“一带一路”背景下民族传统医药学的价值潜能 被引量：7

1

作者 王忆霄 牛丽丽 +1 位作者 边艳超 苏丽娟 《中国民族民间医药》 2018年第8期1-5,共5页

民族医药是中华传统医药学重要的组成部分和最多彩的成员,也是"一带一路"建设重要的文化媒介和载体。文章在阐述民族医药自身特点价值的基础上,从"一带一路"建设的国内国际背景着手,系统地分析民族传统医药学的国... 民族医药是中华传统医药学重要的组成部分和最多彩的成员,也是"一带一路"建设重要的文化媒介和载体。文章在阐述民族医药自身特点价值的基础上,从"一带一路"建设的国内国际背景着手,系统地分析民族传统医药学的国际合作交流价值及"走出去"的意义,提出保护、发展、创新民族传统医药学的具体策略和路径。 展开更多

关键词 一带一路 民族传统医药 价值

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小鼠初级精母细胞GC-2中TUBB4B的表达及其对NF-κB和MAPK信号通路的调控

2

作者 刘桐佳 王万伦 +4 位作者 张婷 刘爽 边艳超 张传领 肖瑞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1002-1009,共8页

目的探究微管蛋白(TUBB4B)与胞浆羧肽酶(CCP1)在小鼠初级精母细胞(GC-2)中的互相作用关系,以及TUBB4B在调控GC-2发育中的作用。方法使用慢病毒感染GC-2细胞分别构建TUBB4B基因敲减组(TUBB4B-KD组)和阴性对照组(NCKD组);TUBB4B基因过表达... 目的探究微管蛋白(TUBB4B)与胞浆羧肽酶(CCP1)在小鼠初级精母细胞(GC-2)中的互相作用关系,以及TUBB4B在调控GC-2发育中的作用。方法使用慢病毒感染GC-2细胞分别构建TUBB4B基因敲减组(TUBB4B-KD组)和阴性对照组(NCKD组);TUBB4B基因过表达组(TUBB4B-OE组)与阴性对照组(NC-OE组),利用嘌呤霉素筛选稳定细胞株。采用RT-qPCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功,并进一步探究在GC-2细胞中TUBB4B与CCP1二者之间相互调控的表达关系。CCK8及流式细胞术检测TUBB4B沉默和过表达后对GC-2细胞增殖及周期的影响;Western blot及细胞免疫荧光实验找出TUBB4B沉默和过表达后发生表达改变的信号通路因子,并在细胞水平上进行标记验证。结果GC-2中与NC-KD(NC-OE)组相比,TUBB4B沉默和过表达后,CCP1在mRNA和蛋白水平上的表达均发生一致的性改变(P<0.05);同样CCP1敲减和恢复表达后与NC组相比,TUBB4B的表达也随之发生一致的性改变(P<0.05)。CCK8和流式细胞术实验发现TUBB4B敲减和过表达对GC-2的增殖速率和细胞的周期无明显改变。Western blot和细胞免疫荧光实验显示TUBB4B敲减和过表达后,细胞中核因子κB(NF-κB)信号通路关键蛋白:p65,p-p65与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路关键蛋白:ErK1/2,p-ErK1/2会发生相应的明显改变(P<0.05);而CCP1敲减后会明显影响PolyE表达(P<0.05)。结论在GC-2细胞中TUBB4B与CCP1表达相互调控为正向作用,且CCP1对TUBB4B具有去谷氨酰化修饰作用,TUBB4B参与初级精母细胞中NF-κB和MAPK信号通路的调控。 展开更多

关键词 雄性不育 胞浆羧肽酶 微管蛋白 初级精母细胞 NF-ΚB通路 MAPK通路

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“新医科”教育理念下研究生交叉学科教育创新培养模式探索——以内蒙古自治区分子病理学重点实验室为例

3

作者 边艳超 张传领 +1 位作者 任建军 肖瑞 《内蒙古医科大学学报》 2023年第S02期92-94,共3页

党的十九大报告提出实施健康中国建设的国家战略,将维护人民医疗卫生健康事业提升到国家战略高度,这也是当前我国医疗卫生健康改革发展的历史趋势和现实需求,也是我国医学院校改革发展的原动力[1]。党的十八大以来,习近平同志围绕培养... 党的十九大报告提出实施健康中国建设的国家战略,将维护人民医疗卫生健康事业提升到国家战略高度,这也是当前我国医疗卫生健康改革发展的历史趋势和现实需求,也是我国医学院校改革发展的原动力[1]。党的十八大以来,习近平同志围绕培养什么人、怎么培养人、为谁培养人这个根本问题[2],先后发表了一系列重要讲话和重要指示批示. 展开更多

关键词 新医科 医学研究生 创新培养模式 重点实验室

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usp9y与Nna1基因的相互作用及对精子发生的影响 被引量：3

4

作者 李文秀 高迎春 +4 位作者 李蕊秀 刘静 吴家栋 边艳超 肖瑞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期1222-1226,共5页

目的探究usp9y与引起该小鼠不育表型的突变基因Nna1之间的关系,以及该基因在精子发生中的影响。方法用分子克隆法构建pEGFP-usp9y-(nt1558-1955)真核表达载体,转染到HEK293T细胞中,检测其表达;将pEGFP-usp9y-(nt1558-1955)和pCMV-Myc-N... 目的探究usp9y与引起该小鼠不育表型的突变基因Nna1之间的关系,以及该基因在精子发生中的影响。方法用分子克隆法构建pEGFP-usp9y-(nt1558-1955)真核表达载体,转染到HEK293T细胞中,检测其表达;将pEGFP-usp9y-(nt1558-1955)和pCMV-Myc-Nna1共转染至HEK293T细胞中,通过免疫共沉淀法分析usp9y和Nna1蛋白之间的相互作用;运用单基因表达谱法研究浦肯野细胞变性(pcd)小鼠中usp9y基因、与精子发生相关基因和信号通路关键因子的表达。结果 usp9y与Nna1可形成免疫沉淀复合物;pcd3J突变型小鼠睾丸组织中Nna1表达下调,usp9y表达量明显增高。结论二者之间存在一定的相互作用,可能共同参与小鼠的精子发生,但作用方式不明确;NF-κB细胞信号通路等可能参与了pcd小鼠的精子发生。 展开更多

关键词 usp9y基因 Nna1基因 浦肯野细胞变性小鼠 雄性不育

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浅谈医学院校实验室队伍建设中存在的问题及对策 被引量：3

5

作者 王秀娟 文雅 +5 位作者 肖瑞 牛丽丽 王忆霄 温建勋 边艳超 姜丽丽 《内蒙古医科大学学报》 2015年第S2期244-246,共3页

实验技术队伍是高等学校教师队伍的重要组成部分。建设一支具有较高科研素质、较强动手能力,既熟悉实验设备性能,又能熟练操作实验设备,并能较好指导学生实验的实验队伍是搞好实验室建设和充分发挥仪器设备效益的重要保证。在对内蒙古... 实验技术队伍是高等学校教师队伍的重要组成部分。建设一支具有较高科研素质、较强动手能力,既熟悉实验设备性能,又能熟练操作实验设备,并能较好指导学生实验的实验队伍是搞好实验室建设和充分发挥仪器设备效益的重要保证。在对内蒙古自治区3所医学院校实验技术队伍建设情况调查的基础上,分析了该自治区医学院校实验技术队伍建设面临的主要问题,提出了加强实验技术队伍建设的对策。 展开更多

关键词 实验技术 队伍建设 对策

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家畜早期妊娠诊断技术研究进展 被引量：2

6

作者 边艳超 刘颖 +2 位作者 王未 陈思潭 李云章 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第8期100-102,共3页

近20年来,家畜早期妊娠诊断技术向着诊断时间早、速度快、方法简单、经济的方向发展;对妊娠或未孕母畜的饲养管理、临床检查具有重大意义;能有效地提高母畜的繁殖效率和减少经济损失。本文对近年来应用于家畜早期妊娠诊断的临床诊断法... 近20年来,家畜早期妊娠诊断技术向着诊断时间早、速度快、方法简单、经济的方向发展;对妊娠或未孕母畜的饲养管理、临床检查具有重大意义;能有效地提高母畜的繁殖效率和减少经济损失。本文对近年来应用于家畜早期妊娠诊断的临床诊断法、实验室诊断法及新的诊断方法作一简单介绍。 展开更多

关键词 家畜 早期妊娠诊断 临床诊断法 实验室诊断法

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高校科研实验室生物安全管理探究 被引量：3

7

作者 边艳超 牛丽丽 《内蒙古教育（B）》 2018年第10期99-100,共2页

高校实验室是高等学校开展实验教学、研究生进行科研培养学生实践创新、探索科研奥秘的关键场所,同时也关系到学校、教职工和学生的生命财产安全,所以实验室的生物安全管理显得尤为重要。近年来,人们对高校实验室生物安全的重视程度有... 高校实验室是高等学校开展实验教学、研究生进行科研培养学生实践创新、探索科研奥秘的关键场所,同时也关系到学校、教职工和学生的生命财产安全,所以实验室的生物安全管理显得尤为重要。近年来,人们对高校实验室生物安全的重视程度有所提高,但在生物安全管理方面还存在诸多不足,本文主要探讨如何构建并完善高校科研实验室生物安全管理工作。 展开更多

关键词 科研实验室 生物安全 管理

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小鼠骨骼肌卫星细胞的分离培养及鉴定 被引量：1

8

作者 边艳超 牧仁 +5 位作者 牛丽丽 姜丽丽 温建勋 王忆霄 李蕊秀 肖瑞 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第13期8-11,238,239,共6页

为了探讨并完善小鼠骨骼肌卫星细胞（satellite cells,SCs）的原代分离培养技术,试验通过对SCs的取材、分离、消化、培养等步骤的改进获得SCs,并应用差速贴壁法进行纯化,从形态学、生长曲线、克隆形成能力、冻存复苏活力、SCs表面标记... 为了探讨并完善小鼠骨骼肌卫星细胞（satellite cells,SCs）的原代分离培养技术,试验通过对SCs的取材、分离、消化、培养等步骤的改进获得SCs,并应用差速贴壁法进行纯化,从形态学、生长曲线、克隆形成能力、冻存复苏活力、SCs表面标记物的检测、成肌细胞分化能力及RT-PCR鉴定等方面对SCs进行研究。结果表明：分离获得的小鼠骨骼肌SCs呈梭形或纺锤形,细胞饱满且折光性强,生长曲线呈标准的＂S＂型,克隆形成率高达（56.11±1.73）%,冻存复苏后细胞活率为（96.67±0.87）%,表达desmin、c-Met、Myf5、Myo D等SCs表面特异性标记物,成肌细胞诱导分化后能形成多核肌管并表达成肌细胞表面特异性标记物Mylpf。说明小鼠骨骼肌SCs体外培养获得成功。 展开更多

关键词 骨骼肌卫星细胞 分离 培养 鉴定 克隆形成能力 成肌细胞分化及鉴定

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细胞羧肽酶1调控小鼠睾丸初级精母细胞GC-2增殖的作用与机制研究

9

作者 张婷 王万伦 +4 位作者 刘桐佳 刘爽 边艳超 张传领 肖瑞 《中国医药导报》 CAS 2022年第32期10-13,30,共5页

目的探讨细胞羧肽酶1(CCP1)在小鼠睾丸初级精母细胞(GC-2)增殖中的作用及分子机制。方法体外正常培养GC-2细胞,利用含有空载质粒与CCP1重组质粒的慢病毒感染GC-2细胞构建阴性对照组(NC组)与CCP1过表达组(GC-2+CCP1组)细胞。CCK-8法与流... 目的探讨细胞羧肽酶1(CCP1)在小鼠睾丸初级精母细胞(GC-2)增殖中的作用及分子机制。方法体外正常培养GC-2细胞,利用含有空载质粒与CCP1重组质粒的慢病毒感染GC-2细胞构建阴性对照组(NC组)与CCP1过表达组(GC-2+CCP1组)细胞。CCK-8法与流式细胞术分别检测CCP1过表达对GC-2细胞增殖与周期的影响;实时荧光定量PCR检测细胞周期蛋白依赖性激酶2(Cdk2)、细胞周期蛋白B1(Ccnb1)和细胞周期蛋白D1(Ccnd1)的表达;Western blot检测Cdk2蛋白表达。结果CCK-8与流式细胞术结果显示,GC-2+CCP1组细胞的体外分裂增殖能力低于NC组,并发生了G_(2)/M期阻滞,差异有统计学意义(P<0.05)。GC-2+CCP1组细胞的CDK2 mRNA与蛋白表达高于NC组、Ccnb1与Ccnd1 mRNA低于NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CCP1过表达可能通过影响细胞周期因子Cdk2、Ccnb1与Ccnd1的表达抑制GC-2细胞体外增殖能力发生G_(2)/M期阻滞。 展开更多

关键词 细胞羧肽酶1 小鼠睾丸初级精母细胞 细胞周期蛋白依赖性激酶2 细胞周期蛋白B1 细胞周期蛋白D1

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小鼠肌球蛋白轻链激酶生物信息学分析

10

作者 边艳超 张传领 +6 位作者 张浩 王万伦 张婷 刘桐佳 刘爽 邢凯佳 肖瑞 《中国医药科学》 2022年第19期30-33,共4页

目的利用生物信息学方法探讨小鼠肌球蛋白轻链激酶(MYLK)的结构、编码蛋白质的结构及功能等,为研究MYLK蛋白功能调节机制奠定基础。方法通过生物信息学分析,对MYLK基因编码的产物及理化性质、信号肽、跨膜结构、二级结构、三级结构、结... 目的利用生物信息学方法探讨小鼠肌球蛋白轻链激酶(MYLK)的结构、编码蛋白质的结构及功能等,为研究MYLK蛋白功能调节机制奠定基础。方法通过生物信息学分析,对MYLK基因编码的产物及理化性质、信号肽、跨膜结构、二级结构、三级结构、结构域、亚细胞定位、磷酸化及互相作用蛋白等进行预测分析。结果MYLK由1950个氨基酸组成,为理论等电点为5.92的亲水性不稳定蛋白,无信号肽和跨膜区域,二级结构主要为无规则卷曲,成功构建其三级结构,MYLK蛋白有四种结构域,主要存在于细胞核,有较多的Thr、Ser磷酸化位点,Tyr磷酸化位点相对较少,与MYLK相互作用的蛋白主要是肌球蛋白和钙调蛋白。结论MYLK是具有核定位、无跨膜结构、亲水性不稳定的蛋白质,在细胞黏附、迁移、凋亡等生理活动中具有极为重要的意义。 展开更多

关键词 肌球蛋白轻链激酶 生物信息学分析 功能结构 蛋白质相互作用

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男性不育实验动物模型建立的研究进展 被引量：1

11

作者 李怡佳 边艳超 +1 位作者 李硕 肖瑞 《中国医药导报》 CAS 2021年第15期41-44,48,共5页

男性不育症是当今重要的社会问题,且近年来发病率呈上升趋势。引起男性不育症的主要原因包括物理因素、化学因素、解剖因素、遗传因素等。这几年对男性不育的发病机理研究越来越多,通过建立经济理想的雄性不育动物模型,有助于不育机制... 男性不育症是当今重要的社会问题,且近年来发病率呈上升趋势。引起男性不育症的主要原因包括物理因素、化学因素、解剖因素、遗传因素等。这几年对男性不育的发病机理研究越来越多,通过建立经济理想的雄性不育动物模型,有助于不育机制的研究和临床治疗。 展开更多

关键词 男性不育 动物模型 发病机制 研究进展

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不同阻滞阶段非梗阻性无精子症的生物信息学分析

12

作者 王万伦 刘桐佳 +3 位作者 张婷 李硕 边艳超 肖瑞 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2022年第4期270-274,297,共6页

目的:利用生物信息学筛选不同阻滞阶段非梗阻性无精子症(NOA)相关的调控因子及其调控途径,为后续的功能研究提供依据。方法:从GEO(Gene Expression Omnibus)数据库中获得GSE45885的基因表达谱矩阵,筛选其中的正常样本以及不同阻滞阶段NO... 目的:利用生物信息学筛选不同阻滞阶段非梗阻性无精子症(NOA)相关的调控因子及其调控途径,为后续的功能研究提供依据。方法:从GEO(Gene Expression Omnibus)数据库中获得GSE45885的基因表达谱矩阵,筛选其中的正常样本以及不同阻滞阶段NOA样本,包括4例正常生精样本和20例NOA患者样本,20例NOA患者中有2例患者处于减数分裂前期阻滞阶段(PRE),7例处于减数分裂期阻滞阶段(MEI),11例处于减数分裂后期阻滞阶段(POST)。将正常生精样本设置为对照组(CON),使用GEO2R在线工具鉴定正常生精样本与不同阻滞阶段NOA样本之间的差异基因,对GEO芯片中不同阻滞阶段的NOA数据整合归一化并进行矫正后取交集。对差异表达的基因以及其靶基因进行GO(Gene Ontology)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析,获取关键通路;基于在线工具(STRING)构建蛋白质相互作用(PPI)网络图。然后利用Cytoscape中的Cyto Hubba插件对枢纽基因进行筛选。结果:在PRE中筛选出463个上调基因,12个下调基因;在MEI和POST中分别发现2个和3个下调基因,无上调基因。PRE中上调基因通过一些重要途径,如精子发生、精子细胞发育、精子的运动、纤毛运动和微管形成等功能来调控生精过程。在上述的3个阻滞阶段NOA中筛选出2个共同差异基因,均为微小RNA(mi RNA),2个mi RNA有58个共同靶基因。利用在线生物信息学工具STRING成功构建PRE中上调基因的PPI网络图,并使用Cytoscape筛选出网络中前10个枢纽基因,包括DNAI1、DNAI2、PGK2、ROPN1L、ARMC4、DRC1、DNAAF3、CABYR、ZMYND10和CCDC65。结论:识别枢纽基因和共同差异基因及其通路为后续研究NOA的发生机制提供了有价值的参考,DRC1、ARMC4、MIR15A和MIR509-3可作为后续NOA发病机制研究的潜在靶点。 展开更多

关键词 无精子症 基因表达谱 非梗阻性无精子症 靶基因 功能富集分析

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细胞周期蛋白B在不同发育阶段Rd1小鼠眼球中的表达及意义 被引量：2

13

作者 牛丽丽 张传领 +4 位作者 高迎春 吴家栋 边艳超 王忆霄 肖瑞 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第5期241-244,共4页

为了研究细胞周期蛋白B(CCNB)在不同发育阶段Rd1小鼠眼球中的表达及意义,采用荧光定量PCR方法对其进行检测。结果表明:与对照组(B6小鼠)相比,CCNB1在出生后21天Rd1小鼠眼球中的表达量极显著升高(P<0.01),约为对照组的146倍。两因素... 为了研究细胞周期蛋白B(CCNB)在不同发育阶段Rd1小鼠眼球中的表达及意义,采用荧光定量PCR方法对其进行检测。结果表明:与对照组(B6小鼠)相比,CCNB1在出生后21天Rd1小鼠眼球中的表达量极显著升高(P<0.01),约为对照组的146倍。两因素方差分析结果显示,两种属间CCNB1的表达量差异极显著(F=57.64,P<0.000 1),21天时试验组CCNB1的表达量与对照组相比差异极显著(t=24.23,P<0.000 1)。CCNB2在出生后7,14,28天Rd1小鼠眼球中的表达量均比对照组低,而在出生后21天Rd1小鼠眼球中的表达量极显著增加(P<0.01),约为对照组的435倍。在不同发育阶段,试验组CCNB2的表达量与对照组相比有差异。对照组CCNB3的表达量在出生后28天下降,且与对照组相比差异极显著(P<0.01)。在不同发育阶段,试验组CCNB3的表达量与对照组相比有差异。说明细胞周期蛋白B家族在Rd1小鼠视网膜神经细胞退化过程中参与了视神经细胞凋亡进程,在视神经细胞发育中可能发挥重要作用。 展开更多

关键词 Rd1小鼠 B6小鼠 细胞周期蛋白B(CCNB) 荧光定量PCR 视网膜色素变性

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肌源性干细胞研究进展

14

作者 牛丽丽 毕力格巴图 +6 位作者 牧仁 肖瑞 王忆霄 姜丽丽 温建勋 王秀娟 边艳超 《现代农业》 2016年第11期81-84,共4页

近年来,具有巨大临床应用潜能的成体干细胞已经成为生命科学研究的热点之一。肌源性干细胞具有强大的自我更新和多项分化潜能,能分化为神经细胞、胰岛细胞、成骨细胞等不同胚层的细胞,并能参与多种组织的损伤修复过程,在脊髓损伤修复及... 近年来,具有巨大临床应用潜能的成体干细胞已经成为生命科学研究的热点之一。肌源性干细胞具有强大的自我更新和多项分化潜能,能分化为神经细胞、胰岛细胞、成骨细胞等不同胚层的细胞,并能参与多种组织的损伤修复过程,在脊髓损伤修复及治疗压力性尿失禁中发挥巨大作用,因此,在基因治疗和组织工程领域具有广泛应用前景。 展开更多

关键词 肌源性干细胞 更新 分化 损伤修复

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HLA-C基因分型试验中PCR反应体系的优化

15

作者 王秀娟 肖瑞 +5 位作者 牛丽丽 王忆霄 姜丽丽 温建勋 高迎春 边艳超 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期113-114,共2页

为了选择适合HLA-C基因分型的最佳PCR温度反应条件,试验采用PCR-SBT方法对HLA-C基因进行高分辨率分型。结果表明：在52~64℃范围内,64℃可以作为PCR最适合温度。通过反应条件的优化,摸索建立特异性强、重复性好、可用于HLA-C高分辨率基... 为了选择适合HLA-C基因分型的最佳PCR温度反应条件,试验采用PCR-SBT方法对HLA-C基因进行高分辨率分型。结果表明：在52~64℃范围内,64℃可以作为PCR最适合温度。通过反应条件的优化,摸索建立特异性强、重复性好、可用于HLA-C高分辨率基因分型的最佳反应体系,温度条件以64℃为最佳。 展开更多

关键词 HLA基因 PCR-SBT 分型试验 PCR 体系优化

原文传递

视网膜色素变性Rd1小鼠眼球中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达

16

作者 牛丽丽 张传领 +5 位作者 温建勋 王忆霄 边艳超 姜丽丽 肖瑞 王叶庭 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第12期1129-1132,共4页

目的探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在Rd1小鼠视网膜上的表达情况。方法取出生后14d、21d、28d的Rd1小鼠和C57BL/6J小鼠各5只,摘出眼球进行HE染色,观察视网膜形态学结构变化;免疫组织化学染色与实时荧光... 目的探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在Rd1小鼠视网膜上的表达情况。方法取出生后14d、21d、28d的Rd1小鼠和C57BL/6J小鼠各5只,摘出眼球进行HE染色,观察视网膜形态学结构变化;免疫组织化学染色与实时荧光定量PCR检测PCNA蛋白和基因在不同鼠龄小鼠中的表达。结果 HE染色结果显示:PCNA蛋白均在两种小鼠视网膜神经节细胞中表达; C57BL/6J小鼠视网膜结构完整;与C57BL/6J小鼠相比,Rd1小鼠视网膜发育随着鼠龄的增加,发生进行性退化。免疫组织化学染色结果显示:PCNA蛋白表达仅局限于视网膜神经节细胞,免疫阳性信号出现在第14天和第21天,而在第28天未检测到。PCR实验结果显示:与C57BL/6J小鼠相比较,鼠龄21d时Rd1小鼠PCNA基因表达水平增高,是C57BL/6J小鼠的2. 23倍;鼠龄14 d和28 d时Rd1小鼠PCNA基因表达均低于C57BL/6J小鼠(均为P <0. 05)。结论 PCNA基因参与了Rd1小鼠视网膜发育退化过程。 展开更多

关键词 视网膜色素变性 增殖细胞核抗原 Rd1小鼠:C57BL/6J小鼠

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鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞分离培养及生物学特性 被引量：9

17

作者 边艳超 牧仁 +2 位作者 李向臣 李云章 关伟军 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期90-96,共7页

为研究鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞生物学特性,取30～50日龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌,分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞。结果显示,试验成功地分离了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞,原代培养并传代至16代,免疫细胞化学染色检测卫星细胞... 为研究鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞生物学特性,取30～50日龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌,分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞。结果显示,试验成功地分离了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞,原代培养并传代至16代,免疫细胞化学染色检测卫星细胞表面特异性标志Desmin、MyoD呈阳性表达,RT-PCR检测Desmin、c-Met、Myf5、pax7呈阳性表达;绘制生长曲线,结果说明细胞具有较强增殖能力;应用流式细胞仪对细胞进行周期分析,结果显示S期细胞所占比例为8.94%;骨骼肌卫星细胞向成肌细胞诱导10d后,免疫细胞化学染色检测成肌特异性标志骨骼肌肌球蛋白呈阳性表达;骨骼肌卫星细胞向脂肪细胞诱导7d后,油红O染色呈阳性,RT-PCR检测脂肪细胞特异性标志pparγ、LPL呈阳性表达。结果表明试验成功建立了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞的体外扩增培养体系,且该骨骼肌卫星细胞有发育形成肌管和脂肪细胞的多项分化潜能。 展开更多

关键词 鲁西黄牛胚胎 骨骼肌卫星细胞 体外扩增 培养体系 增殖能力 分化

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北京油鸡胚胎肝脏间充质干细胞的生物学特性 被引量：6

18

作者 牧仁 边艳超 +3 位作者 浦亚斌 李向臣 王凤龙 关伟军 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期99-105,共7页

从7日龄北京油鸡胚胎肝脏中分离间充质干细胞,原代培养并传代至15代,免疫荧光法检测造血祖细胞/肝卵圆细胞的表面标志物CD34、CK19呈阴性表达;RT-PCR检测CD29、CD44、CD71、CD73呈阳性表达。尝试不同培养条件对细胞生长曲线的影响,选取... 从7日龄北京油鸡胚胎肝脏中分离间充质干细胞,原代培养并传代至15代,免疫荧光法检测造血祖细胞/肝卵圆细胞的表面标志物CD34、CK19呈阴性表达;RT-PCR检测CD29、CD44、CD71、CD73呈阳性表达。尝试不同培养条件对细胞生长曲线的影响,选取最佳培养方案,同时对细胞进行细胞周期测定。肝脏间充质干细胞通过不同诱导液被成功诱导分化成脂肪细胞、心肌细胞,结果表明,从鸡胎肝中分离获得的间充质干细胞具有和人类间充质干细胞相似的生物学特性及分化潜能,其所具有多向分化的潜能,为今后临床广泛应用提供了可能。 展开更多

关键词 北京油鸡 间充质干细胞 生长曲线 诱导分化

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牛胚胎骨骼肌卫星细胞的分离、培养及诱导分化 被引量：3

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作者 边艳超 何晓红 +4 位作者 牧仁 李向臣 马月辉 李云章 关伟军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1196-1199,1204,共5页

目的分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞，并研究其生物学特性。方法取30～50d龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌，联合I型胶原酶和胰蛋白酶及差速贴壁法分离获得骨骼肌卫星细胞，通过免疫细胞化学染色和RT-PCR检测卫星细胞表面标志desmin、Myo... 目的分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞，并研究其生物学特性。方法取30～50d龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌，联合I型胶原酶和胰蛋白酶及差速贴壁法分离获得骨骼肌卫星细胞，通过免疫细胞化学染色和RT-PCR检测卫星细胞表面标志desmin、MyoD、c．Met、My￡5、pax7，并研究其生物学特性。结果鲁西黄牛卫星细胞传代培养至15代以上，冻存后细胞活率为97．90％±0．96％；免疫细胞化学染色检测卫星细胞标记物desmin，MyoD呈阳性表达；RT—PCR检测desmin、c—Met、My￡5、pax7呈阳性表达；克隆形成率为56．39％±1．41％；染色体核型分析显示分离培养的细胞均来源于正常牛胚胎个体；通过不同的诱导剂将牛卫星细胞成功地诱导为成骨细胞和神经元样细胞，分别进行茜素红，甲苯胺蓝染色呈阳性表达，RT-PCR检测成骨细胞标记物osteopontin，I型胶原蛋白和神经细胞标记物MAP2和nestin均呈阳性表达。结论本试验成功地分离获得了牛卫星细胞，并具有自我更新增殖和多向分化潜能。 展开更多

关键词 鲁西黄牛胚胎 骨骼肌卫星细胞 增殖能力 诱导分化

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北京油鸡胚胎肝脏来源间充质干细胞的分离培养及生物学特性 被引量：2

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作者 牧仁 边艳超 +3 位作者 浦亚斌 李向臣 王凤龙 关伟军 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期365-372,共8页

鸡胎肝间充质干细胞是一种多能干细胞,可以在体外分化成多种终末分化细胞;目前大多数肝脏间充质干细胞研究都集中在大鼠和小鼠,其他动物研究相对较少。文章从7日龄北京油鸡胚胎肝脏中分离间充质干细胞,原代培养并传代至15代。免疫荧光... 鸡胎肝间充质干细胞是一种多能干细胞,可以在体外分化成多种终末分化细胞;目前大多数肝脏间充质干细胞研究都集中在大鼠和小鼠,其他动物研究相对较少。文章从7日龄北京油鸡胚胎肝脏中分离间充质干细胞,原代培养并传代至15代。免疫荧光法检测间充质干细胞表面标志物CD29、CD44呈阳性表达,同时检测造血祖细胞/肝卵圆细胞的表面标志物CD34、CK19呈阴性表达。RT-PCR检测CD29、CD44、CD71、CD73呈阳性表达。细胞生长曲线呈"S"型。肝脏间充质干细胞通过不同诱导液被成功诱导分化成神经细胞、成骨细胞。结果表明,从鸡胎肝中分离获得的间充质干细胞具有和小鼠的间充质干细胞相似的生物学特性及分化潜能,其具有多向分化的潜能为今后临床广泛应用提供了可能行。 展开更多

关键词 北京油鸡 间充质干细胞 增殖能力 诱导分化

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