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猪繁殖与呼吸综合征病毒国内分离经典株与变异株的全基因组序列分析 被引量:3
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作者 王文成 +1 位作者 舒秀伟 陆承平 《畜牧与兽医》 北大核心 2008年第7期34-38,共5页
通过分段设计引物,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LX、JX株基因组进行RT-PCR扩增,对各片段cDNA进行克隆和序列测定,拼接后获得全基因组序列。结果,PRRSV LX株全基因组序列长度为15 412 bp(不包括PolyA尾),PRRSV JX株全基因组序列长度... 通过分段设计引物,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LX、JX株基因组进行RT-PCR扩增,对各片段cDNA进行克隆和序列测定,拼接后获得全基因组序列。结果,PRRSV LX株全基因组序列长度为15 412 bp(不包括PolyA尾),PRRSV JX株全基因组序列长度为15 320 bp(不包括PolyA尾)。序列分析表明,JX株全基因组核苷酸序列与LX株、JXA1、VR2332、CH-1a、BJ-4、LV同源性分别为91.1%、98.6%、91.0%、94.6%、90.9%、61.7%;LX株全基因组核苷酸序列与JX株、JXA1、VR2332、CH-1a、BJ-4、LV同源性分别为91.1%、89.7%、99.7%、91.5%、99.7%、62.2%。对不同分离株的5′-UTR、Nsp2进行了序列比较,并根据5′-UTR、Nsp2、ORF5的基因序列和氨基酸序列,对国内外分离株进行了系统进化分析。根据5′-UTR核苷酸序列,可将PRRSV美洲型毒株分为4个亚群,LX株和JX株分别属于经典美洲型和"高热病"变异型。根据Nsp2氨基酸序列分析了不同分离株的分子进化关系,表明依据Nsp2序列美洲型分离株可初步划分为5个亚群,JX株独立于其他毒株,独自处于一个分支。依据ORF5序列也可将美洲型分离株划分为5个亚群。本研究为探讨PRRSV的分子进化奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 基因组 序列分析
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一株新型鸭肝炎病毒的分离与鉴定 被引量:2
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作者 陈生雷 李凤艳 +4 位作者 郭华 项伟 舒秀伟 苗玉和 《中国兽药杂志》 北大核心 2016年第1期19-23,共5页
从辽宁省某鸭场疑似鸭病毒性肝炎病料中分离到一株病毒,经PCR检测初步鉴定其为鸭肝炎病毒,命名为YK株,应用易感鸭胚和雏鸭进行传代及病毒含量测定,E_1~E_5代鸭胚适应毒病毒含量在10^(6.5)~10^(6.9)ELD_(50)/0.2 m L之间,E2代鸭肝组织毒... 从辽宁省某鸭场疑似鸭病毒性肝炎病料中分离到一株病毒,经PCR检测初步鉴定其为鸭肝炎病毒,命名为YK株,应用易感鸭胚和雏鸭进行传代及病毒含量测定,E_1~E_5代鸭胚适应毒病毒含量在10^(6.5)~10^(6.9)ELD_(50)/0.2 m L之间,E2代鸭肝组织毒病毒含量为10^(6.3)LD_(50)/0.1 m L。动物试验结果表明,YK株鸭胚适应毒E_2代对7日龄雏鸭的致死率高达100%。序列测定分析表明,YK株与DHV-A的VP1基因同源性在71.4%~72.3%之间,与DHV-B的VP1基因同源性在71.9%~72.3%之间,与DHV-C的VP1基因同源性在94.3%~98.8%之间。试验表明,YK株与韩国新型鸭肝炎病毒在同一分支上,属于基因C型DHV。 展开更多
关键词 鸭肝炎病毒 分离 鉴定
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铝胶佐剂对狂犬病灭活疫苗(Flury株)效力的影响 被引量:2
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作者 舒秀伟 苗玉和 《现代畜牧兽医》 2012年第8期66-67,共2页
氢氧化铝胶是一种广泛应用于疫苗的佐剂,具有抗原吸附力强的特点,注入机体后可持续释放出抗原物质,刺激机体产生抗体,从而提高免疫效果,其主要用于细菌类灭活疫苗,在病毒类疫苗中也有应用,如狂犬病灭活疫苗等^[1]。为了解不同浓... 氢氧化铝胶是一种广泛应用于疫苗的佐剂,具有抗原吸附力强的特点,注入机体后可持续释放出抗原物质,刺激机体产生抗体,从而提高免疫效果,其主要用于细菌类灭活疫苗,在病毒类疫苗中也有应用,如狂犬病灭活疫苗等^[1]。为了解不同浓度铝胶佐剂对狂犬病灭活疫苗(Flury株)效力的影响,进行了如下试验。 展开更多
关键词 氢氧化铝胶 灭活疫苗 狂犬病 佐剂 效力 持续释放 免疫效果 吸附力
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兽用狂犬病灭活疫苗(Flury株)免疫效力试验 被引量:2
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作者 舒秀伟 王革新 +4 位作者 项伟 张华春 苗玉和 李尚波 《现代畜牧兽医》 2013年第2期60-64,共5页
为了检测兽用狂犬病灭活疫苗(Flury株)对本动物的免疫效力,采用中试生产的3批疫苗和OIE参考疫苗以2.0IU剂量对3月龄健康比格犬进行免疫,分别检测在第一次免疫后14d和第二次免疫后7d血清中狂犬病病毒抗体效价。结果表明,无论是一次免疫,... 为了检测兽用狂犬病灭活疫苗(Flury株)对本动物的免疫效力,采用中试生产的3批疫苗和OIE参考疫苗以2.0IU剂量对3月龄健康比格犬进行免疫,分别检测在第一次免疫后14d和第二次免疫后7d血清中狂犬病病毒抗体效价。结果表明,无论是一次免疫,还是二次加强免疫,与采用同样剂量的OIE狂犬病参考疫苗的免疫效果差异不显著(P>0.05),中和抗体均达到有效保护水平(≥0.5IU)。 展开更多
关键词 狂犬病 灭活疫苗 效力
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猪圆环病毒2型灭活疫苗及其亚单位疫苗对PCV2d流行毒株攻毒保护试验 被引量:1
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作者 夏伟 王石 +5 位作者 宋松林 廉维 王富猛 张建磊 何玉友 《畜牧兽医科技信息》 2023年第10期40-43,共4页
为了评价商品化猪圆环病毒2型(PCV2)全病毒灭活疫苗与PCV2-Cap亚单位疫苗对PCV2d亚型流行毒株的保护情况。选用5周龄PCV2抗原和抗体均为阴性仔猪15头,随机分成3组,每组5头,其中两组分别进行PCV2全病毒灭活疫苗和PCV2-Cap亚单位疫苗免疫... 为了评价商品化猪圆环病毒2型(PCV2)全病毒灭活疫苗与PCV2-Cap亚单位疫苗对PCV2d亚型流行毒株的保护情况。选用5周龄PCV2抗原和抗体均为阴性仔猪15头,随机分成3组,每组5头,其中两组分别进行PCV2全病毒灭活疫苗和PCV2-Cap亚单位疫苗免疫,首次免疫1mL,间隔21d以相同剂量和途径重复免疫1mL。二次免疫14d采血分离血清,采用IPMA法检测抗体,PCV2全病毒灭活疫苗于免疫第2周抗体转阳,第5周抗体效价达到均不低于800倍,其中PCV2-Cap重组亚单位病毒样颗粒疫苗免疫组试验猪抗体效价为最高,可达到1:3200。以PCV2d流行毒株进行攻毒,免疫组试验猪的相对增重率显著高于对照组,病理组织学观察显示,免疫组试验猪均未见明显的病理变化,攻毒对照试验猪腹股沟淋巴结出现一定程度的病理损伤。PCV2全病毒灭活疫苗与PCV2-Cap亚单位疫苗均可获得完全保护。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(PCV2) PCV2d基因亚型毒株 免疫保护
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猪圆环病毒Ⅱ型ORF2部分基因的克隆及原核表达
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作者 王伟利 +2 位作者 肖成蕊 孟庆峰 刘和平 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期759-762,共4页
根据发表的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)ORF2基因序列,设计合成1对特异性引物,从分离到的PCV2吉林株(JL01)中扩增出PCV2 ORF2579 bp的核苷酸片段,克隆到表达载体pET-32a中,经BamHⅠ和HindⅢ酶切及序列分析获得阳性重组表达质粒pET-32a-ORF2。... 根据发表的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)ORF2基因序列,设计合成1对特异性引物,从分离到的PCV2吉林株(JL01)中扩增出PCV2 ORF2579 bp的核苷酸片段,克隆到表达载体pET-32a中,经BamHⅠ和HindⅢ酶切及序列分析获得阳性重组表达质粒pET-32a-ORF2。将其转化到表达宿主菌BL21中,经IPTG诱导,成功表达了ORF2基因编码的部分结构蛋白,分子量为40 kD。通过SDS-PAGE和Western检测表明,表达的重组蛋白能够被PCV2阳性血清所识别,具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 猪圆环病毒Ⅱ型 ORF2 克隆 原核表达
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