感染孕产妇的毒株基因亚型和耐药分析
6
作者 邓煜川 徐晴晴 +3 位作者 朱禹静 李珍 王爱玲 姚均 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期23-27,共5页
目的了解云南、四川、广东、广西壮族自治区和新疆维吾尔自治区等五个地区人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)感染孕产妇体内毒株基因亚型及耐药情况。方法选取2016年6月—2019年6月229例未接受抗逆转录病毒治疗(anti... 目的了解云南、四川、广东、广西壮族自治区和新疆维吾尔自治区等五个地区人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)感染孕产妇体内毒株基因亚型及耐药情况。方法选取2016年6月—2019年6月229例未接受抗逆转录病毒治疗(antiretroviral therapy treatment, ART)的孕产妇HIV感染者产时外周血血浆,提取HIV-1核糖核酸(RNA),通过巢式聚合酶链式反应扩增HIV蛋白酶区(PR)、反转录酶区(RT)并测序。根据基因测序结果进行基因亚型和耐药突变位点以及抗病毒药物耐药情况的分析。结果 229例未经ART的HIV感染孕产妇血浆成功扩增197例,CRF07BC亚型87例(44.16%)、CRF08BC亚型56例(28.43%)、CRF01AE亚型44例(22.34%)、特殊重组亚型9例(4.57%)以及CRF85BC1例(0.51%)。其中16例发生耐药,耐药率为8.12%(16/197),22例含有耐药突变位点。发生核苷类反转录酶抑制剂(nucleotide reverse transcriptase inhibitor, NRTIs)、非核苷类反转录酶抑制剂(non-nucleoside reverse transcri ptase inhibitors, NNRTIs)、蛋白酶抑制剂(protease inhibitor, PIs)耐药突变频数分别为4例、18例和1例,其中有1例出现NRTIs和NNRTIs的双重耐药突变位点。耐药位点与HIV基因分型差异有统计学意义(P<0.01),考虑耐药突变存在亚型特异性。结论我国HIV感染的孕产妇人群中HIV基因亚型呈多样性。该人群传播性耐药率已经高于WHO耐药监测阈值,其耐药传播情况属中度流行水平,不同基因型耐药情况存在差异性。应该加强对该重点人群的耐药监测,为母婴阻断提供更加科学有效的抗病毒治疗措施。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 基因亚型 耐药分析
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孕期未接受抗病毒治疗的人类免疫缺陷病毒阳性孕产妇病毒载量及耐药研究
7
作者 徐晴晴 李珍 +6 位作者 王爱玲 潘丽璇 邓煜川 任雅楠 马洁琼 陈凯 姚均 《中国病毒病杂志》 CAS 2020年第3期189-193,共5页
目的分析孕期未接受抗病毒治疗的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)阳性孕产妇病毒载量及耐药情况,探讨病毒载量与母婴传播的关系。方法以云南、广西、新疆、四川和广东为研究地区,选择2016年3月-2019年6月孕期未接... 目的分析孕期未接受抗病毒治疗的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)阳性孕产妇病毒载量及耐药情况,探讨病毒载量与母婴传播的关系。方法以云南、广西、新疆、四川和广东为研究地区,选择2016年3月-2019年6月孕期未接受抗病毒治疗的HIV阳性孕产妇及其所生婴儿为研究对象,检测孕产妇产时血浆HIV病毒载量和婴儿干血斑HIV核酸,采用Mann-Whitney U秩和检验分析孕产妇产时HIV病毒载量与母婴传播的关系,并对孕产妇血浆进行耐药基因检测。结果本研究共纳入104对母婴,9个婴儿诊断为阳性,母婴传播率为8.7%(9/104)。与未发生母婴传播的母亲相比,发生母婴传播的母亲在产时的HIV病毒载量对数中值明显更高(4.18 vs 3.54,P=0.029),差异有统计学意义。且HIV病毒载量<1000拷贝/ml的孕产妇均未发生母婴传播。91例孕产妇基因扩增成功,其中8例发生耐药,耐药率为8.8%(8/91)。结论孕期未接受抗病毒治疗的HIV阳性孕产妇病毒载量与母婴传播有直接关系,产时HIV病毒载量越高,发生母婴传播概率越大,提示对于高风险的孕产妇应尽早检测,对于HIV阳性孕产妇应尽早进行抗病毒治疗,减少母婴传播。同时,需进行耐药检测,为孕产妇提供更精准的干预措施。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒(HIV) 获得性免疫缺陷综合征(AIDS) 母婴传播 病毒载量 耐药
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HIV抗体阳性产妇乳汁中病毒载量分析
8
作者 徐晴晴 邓煜川 +2 位作者 李珍 王爱玲 姚均 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期476-478,521,共4页
目的分析艾滋病病毒(HIV)抗体阳性的产妇乳汁中病毒载量及与血浆病毒载量的相关性;分析抗病毒治疗(ART)对血浆病毒载量和乳汁病毒载量影响;为HIV抗体阳性母亲是否进行母乳喂养提供参考依据。方法以2016年3月至2019年6月期间,孕期或产时... 目的分析艾滋病病毒(HIV)抗体阳性的产妇乳汁中病毒载量及与血浆病毒载量的相关性;分析抗病毒治疗(ART)对血浆病毒载量和乳汁病毒载量影响;为HIV抗体阳性母亲是否进行母乳喂养提供参考依据。方法以2016年3月至2019年6月期间,孕期或产时才发现感染HIV的产妇为研究对象,检测产妇产时乳汁和血浆HIV病毒载量,采用配对秩和检验分析血浆和乳汁中病毒载量差异,采用单因素Logistic回归和Spearman rank相关分析血浆病毒载量和乳汁病毒载量的相关性,采用Wilcoxon秩和检验分析ART对血浆病毒载量和乳汁病毒载量影响。结果共纳入84例研究对象,其中18例乳汁中能检测到HIV病毒载量,检出率为21.4%,77例血浆中能检测到病毒载量,检出率为91.7%。血浆病毒载量<100拷贝/mL的产妇,乳汁中病毒载量检测不到。乳汁病毒载量低于血浆病毒载量,二者差异有统计学意义(P <0.001)。乳汁中病毒载量和血浆中病毒载量为正相关关系(P=0.020),相关系数为0.253。接受ART的产妇血浆病毒载量低于未接受ART的产妇,差异有统计学意义(P=0.040),但乳汁病毒载量差异无统计学意义(P=0.521)。结论部分HIV抗体阳性产妇乳汁中能检测到HIV病毒载量,提示HIV抗体阳性产妇母乳喂养存在母婴传播的风险,乳汁中病毒载量与血浆中病毒载量为正相关关系。HIV抗体阳性产妇是否能进行母乳喂养需要结合产妇病毒是否完全抑制、社会、环境、宗教等多个因素综合决定。 展开更多
关键词 艾滋病 乳汁 血浆 病毒载量
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