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高灵敏黄曲霉毒素B1酶联免疫试剂盒的研制及应用 被引量：16
1
作者 孙清 李谷丰 +2 位作者 邓乾民 刘杰民 时国庆 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1845-1853,共9页
为实现对环境及食品样品中黄曲霉毒素B1的高灵敏检测,通过优化一系列试剂盒参数,研制了一步间接竞争ELISA检测试剂盒.优化后的包被缓冲液为90 mmol·L-1、pH 4.6的柠檬酸缓冲液,最佳反应pH值为7.4,抗体包被浓度为0.2μg·m L-1,... 为实现对环境及食品样品中黄曲霉毒素B1的高灵敏检测,通过优化一系列试剂盒参数,研制了一步间接竞争ELISA检测试剂盒.优化后的包被缓冲液为90 mmol·L-1、pH 4.6的柠檬酸缓冲液,最佳反应pH值为7.4,抗体包被浓度为0.2μg·m L-1,HRP-BSA-AFB1稀释比为1/4000,标品稀释液为含7%甲醇的PBST溶液.优化后试剂盒IC50值为66 pg·m L-1,检测限为7.6 pg·m L-1,检测线性范围为10—810 pg·m L-1.试剂盒对不同AFB1添加水平(0.5μg·kg-1,1μg·kg-1)的玉米、豆粕和鱼粉样品平均回收率为108.4%—134.8%.对玉米、豆粕和鱼粉样品各20份盲样测试结果表明,试剂盒检测结果与HPLC-MS/MS检测结果吻合. 展开更多
关键词 ELISA 黄曲霉毒素B1 残留 试剂盒
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黄曲霉毒素M_1和黄曲霉毒素B_1总量酶联免疫试剂盒的研制及应用 被引量：3
2
作者 孙清 李馥雪 +3 位作者 贾玉军 邓乾民 刘杰民 时国庆 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2501-2510,共10页
通过合成黄曲霉毒素M_1(AFM_1)完全抗原AFM_1-BSA并免疫小鼠,成功制备了AFM_1单克隆抗体2F12.通过以辣根过氧化物酶(HRP)标记的AFB1作为竞争抗原,成功研制了能同时检测液态奶、酸奶和奶粉中AFM_1和AFB1的ELISA试剂盒,该试剂盒的最低检测... 通过合成黄曲霉毒素M_1(AFM_1)完全抗原AFM_1-BSA并免疫小鼠,成功制备了AFM_1单克隆抗体2F12.通过以辣根过氧化物酶(HRP)标记的AFB1作为竞争抗原,成功研制了能同时检测液态奶、酸奶和奶粉中AFM_1和AFB1的ELISA试剂盒,该试剂盒的最低检测限(IC10)为37 pg·m L^(-1),IC50为211 pg·m L^(-1),线性范围为50—1500 pg·m L^(-1),对AFM1和AFB1的交叉反应率分别为100%和102%,对其它黄曲霉毒素的交叉反应率小于20%.利用建立的试剂盒对多种样品进行了加标回收实验,回收率在87.9%—109.1%之间,批内相对标准偏差在3.9%—10.8%之间,批间相对标准偏差≤11.1%.多次对比试验表明,试剂盒的检测结果与进口试剂盒相当. 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定 黄曲霉毒素M. 黄曲霉毒素B1 牛奶 试剂盒
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植物源蛋白酶体抑制剂的分子对接研究
3
作者 钟广蓉 邓乾民 +3 位作者 李星月 林森 孙清 时国庆 《科学技术与工程》 2009年第11期3057-3059,共3页
利用Autodock分子对接软件预测了左旋紫草素、雪胆甲素、靛玉红、高三尖杉酯碱、脱水穿心莲内酯5种化合物与蛋白酶体β5亚基的结合能力,并考察了上述5种化合物对纯化20S蛋白酶体糜蛋白酶样活性的抑制作用,研究表明,化合物和蛋白酶体β5... 利用Autodock分子对接软件预测了左旋紫草素、雪胆甲素、靛玉红、高三尖杉酯碱、脱水穿心莲内酯5种化合物与蛋白酶体β5亚基的结合能力,并考察了上述5种化合物对纯化20S蛋白酶体糜蛋白酶样活性的抑制作用,研究表明,化合物和蛋白酶体β5亚基的预测结合自由能与实测的抑制活性线形相关。证明分子对接技术是筛选蛋白酶体抑制剂的一种有效的方法。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 分子对接 抗癌药物
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有机锡化合物与蛋白酶体β5亚基相互作用的分子模型
4
作者 时国庆 孙清 +4 位作者 杨焕杰 窦庆平 邓乾民 王海鸥 钟广蓉 《中国科学：化学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1721-1721,共1页
有机锡化合物能够抑制蛋白酶体的类糜蛋白酶活性(CT),导致细胞死亡,但是其与蛋白酶体的相互作用形式并不清楚.本文测定了丁基锡化合物和苯基锡化合物对蛋白酶体CT活性的IC50值,探讨了有机锡化合物对蛋白酶体CT活性的抑制作用形式.研究表... 有机锡化合物能够抑制蛋白酶体的类糜蛋白酶活性(CT),导致细胞死亡,但是其与蛋白酶体的相互作用形式并不清楚.本文测定了丁基锡化合物和苯基锡化合物对蛋白酶体CT活性的IC50值,探讨了有机锡化合物对蛋白酶体CT活性的抑制作用形式.研究表明,对蛋白酶体CT活性,本文研究的一取代或二取代有机锡是弱的、可逆抑制剂,而三丁基锡、三苯基锡是强的、不可逆抑制剂.计算机分子对接分析表明,对于可逆抑制CT活性的有机锡化合物,其预测抑制常数与实测IC50值有良好的线性相关性.三丁基锡和三苯基锡上的Sn原子可能与β5亚基上的Thr1Oγ形成共价配位键,从而不可逆抑制CT活性.总之,本文建立的计算机分子对接模型很好地解释了有机锡化合物与蛋白酶体β5亚基的相互作用形式,这也将有助于了解类似金属化合物与蛋白酶体的相互作用机制. 展开更多
关键词 分子对接 有机锡 蛋白酶体 类糜蛋白酶活性
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