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分子伴侣协助下抗肿瘤抗生素美达霉素生物合成中的糖基转移酶Med-ORF8的原核表达 被引量：11
1
作者 万娟 邓会群 +3 位作者 张碧乾 王蔚 蔡晓凤 李爱英 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期221-227,共7页
糖基转移酶在天然产物的糖基化修饰过程中起关键作用。目前链霉菌源抗肿瘤抗生素美达霉素(Medermycin)生物合成途径中的糖基转移酶Med-ORF8的原核表达及酶学性质还未有研究。首先通过结构模拟确定Med-ORF8的端部加上His-标签不会影响其... 糖基转移酶在天然产物的糖基化修饰过程中起关键作用。目前链霉菌源抗肿瘤抗生素美达霉素(Medermycin)生物合成途径中的糖基转移酶Med-ORF8的原核表达及酶学性质还未有研究。首先通过结构模拟确定Med-ORF8的端部加上His-标签不会影响其三维结构的正确折叠,然后利用2种pET原核表达载体来进行Med-ORF8的原核表达,发现以pET-28a(+)为载体进行表达时,目的蛋白产量非常高,但是以不可溶的包涵体形式为主。当分子伴侣基因(编码大肠杆菌触发因子)与Med-ORF8的编码基因共表达时,在优化诱导条件的情况下,可以有效减少包涵体的形成,提高了Med-ORF8的可溶性表达效率,为Med-ORF8的酶学分析打下基础。 展开更多
关键词 糖基化 美达霉素 糖基转移酶 原核表达 分子伴侣
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天然产物的C-糖基化研究进展 被引量：4
2
作者 邓会群 王惠利 +2 位作者 杨红 洪华珠 李爱英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期27-30,共4页
自然界中的天然产物在其结构上存在各种修饰,C糖-基化为其中一种比较稀少的修饰方式。C-C糖苷键的形成由C-糖基转移酶负责催化。含C-糖基的化合物多数来自微生物,但高等植物也会有少量积累。综述了近些年来在天然产物C-糖基化方面的研... 自然界中的天然产物在其结构上存在各种修饰,C糖-基化为其中一种比较稀少的修饰方式。C-C糖苷键的形成由C-糖基转移酶负责催化。含C-糖基的化合物多数来自微生物,但高等植物也会有少量积累。综述了近些年来在天然产物C-糖基化方面的研究工作,并对其在药物开发方面的潜力进行了展望。 展开更多
关键词 天然产物 结构修饰 C—C糖苷键 C-糖基化 C-糖基转移酶
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大引物PCR定点突变方法的改进 被引量：5
3
作者 张碧乾 邓会群 +4 位作者 宫彩霞 杨青 彭建新 洪华珠 李爱英 《湖北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2009年第1期79-81,共3页
对大引物PCR定点突变方法进行改进,主要包括:避免在一个PCR反应中同时使用扩增全长基因的常规引物,选择不同载体克隆原始基因和突变基因,通过抗性选择筛选突变子,从而完全避免原始基因的干扰.实验结果证明利用改进后的方法进行基因点突... 对大引物PCR定点突变方法进行改进,主要包括:避免在一个PCR反应中同时使用扩增全长基因的常规引物,选择不同载体克隆原始基因和突变基因,通过抗性选择筛选突变子,从而完全避免原始基因的干扰.实验结果证明利用改进后的方法进行基因点突变,可以减少操作步骤,提高突变频率. 展开更多
关键词 改进的大引物PCR点突变 基因克隆
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