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甘肃部分地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的细菌多位点序列分型与毒力检测 被引量：9
1
作者 陈婷婷 达举云 +6 位作者 申玉龙 门倩云 李宗帅 王媛媛 杨孝朴 张勇 赵兴绪 《动物医学进展》 北大核心 2021年第6期24-30,共7页
为研究甘肃地区牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的耐药情况、基因型总体结构特征及毒力因子的分布情况,从甘肃省东、中和西部3个地区的3个县市采集41头罹患临床型乳房炎奶牛的93份乳样,采用鉴别培养基分离纯化细菌。采用K-B... 为研究甘肃地区牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的耐药情况、基因型总体结构特征及毒力因子的分布情况,从甘肃省东、中和西部3个地区的3个县市采集41头罹患临床型乳房炎奶牛的93份乳样,采用鉴别培养基分离纯化细菌。采用K-B法对分离株进行耐药性分析,常规PCR方法检测mecA抗性基因和14种常见毒力基因以及多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)。结果显示,93份乳样中分离出28株金黄色葡萄球菌;分离株有不同程度的耐药且多为多重耐药(16株),多重耐药菌株占57.14%,未发现耐万古霉素菌株(VRSA),万古霉素敏感率为100%;28株分离菌中共检出mecA阳性11株,检出率为39.3%;共获得9个已知ST型;有12种毒力基因不同程度被检出,其中nuc、spa和coa检出率为100%,hlb、set1、clfA、FnBPA和seb阳性检出率均大于50%,sak、seg、PVL和sea的检出率依次为28.6%、7.9%、14.3%和21.4%,而FnBPB、hla基因未检出。研究结果可为甘肃省牛源金黄色葡萄球菌的耐药性评价、溯源分析和治疗提供参考依据。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 耐药性 多位点序列分型 毒力基因
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银川某牛场牛源金黄色葡萄球菌的耐药性分析及毒力基因检测 被引量：7
2
作者 达举云 宋倩 +5 位作者 史金莲 卢挺 崔晓 丁渲攀 张勇 赵兴绪 《动物医学进展》 北大核心 2023年第6期33-40,共8页
为了解宁夏某牛场引发奶牛乳房炎致病菌情况,采集临床型乳房炎奶牛乳样52份,采用Baid-Parker选择性培养基分离纯化细菌,革兰氏染色镜检、生化试验、16S rDNA序列分析鉴定疑似菌株。采用琼脂纸片扩散法(K-B法)对细菌进行药敏试验,利用PC... 为了解宁夏某牛场引发奶牛乳房炎致病菌情况,采集临床型乳房炎奶牛乳样52份,采用Baid-Parker选择性培养基分离纯化细菌,革兰氏染色镜检、生化试验、16S rDNA序列分析鉴定疑似菌株。采用琼脂纸片扩散法(K-B法)对细菌进行药敏试验,利用PCR检测分离株中携带的耐药基因、mecA基因和毒力基因。结果显示,52份乳样分离鉴定出29株金黄色葡萄球菌,其中有12株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),检出率为41.4%;不同程度的多重耐药菌株达到20株,多重耐药率达到68.9%,万古霉素的敏感率为100%,左氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星的敏感率达到了65%以上;磺胺类耐药基因sul1和sul2的检出率均为100%,β-内酰胺类耐药基因pbp1A、pbp2B和氯霉素类耐药基因catA3的检出率40%以上,其他类耐药基因检出率较低;毒力基因检测结果显示,nuc、coa的检出率为100%,clfa和spa的检出率较高,hlb、sea、seg、sak、set1、FnBPA、PVL、FnBPB的检出率较低。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 耐药性 毒力基因
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宁夏吴忠地区奶牛临床型乳房炎主要病原菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量：3
3
作者 宋倩 达举云 +4 位作者 李怡娜 史金莲 李宗帅 赵兴绪 张勇 《动物医学进展》 北大核心 2022年第2期70-75,共6页
为了解宁夏吴忠地区奶牛乳房炎的主要病原菌及其耐药情况,采集56份罹患乳房炎的奶牛乳样进行病原菌分离,并对分离菌进行了生化鉴定、16S rRNA基因序列分析、药敏试验以及耐药基因检测。结果表明,该地区的主要病原菌为大肠埃希氏菌和无... 为了解宁夏吴忠地区奶牛乳房炎的主要病原菌及其耐药情况,采集56份罹患乳房炎的奶牛乳样进行病原菌分离,并对分离菌进行了生化鉴定、16S rRNA基因序列分析、药敏试验以及耐药基因检测。结果表明,该地区的主要病原菌为大肠埃希氏菌和无乳链球菌,检出率分别为23.2%和14.3%。药敏试验结果表明,大肠埃希氏菌主要对头孢他啶、环丙沙星敏感,无乳链球菌主要对阿米卡星敏感。耐药基因检测结果表明大肠埃希氏菌和无乳链球菌主要对氨基糖胺类、氟喹诺酮类、四环素类药物敏感,大肠埃希氏菌对磺胺类药物耐药,对β-内酰胺类药物部分药物敏感,部分药物耐药;无乳链球菌主要对磺胺类药物和β-内酰胺类药物耐药。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 大肠埃希氏菌 无乳链球菌 分离鉴定 耐药性
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马子宫内膜炎病原分离鉴定及致病性与耐药性检测 被引量：1
4
作者 丁渲攀 崔晓 +3 位作者 张西君 达举云 史金莲 张勇 《动物医学进展》 北大核心 2022年第12期25-30,共6页
采集8匹患子宫内膜炎母马的子宫灌洗液并进行细菌的分离鉴定,分离出的病原菌有大肠埃希氏菌、马链球菌兽疫亚种、葡萄球菌、肺炎链球菌和无乳链球菌。选取上述病原菌对小鼠进行攻毒试验,攻毒后的小鼠分别于16 h(大肠埃希氏菌)、10.5 h(... 采集8匹患子宫内膜炎母马的子宫灌洗液并进行细菌的分离鉴定,分离出的病原菌有大肠埃希氏菌、马链球菌兽疫亚种、葡萄球菌、肺炎链球菌和无乳链球菌。选取上述病原菌对小鼠进行攻毒试验,攻毒后的小鼠分别于16 h(大肠埃希氏菌)、10.5 h(马链球菌兽疫亚种)、18 h(肺炎链球菌)和20 h(无乳链球菌)后死亡。剖检病死小鼠发现肝脏、肺脏、肾脏和脾脏都有不同程度的充血、淤血及肿大。采集小鼠组织石蜡包埋后切片观察,发现组织破碎并且伴有严重的充血及淤血现象。药敏试验结果显示,大肠埃希氏菌对四环素耐药,对氨苄西林、头孢哌酮、头孢噻肟等敏感;葡萄球菌对青霉素、氨苄西林耐药,对红霉素、左氧氟沙星、头孢唑林等敏感;肺炎链球菌对青霉素、红霉素、四环素、克拉霉素、头孢唑林、链霉素耐药,对左氧氟沙星敏感;马链球菌兽疫亚种对氨苄西林有一定耐药,对青霉素、红霉素、头孢类以及左氧氟沙星等敏感;无乳链球菌对青霉素、红霉素、万古霉素、氨苄西林、四环素耐药,对氧氟沙星敏感。研究结果对预防和治疗马子宫内膜炎有一定的指导意义。 展开更多
关键词 马子宫内膜炎 细菌分离鉴定 致病性 药敏试验
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FHV-1阳性猫角膜腐骨病不同手术方式治疗效果的比较 被引量：1
5
作者 毕静文 达举云 +1 位作者 史金莲 张勇 《动物医学进展》 北大核心 2022年第10期126-131,共6页
为探究猫角膜腐骨病最佳治疗方式,试验选取了患猫角膜腐骨病的病例共90例,应用PCR方法对患猫眼、鼻、口拭子样本进行猫疱疹病毒1型(FHV-1)检测。对检出的26例FHV-1阳性患猫采取了不同的手术方式进行治疗。术后1个月通过裸眼观察对比角... 为探究猫角膜腐骨病最佳治疗方式,试验选取了患猫角膜腐骨病的病例共90例,应用PCR方法对患猫眼、鼻、口拭子样本进行猫疱疹病毒1型(FHV-1)检测。对检出的26例FHV-1阳性患猫采取了不同的手术方式进行治疗。术后1个月通过裸眼观察对比角膜透明度,发现采用生物补片修补术的优于自体角膜结膜板层移植术的,采用自体角膜结膜板层移植术的优于结膜瓣遮盖术的。为了探究治疗效果更好的手术方式,进行了异种角膜移植治疗猫角膜腐骨的尝试。对1例角膜腐骨患猫进行了兔角膜板层移植,1周后拆除第三眼睑遮盖,发现眼部毛细血管网沿角膜缘向角膜爬行速度较正常时间快1倍,3周后角膜基本透明仅有少量瘢痕。结果表明生物补片修补术治疗效果好于其他方法,兔角膜板层植片方式可尝试但还需要进一步验证。 展开更多
关键词 猫 角膜腐骨 猫疱疹病毒1型 手术治疗 异种角膜板层移植术
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张掖市某牛场1例牛源格氏乳球菌的分离鉴定及毒力基因检测 被引量：4
6
作者 史金莲 达举云 +4 位作者 宋倩 李怡娜 丁渲攀 赵兴绪 张勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期837-841,849,共6页
为了确定甘肃省张掖市某养殖场致奶牛乳腺炎的病原,本实验从12份患牛乳汁中分离病原菌,并对其进行了形态学、生化鉴定、16S rRNA基因的PCR扩增及序列同源性分析。利用K-B纸片扩散法检测分离菌株的药物敏感性,采用PCR方法检测其11种毒力... 为了确定甘肃省张掖市某养殖场致奶牛乳腺炎的病原,本实验从12份患牛乳汁中分离病原菌,并对其进行了形态学、生化鉴定、16S rRNA基因的PCR扩增及序列同源性分析。利用K-B纸片扩散法检测分离菌株的药物敏感性,采用PCR方法检测其11种毒力基因。结果显示,分离出1株革兰氏阳性球菌,且其生化特性与格氏乳球菌相符,16S rRNA基因序列经比对结果显示,分离菌与GenBank登录的格氏乳球菌(MT597590.1)的同源性高达100%,表明分离菌为格氏乳球菌,并命名为LG01。将分离菌株以腹腔注射方式感染小鼠(1.5×10^(8) cfu/mL),0.2 mL/只,在7 d的观察期内观察小鼠的临床症状,并从死亡小鼠内取其脏器组织,制备组织病理切片并观察。结果显示,接种16 h后小鼠出现竖毛、眼部红肿、流涎、震颤、精神沉郁等临床症状,48 h内小鼠陆续死亡,并且从死亡小鼠病变组织中重新分离到该菌。死亡小鼠的组织病理切片观察结果显示,感染组小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均出现较明显的病理变化;对照组小鼠均未出现死亡,且其脏器组织无明显病变,表明分离出的格氏乳球菌对小鼠有致病性。药敏试验结果显示,分离菌对阿米卡星、头孢他啶、克拉霉素、多粘菌素B、复方新诺明等药物耐药,对氨苄西林、头孢西叮、四环素、诺氟沙星、环丙沙星、万古霉素、庆大霉素等药物敏感。11种毒力基因检测结果显示,该分离菌携带Adhesin PsaA、Enolase、LPxTG-3、Adhesin cluster 1、Adhesin cluster 2、Capsule gene cluster、folp、gapc 8种毒力基因,推测该分离株的致病性可能较强。本实验为临床格氏乳球菌感染的防治提供数据参考。 展开更多
关键词 牛 格氏乳球菌 分离鉴定 毒力基因
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甘肃省山丹地区马子宫内膜炎主要病原菌的分离鉴定及多重PCR检测方法的建立 被引量：1
7
作者 崔晓 丁渲攀 +3 位作者 张西君 达举云 史金莲 张勇 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期285-290,共6页
旨在对甘肃省山丹地区马子宫内膜炎主要致病菌进行分离鉴定并建立一种病原菌多重PCR(multiplex polymerase chain reaction,MPCR)检测方法。根据病原菌分离鉴定结果,选取主要致病菌金黄色葡萄球菌(Saphylococcus aureus,S.aureus)、大... 旨在对甘肃省山丹地区马子宫内膜炎主要致病菌进行分离鉴定并建立一种病原菌多重PCR(multiplex polymerase chain reaction,MPCR)检测方法。根据病原菌分离鉴定结果,选取主要致病菌金黄色葡萄球菌(Saphylococcus aureus,S.aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)和马链球菌(Streptococcus equi,S.equi)进行多重PCR检测方法的建立。提取3种标准菌株基因组并基于nuc、phoA、fneB的保守区域设计3对特异性引物,扩增预期核酸片段分别为1319,385,109 bp,进行引物特异性MPCR验证同时对扩增条件中的退火温度、引物浓度优化,建立检测3种病原菌的多重PCR,完成样品检测评估。结果表明,山丹地区马子宫内膜炎主要致病菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和马链球菌,设计的引物与无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,S.agalactiae)、肺炎链球菌(Pneumococcus)无交叉反应,建立的多重PCR检测方法退火温度在59.4℃时最佳;在引物为0.3~1.0μL优化区间内,S.aureus、E.coli和S.equi引物最佳用量分别为0.5,0.5,1.0μL,临床样品检测结果与病原菌分离鉴定结果一致。本研究成功分离鉴定了甘肃省山丹地区马子宫内膜炎的主要病原菌并建立多重PCR检测方法,为马子宫内膜炎的快速诊断和防控提供了技术支持。 展开更多
关键词 马子宫内膜炎 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 马链球菌 多重PCR
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