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橘红素预处理对过氧化氢诱导成骨细胞损伤的保护作用及机制 被引量：1
1
作者 李汁涵 陈艳莉 +5 位作者 田欣 路鸿瑜 殷航 邬钰 黄宏靓 陈珺 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2022年第4期267-273,共7页
目的研究橘红素预处理对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的成骨细胞氧化损伤的保护作用和机制。方法①酶消化法分离培养大鼠颅骨来源的原代成骨细胞,分别培养7和21 d后,采用碱性磷酸酶(AKP)染色和茜素红染色鉴定细胞。②橘红素5~40μmol·... 目的研究橘红素预处理对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的成骨细胞氧化损伤的保护作用和机制。方法①酶消化法分离培养大鼠颅骨来源的原代成骨细胞,分别培养7和21 d后,采用碱性磷酸酶(AKP)染色和茜素红染色鉴定细胞。②橘红素5~40μmol·L^(-1)孵育成骨细胞48 h后,加H_(2)O_(2)300μmol·L^(-1)1 h,采用CCK-8法测定细胞存活率,AKP试剂盒测定AKP活性。③培养的成骨细胞分为细胞对照组、模型组(H_(2)O_(2)300μmol·L^(-1),孵育1 h)、模型+橘红素组(橘红素10μmol·L^(-1)预处理48 h后加H_(2)O_(2)300μmol·L^(-1),1 h)。茜素红染色检测钙化结节数量,流式细胞术检测成骨细胞内活性氧(ROS)水平,超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒检测SOD活性,Western印迹法检测成骨细胞转录因子(OSX)和骨保护素(OPG)蛋白表达水平。结果①AKP染色成骨细胞细胞胞质呈蓝色,茜素红染色可见钙化结节,结节呈深红色。②与模型组相比,橘红素(10~30μmol·L^(-1))预处理组成骨细胞存活率显著升高(P<0.01),橘红素(10~20μmol·L^(-1))预处理组成骨细胞AKP活性显著增加(P<0.05)。③与细胞对照组相比,模型组成骨细胞矿化结节数量显著降低(P<0.05),ROS水平明显升高(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01),OSX和OPG蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,模型+橘红素10μmol·L^(-1)预处理组矿化结节数量明显增加(P<0.05),ROS水平显著降低(P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.01),OSX和OPG的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论橘红素可通过激活SOD、减少ROS累积而降低氧化应激,对H_(2)O_(2)诱导的成骨细胞氧化损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 橘红素 氧化损伤 成骨细胞 成骨功能 过氧化氢
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