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神经节苷脂对体外培养一氧化碳损伤少突胶质细胞Nogo-A的影响 被引量：12
1
作者 王晓虹 王虹 +3 位作者 车菊华 王苏平 汪涛 朱艳玲 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第6期945-949,共5页
背景:Nogo-A蛋白是表达于少突胶质细胞的神经元轴突生长抑制因子,推测其可能与一氧化碳中毒后迟发性脑病关系密切。单唾液酸四己糖神经节苷脂可改善一氧化碳中毒所致的神经系统损害,其作用是否与少突胶质细胞上Nogo-A蛋白有关目前尚无... 背景:Nogo-A蛋白是表达于少突胶质细胞的神经元轴突生长抑制因子,推测其可能与一氧化碳中毒后迟发性脑病关系密切。单唾液酸四己糖神经节苷脂可改善一氧化碳中毒所致的神经系统损害,其作用是否与少突胶质细胞上Nogo-A蛋白有关目前尚无报道。目的:从少突胶质细胞Nogo-A的角度探讨神经节苷脂对神经细胞一氧化碳损伤后保护的机制。方法:体外培养大鼠视神经少突胶质细胞。实验分为3组:对照组、一氧化碳组、单唾液酸四己糖神经节苷脂组。后两组在含有体积分数1%一氧化碳的密室中培养,单唾液酸四己糖神经节苷脂组预先在培养液中加入5 mg/L单唾液酸四己糖神经节苷脂。采用RT-PCR及细胞免疫组织化学观察6,24,48 h少突胶质细胞Nogo-A mR NA及其蛋白质的表达。结果与结论:一氧化碳组6,24及48 h各间点Nogo-A mR NA积分吸光度比值、Nogo-A蛋白质表达的累计吸光度值均显著高于对照组(P<0.05);一氧化碳处理后24 h,单唾液酸四己糖神经节苷脂组Nogo-A mR NA积分吸光度比值、蛋白质表达的累计吸光度值均显著高于对照组(P<0.05),但低于一氧化碳组(P<0.05);Nogo-A mR NA水平与蛋白质表达具有线性相关性(r=0.95)。提示一氧化碳本身可使少突胶质细胞进入活跃的功能状态,提高Nogo-A的转录和翻译水平;Nogo-A蛋白质表达的增加为其mR NA水平水平提高所致;单唾液酸四己糖神经节苷脂对神经细胞急性一氧化碳损伤的保护作用与抑制少突胶质细胞Nogo-A表达有关。 展开更多
关键词 一氧化碳中毒 脑疾病 少突神经胶质细胞 干细胞 培养 神经节苷脂 少突胶质细胞 一氧化碳 NOGO-A 迟发性脑病
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血红素氧合酶系统对一氧化碳中毒后体外培养少突胶质细胞Nogo-A的影响 被引量：7
2
作者 王晓虹 王苏平 +4 位作者 车菊华 王虹 王翠 汪涛 朱艳玲 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第2期230-235,共6页
背景:鉴于Nogo-A蛋白及其受体Ng R分别表达于中枢神经系统的少突胶质细胞与神经元,而一氧化碳中毒迟发性脑病患者颅脑影像学上白质脱髓鞘突出,推测Nogo-A蛋白及NgR系统参与急性一氧化碳中毒脑损害,可能与一氧化碳中毒迟发性脑病关系密... 背景:鉴于Nogo-A蛋白及其受体Ng R分别表达于中枢神经系统的少突胶质细胞与神经元,而一氧化碳中毒迟发性脑病患者颅脑影像学上白质脱髓鞘突出,推测Nogo-A蛋白及NgR系统参与急性一氧化碳中毒脑损害,可能与一氧化碳中毒迟发性脑病关系密切。内源性一氧化碳(CO)是机体重要的气体信使分子之一,主要是由血红素氧合酶代谢产生的,其对Nogo-A体系的影响目前亦未见报道。目的:采用外源性CO处理体外培养少突胶质细胞,并用锌原卟啉9抑制血红素氧合酶系统活性,观察少突胶质细胞Nogo-A在mR NA及蛋白质水平的表达情况。方法:将体外培养的少突胶质细胞分为对照组、CO组和锌原卟啉9组。CO组和锌原卟啉9组细胞置于含体积分数1%CO的密封室内培养。锌原卟啉9组细胞在CO处理前,预先在培养液中加入10μmol/L锌原卟啉9。首先比较培养6,24和48 h时细胞中Nogo-A mR NA和蛋白的表达水平,检测表达水平最高时CO组和锌原卟啉9组细胞中Nogo-A mR NA和蛋白表达水平的差异。结果与结论:CO组细胞中Nogo-A mR NA和蛋白的表达水平均高于对照组,且都在培养24 h时表达水平最高。培养24 h时锌原卟啉9组细胞中Nogo-A m RNA和蛋白表达水平均高于CO组。提示排除在体情况中一氧化碳中毒所致的缺氧的影响,单纯外源性CO可诱导体外培养少突胶质细胞Nogo-A m RNA及蛋白表达水平增加;血红素氧合酶系统可抑制Nogo-A m RNA及蛋白的表达水平。 展开更多
关键词 一氧化碳 少突神经胶质 体外研究 组织工程 组织构建 一氧化碳中毒 少突胶质细胞 NOGO-A 血红素加氧酶1 锌原卟啉9 聚合酶链反应 免疫组织化学 气体信使
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大鼠视神经少突胶质细胞培养方法的改良 被引量：2
3
作者 王晓虹 王苏平 +3 位作者 车菊华 王虹 汪涛 朱艳玲 《转化医学杂志》 2014年第6期330-332,346,共4页
目的改良既往新生大鼠视神经组织块培养法体外培养少突胶质细胞. 方法新生2 d SD 大鼠.无菌条件下取双侧视神经.置于预先涂有多聚赖胺酸的培养皿中（直径3..5 cm）.加入基础培养液约400μL.培养第4 天时.更换为含0. 5%胎牛血清化学限定... 目的改良既往新生大鼠视神经组织块培养法体外培养少突胶质细胞. 方法新生2 d SD 大鼠.无菌条件下取双侧视神经.置于预先涂有多聚赖胺酸的培养皿中（直径3..5 cm）.加入基础培养液约400μL.培养第4 天时.更换为含0. 5%胎牛血清化学限定培养液约400 μL.约第10 天时.更换为无胎牛血清化学限定培养液约600 μL.第11 天行髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein.MBP）细胞免疫化学鉴定.计算阳性细胞百分率. 重复培养3 次.方差分析方法的稳定性. 结果视神经培养至第11 天.每皿细胞数可达（6-8）×105个.90%以上为MBP 阳性细胞.3 次培养细胞的MBP 免疫细胞化学染色阳性细胞百分率差异无统计学意义（P〉0.05）. 结论本实验方法所得成熟少突胶质细胞纯度高.数量足够-般细胞生物学实验使用.且方法简便、稳定. 展开更多
关键词 视神经 少突胶质细胞 细胞培养
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