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略阳乌鸡屠宰性能及肉质性状研究 被引量：30
1
作者 陈锐 李丽霞 +3 位作者 张涛 路宏朝 霍科科 张宏杰 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期116-118,共3页
以120日龄略阳乌鸡为研究对象,对其屠宰性能和肉质性状进行测定分析。结果表明:活重、屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重、腿肌重等6项性状指标,公鸡优于母鸡、差异极显著;公鸡的屠宰率、半净膛率、腿肌率分别为89.15%、82.40%、24.0... 以120日龄略阳乌鸡为研究对象,对其屠宰性能和肉质性状进行测定分析。结果表明:活重、屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重、腿肌重等6项性状指标,公鸡优于母鸡、差异极显著;公鸡的屠宰率、半净膛率、腿肌率分别为89.15%、82.40%、24.05%,显著高于母鸡,其他性状指标在性别间差异不显著;公、母鸡腿肌肉色OD值、pH值和剪切力均高于胸肌,系水力、熟肉率低于胸肌,差异均显著,各项指标性别间差异不显著;水分、粗脂肪含量腿肌高于胸肌,粗蛋白、粗灰分含量腿肌低于胸肌,差异均显著。研究表明,公鸡、母鸡均具有较好的产肉性能、优良的肌肉品质,但屠宰性能方面公鸡优于母鸡。 展开更多
关键词 略阳乌鸡 屠宰性能 肉质性状 对比分析
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豆类丝核菌次级代谢产物对荷瘤小鼠T淋巴细胞活性的影响 被引量：18
2
作者 张黎 杨鸣琦 +1 位作者 黄增荣 路宏朝 《军医进修学院学报》 CAS 2004年第2期103-104,共2页
目的:研究豆类丝核菌次级代谢产物对荷瘤动物的免疫调节作用。方法:通过给荷瘤小鼠灌注含有苦马豆素(swainsonine,SW)且剂量分别为2.7 mg·kg-1·d-1和16.2 mg·kg-1·d-1的豆类丝核菌次级代谢产物稀释液,分别于灌药前(... 目的:研究豆类丝核菌次级代谢产物对荷瘤动物的免疫调节作用。方法:通过给荷瘤小鼠灌注含有苦马豆素(swainsonine,SW)且剂量分别为2.7 mg·kg-1·d-1和16.2 mg·kg-1·d-1的豆类丝核菌次级代谢产物稀释液,分别于灌药前(0d)及灌药后4 d、8 d、12 d、16 d测定荷瘤鼠T淋巴细胞活化指数。结果:该次级代谢产物能够使荷瘤动物T淋巴细胞活性增强,其中含SW 16.2 mg·kg-1·d-1剂量标准的次级代谢产物对荷瘤动物的免疫刺激作用明显。因此,该次级代谢产物具有抗肿瘤免疫刺激作用。 展开更多
关键词 豆类丝核菌 次级代谢产物 荷瘤小鼠 T淋巴细胞活性 免疫调节
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豆类丝核菌次级代谢产物的抑瘤作用及其对荷瘤小鼠巨噬细胞活性的影响 被引量：16
3
作者 杨鸣琦 张黎 +2 位作者 周宏超 黄增荣 路宏朝 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2003年第B10期55-58,共4页
　建立种植性肝癌(H22)实体瘤动物模型,并给荷瘤小鼠灌服含有苦马豆素(swainsonine,SW)且剂量分别为2.7和16.2mg/(kg·d)的豆类丝核菌次级代谢产物稀释液,分别于灌药前(0d)及灌药后4d和8d时测定其肿瘤抑制率和腹腔巨噬细胞吞噬百分... 　建立种植性肝癌(H22)实体瘤动物模型,并给荷瘤小鼠灌服含有苦马豆素(swainsonine,SW)且剂量分别为2.7和16.2mg/(kg·d)的豆类丝核菌次级代谢产物稀释液,分别于灌药前(0d)及灌药后4d和8d时测定其肿瘤抑制率和腹腔巨噬细胞吞噬百分率。结果表明,8d时 组(高剂量灌药组)的腹腔巨噬细胞吞噬率达到(33.99±1.56)%,显著高于 组(生理盐水对照组)的(27.95±4.03)%; (低剂量灌药组)、 2组肿瘤抑制率分别在4d时达到26.44%和33.91%,8d时达到46.98%和47.22%。说明该次级代谢产物能够使荷瘤动物巨噬细胞吞噬力增强,并能抑制种植性实体瘤(H22)的生长。表明该次级代谢产物具有抗肿瘤药用价值。 展开更多
关键词 豆类丝核菌 次级代谢产物 抑瘤作用 荷瘤小鼠 巨噬细胞 细胞活性 影响因素 饲料污染
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略阳乌鸡体尺性状指标与体质量的主成分分析 被引量：25
4
作者 陈锐 张涛 +3 位作者 路宏朝 霍科科 张宏杰 李丽霞 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第4期153-156,共4页
为研究略阳乌鸡体尺性状和体质量之间的内在关联性,在统一饲养条件下,对120只成年略阳乌鸡的体尺性状和体质量7个指标进行测定,选择累计贡献率达92.183 4%的5个主成分进行分析。结果表明:成年公鸡的体质量、体斜长、胸骨长、胫长、胸角... 为研究略阳乌鸡体尺性状和体质量之间的内在关联性,在统一饲养条件下,对120只成年略阳乌鸡的体尺性状和体质量7个指标进行测定,选择累计贡献率达92.183 4%的5个主成分进行分析。结果表明:成年公鸡的体质量、体斜长、胸骨长、胫长、胸角均显著高于母鸡(P<0.05)。体尺指标胸宽、胸深、胫长及体质量在略阳乌鸡群体中的变异系数较大,选育潜力大。体质量与体斜长、胸宽、胸骨长、胫长呈极正显著相关(P<0.01),与胸深、胸角呈显著相关(P<0.05),其他性状间存在不同程度的相关性。主成分分析结果表明,各主成分的特征根分布较广,经统计计算入选的5个主成分所占信息的侧重各不相同,分别在一定程度上反映了略阳乌鸡的体型特征及今后选育的方向和重点。 展开更多
关键词 略阳乌鸡 体尺性状 体质量 主成分分析
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阻断PI3K/AKT通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化 被引量：17
5
作者 史新娥 吴国芳 +4 位作者 宋子仪 路宏朝 贾龙 朱嘉宇 杨公社 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期154-160,共7页
【目的】在骨骼肌生长或损伤刺激下,骨骼肌卫星细胞被激活、增殖分化形成肌管,促进骨骼肌的生长发育或修复组织创伤。FoxO1负调控骨骼肌的生成,但在骨骼肌卫星细胞分化过程中的作用未见报道。因此,笔者探索FoxO1对猪骨骼肌卫星细胞分化... 【目的】在骨骼肌生长或损伤刺激下,骨骼肌卫星细胞被激活、增殖分化形成肌管,促进骨骼肌的生长发育或修复组织创伤。FoxO1负调控骨骼肌的生成,但在骨骼肌卫星细胞分化过程中的作用未见报道。因此,笔者探索FoxO1对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响,希望为深入研究FoxO1调控骨骼肌生长发育的作用机理奠定基础。【方法】以1—3日龄健康大白猪为材料,采用单根肌纤维法分离培养猪骨骼肌卫星细胞,接种第2天、第4天和第6天在倒置显微镜下观察细胞形态并拍照。在细胞分化第8天,用免疫荧光染色方法染肌管,DAPI染核,并在荧光倒置显微镜下观察拍照。待细胞汇合至70%—80%时,将培养基换成含50 nmol·L-1渥曼青霉素(wortmannin,WM)的分化培养基,分别于细胞分化第0天、第4天和第8天收集细胞,提取总RNA和总蛋白,采用real-time qPCR和Western blotting方法检测WM对FoxO1以及骨骼肌卫星细胞分化标志基因表达的影响。【结果】猪骨骼肌卫星细胞在接种第2天开始贴壁,呈梭形。第4天细胞数量增加,部分发生融合。第6天时细胞呈方向性生长。第8天细胞进一步融合形成肌管。WM处理组的FoxO1 mRNA表达水平未发生显著变化(P>0.05),非磷酸化的FoxO1蛋白表达显著高于对照组(P<0.05),而p-FoxO1蛋白表达较对照组显著下降(P<0.05)。WM处理组的细胞在分化第8天,虽然也出现了蜂窝状生长,但是与对照组相比细胞未呈方向性生长并形成肌管。Western blotting结果显示,WM明显抑制猪骨骼肌卫星细胞分化早期标志基因MyoD、中后期标志基因MyoG和末期标志基因MyHC蛋白的表达。【结论】以WM阻断PI3K信号通路能使FoxO1去磷酸化,抑制猪骨骼肌卫星细胞的分化,延迟肌管的形成,并降低成肌分化标志基因MyoD、MyoG和MyHC的表达。总之,阻断PI3K信号通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化。 展开更多
关键词 PI3K AKT通路 FOXO1 骨骼肌卫星细胞 成肌分化 猪 FOXO1
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茶多酚对酒精性肝损伤的保护作用 被引量：13
6
作者 路宏朝 张涛 高佩佩 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期134-135,共2页
目的建立家兔酒精性肝损伤病理模型,探讨茶多酚对酒精性肝损伤的治疗作用。方法家兔分为4组:对照组,茶多酚低剂量组、中剂量、高剂量组。茶多酚低、中、高组分别灌胃以浓度为10,20,40 mg/m l的茶多酚溶液进行治疗,实验期2周。测定肝组... 目的建立家兔酒精性肝损伤病理模型,探讨茶多酚对酒精性肝损伤的治疗作用。方法家兔分为4组:对照组,茶多酚低剂量组、中剂量、高剂量组。茶多酚低、中、高组分别灌胃以浓度为10,20,40 mg/m l的茶多酚溶液进行治疗,实验期2周。测定肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,并取肝组织制作石蜡切片,HE染色,普通光镜观察。结果茶多酚能够直接降低MDA含量,且中剂量(20 mg/m l)和高剂量(40 mg/m l)能够有效地清除活性氧和自由基。结论茶多酚对酒精性肝损伤有良好的治疗和保护作用。 展开更多
关键词 茶多酚 肝损伤 超氧化物歧化酶 丙二醛
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豆类丝核菌次级代谢产物抗肿瘤作用的病理学观察 被引量：8
7
作者 杨鸣琦 张黎 +2 位作者 周宏超 路宏朝 黄增荣 《西北农业学报》 CAS CSCD 2003年第4期5-7,共3页
通过建立种植性肝癌(H22)实体瘤动物模型,并给荷瘤小鼠灌胃含有苦马豆素(swainsonine,SW)且剂量分别为2.7mg·kg-1·d-1和16.2mg·kg-1·d-1的豆类丝核菌次级代谢产物稀释液,分别于灌药后8d、16d剖检荷瘤动物并取肿瘤... 通过建立种植性肝癌(H22)实体瘤动物模型,并给荷瘤小鼠灌胃含有苦马豆素(swainsonine,SW)且剂量分别为2.7mg·kg-1·d-1和16.2mg·kg-1·d-1的豆类丝核菌次级代谢产物稀释液,分别于灌药后8d、16d剖检荷瘤动物并取肿瘤组织与肝组织制做石蜡切片,HE染色,普通光镜观察。结果表明,该次级代谢产物能抑制种植性实体瘤(H22)的生长和转移。因此,该次级代谢产物具有抗肿瘤药用价值。 展开更多
关键词 豆类丝核菌 次级代谢产物 抗肿瘤作用 病理学 苦马豆素 剂量
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微卫星进化属性及其功能的研究进展 被引量：9
8
作者 张涛 路宏朝 李新生 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第1期44-47,共4页
从微卫星DNA的发现,微卫星DNA的特点及其在基因组中的分布、微卫星DNA的起源进化、微卫星DNA标记的功能及应用,微卫星DNA标记引物的开发及微卫星标记的检测技术和微卫星研究存在问题和研究方向等几个方面对微卫星DNA的研究进展进行综述。
关键词 微卫星 进化 分布 功能 检测技术
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复方中草药超微粉添加剂对草鱼生长和肌肉成分的作用 被引量：11
9
作者 尚书凤 路宏朝 +2 位作者 王琦 颜文博 王杨科 《饲料工业》 北大核心 2019年第24期41-45,共5页
探讨6味中草药超微粉添加剂鱼饲料对草鱼生长和肌肉营养成分的作用,为开发鱼类食用中草药添加饲料提供资料。甘草、板蓝根、金银花、陈皮、肉桂和杜仲按质量等比例添加配制成传统中草药添加剂和超微粉添加剂。实验设置4个实验组(T1、T2... 探讨6味中草药超微粉添加剂鱼饲料对草鱼生长和肌肉营养成分的作用,为开发鱼类食用中草药添加饲料提供资料。甘草、板蓝根、金银花、陈皮、肉桂和杜仲按质量等比例添加配制成传统中草药添加剂和超微粉添加剂。实验设置4个实验组(T1、T2、T3、T4)和1个对照组。T1、T2、T3、T4实验组分别投喂含2%传统中草药添加剂的基础饲料、1%、2%和3%超微粉中草药添加剂的基础饲料。对照组仅投喂基础饲料。每组同时设置2个平行实验,实验处理56 d。结果表明,与对照组相比,2%传统中草药添加剂饲料和1%、2%和3%超微粉中草药添加剂饲料分别使草鱼增重率提高了13.26%、16.15%、18.59%、20.51%;分别使草鱼肌肉粗蛋白含量提高了5.16%、7.81%、12.97%、14.74%。结果提示,饲料添加复方中草药对实验鱼生长和肌肉蛋白质的积累具有促进的作用,而且超微粉复方中草药添加饲料的使用效果要优于传统中草药添加饲料的效果。 展开更多
关键词 草鱼 中草药 超微粉 生长 肌肉营养成分
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不同日龄略阳乌鸡肌肉中肌苷酸含量的变化规律 被引量：11
10
作者 路宏朝 张涛 王令 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第12期277-280,共4页
以18日胚龄及6、180日龄黄羽鸡和略阳乌鸡为研究对象,探讨不同发育时期肌肉中风味物质的形成规律。采用高效液相色谱仪测定腿肌和胸肌中的肌苷酸含量,利用荧光定量PCR方法检测肌苷酸合成关键酶腺苷琥珀酸裂解酶(ADSL)基因的mRNA表达情... 以18日胚龄及6、180日龄黄羽鸡和略阳乌鸡为研究对象,探讨不同发育时期肌肉中风味物质的形成规律。采用高效液相色谱仪测定腿肌和胸肌中的肌苷酸含量,利用荧光定量PCR方法检测肌苷酸合成关键酶腺苷琥珀酸裂解酶(ADSL)基因的mRNA表达情况。结果显示:黄羽鸡和略阳乌鸡腿肌中ADSL基因的表达、肌苷酸的含量均在6日龄时最高,胸肌中肌苷酸在180日龄时含量最高,表达趋势基本一致;略阳乌鸡腿肌和胸肌的肌苷酸含量在180日龄时明显高于黄羽鸡。同时,ADSL基因的表达量在不同时期均明显高于黄羽鸡,表明成年略阳乌鸡的肉品质优于黄羽鸡。 展开更多
关键词 略阳乌鸡 肉品质 肌苷酸 腺苷琥珀酸裂解酶(ADSL)
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金龟子绿僵菌发酵代谢产物中苦马豆素的初步研究 被引量：6
11
作者 路宏朝 杨鸣琦 +2 位作者 朱晓飞 何欣 李卫彬 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期70-72,共3页
金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)经过发酵培养,采用气相色谱法对发酵代谢产物中的苦马豆素(Swainsonine SW)进行了定性和定量分析;同时用正丁醇萃取法对发酵液进行了初步的分离提取及薄层层析法检测。结果表明,金龟子绿僵菌发酵... 金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)经过发酵培养,采用气相色谱法对发酵代谢产物中的苦马豆素(Swainsonine SW)进行了定性和定量分析;同时用正丁醇萃取法对发酵液进行了初步的分离提取及薄层层析法检测。结果表明,金龟子绿僵菌发酵代谢产物中含有苦马豆素,且含量为10.2 131 mg/L;正丁醇萃取法是从发酵液中提取苦马豆素的有效方法。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌 苦马豆素 发酵 代谢产物 萃取
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基于能力培养的人体解剖生理学实验教学改革 被引量：9
12
作者 路宏朝 王杨科 +1 位作者 陈文强 张涛 《实验室科学》 2011年第3期35-37,40,共4页
以现代教育科学理论基础,对人体解剖生理实验教学从改进、优化实验教学方法和内容入手,独立设置实验课教学,开展多种实验教学形式,充分运用现代化教学手段,在加强实验课考核等方面提出了新的思路和方法,旨在提高教学质量,培养高素质的... 以现代教育科学理论基础,对人体解剖生理实验教学从改进、优化实验教学方法和内容入手,独立设置实验课教学,开展多种实验教学形式,充分运用现代化教学手段,在加强实验课考核等方面提出了新的思路和方法,旨在提高教学质量,培养高素质的创新型人才。 展开更多
关键词 人体解剖生理学 实验教学 能力培养
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宁强矮马线粒体DNA D-loop区的遗传多样性 被引量：8
13
作者 张涛 路宏朝 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1587-1594,共8页
【目的】研究宁强矮马线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)D-loop区的遗传多样性及其母系起源进化,为其遗传资源保护提供理论数据。【方法】采用PCR和测序技术分析12匹宁强矮马mtDNA D-loop区的600 bp核酸序列,并基于mtDNA D-loop区序... 【目的】研究宁强矮马线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)D-loop区的遗传多样性及其母系起源进化,为其遗传资源保护提供理论数据。【方法】采用PCR和测序技术分析12匹宁强矮马mtDNA D-loop区的600 bp核酸序列,并基于mtDNA D-loop区序列将宁强矮马和NCBI公布的其它马种进行系统树构建。【结果】宁强矮马群体存在9种单倍型,检测到34处SNP位点,占所分析位点总数的5.67%,各单倍型间的遗传距离为0.002—0.035,单倍型多样性为0.978±0.054,核苷酸多性为0.01988±0.00818。聚类分析表明宁强矮马分布在4个支系中,与胡克尔马、设特兰马、德保马、蒙古马和车巨马亲缘关系较近,与纯血马、云南马和韩国济州岛本土马的亲缘关系较远。【结论】宁强矮马具有比较丰富的遗传多样性,在进化的历史过程中受到其它马种的影响较大。 展开更多
关键词 宁强矮马 MTDNA D-LOOP 遗传多样性 母系起源
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宁强矮马微卫星遗传多样性研究 被引量：8
14
作者 张涛 路宏朝 +1 位作者 曹亮 曾祯 《湖北农业科学》 北大核心 2008年第8期868-870,共3页
采用8个微卫星标记对12匹宁强矮马的遗传多样性进行了分析,结果表明,在6个微卫星位点上存在遗传多态性,COR059有8个等位基因,ICA40有5个等位基因,AHT040有8个等位基因,UM016有9个等位基因,UM002有6个等位基因,TKY21有5个等位基因,各位... 采用8个微卫星标记对12匹宁强矮马的遗传多样性进行了分析,结果表明,在6个微卫星位点上存在遗传多态性,COR059有8个等位基因,ICA40有5个等位基因,AHT040有8个等位基因,UM016有9个等位基因,UM002有6个等位基因,TKY21有5个等位基因,各位点平均有效等位基因数4.93、平均多肽信息含量为0.743、平均杂合度0.78,数据表明宁强矮马保持了较为纯净的原始基因库,对宁强矮马这一濒危物种进行资源评价、保护和开发利用研究提供了分子水平的理论依据。 展开更多
关键词 宁强矮马 微卫星标记 遗传多样性
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茶多酚对冷却肉抗氧化保鲜作用的研究 被引量：8
15
作者 路宏朝 张涛 《中国食物与营养》 2010年第11期40-42,共3页
通过感官品质检测和TBA值的测定,研究茶多酚对冷却肉的抗氧化保鲜作用。结果表明,茶多酚能够明显抑制冷却肉中脂肪的氧化,其中浓度为0.35%的茶多酚溶液,抗氧化保鲜作用最明显。
关键词 茶多酚 冷却肉 抗氧化 保鲜
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6味中草药添加对鲫鱼诱食和生长的影响 被引量：8
16
作者 陈思航 路宏朝 +3 位作者 尚书凤 王琦 颜文博 王杨科 《陕西理工大学学报（自然科学版）》 2018年第5期67-70,74,共5页
以鲫鱼为实验对象,初步探讨6味中草药添加饲料对鲫鱼诱食及生长的影响。采用触球法和摄食生长法,将实验分为4组,Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲料;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为实验组,分别在基础饲料中添加相当于80、160、320 g/kg煎制而成的中草药复方。喂食... 以鲫鱼为实验对象,初步探讨6味中草药添加饲料对鲫鱼诱食及生长的影响。采用触球法和摄食生长法,将实验分为4组,Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲料;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为实验组,分别在基础饲料中添加相当于80、160、320 g/kg煎制而成的中草药复方。喂食30 d后,Ⅱ组无明显诱食效果,Ⅲ组诱食活性显著增加,Ⅳ组诱食活性极显著增加;同时,Ⅲ、Ⅳ组鲫鱼增重率显著高于对照组。结果表明,使用6味中草药添加饲料对鲫鱼的诱食与生长具有促进作用。 展开更多
关键词 中草药 鲫鱼 诱食活性 生长
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略阳乌鸡与良凤花鸡肌肉肌苷酸含量比较 被引量：7
17
作者 陈锐 霍科科 +1 位作者 张涛 路宏朝 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第8期195-197,共3页
为比较不同鸡种的鸡肉鲜味,采用高效液相色谱技术测定了90日龄略阳乌鸡和良凤花鸡肌肉肌苷酸含量。结果表明:2个鸡种间略阳乌鸡肌肉肌苷酸含量显著高于良凤花鸡(P<0.05);不同性别间同一鸡种公鸡肌肉肌苷酸含量低于母鸡,且略阳乌鸡公... 为比较不同鸡种的鸡肉鲜味,采用高效液相色谱技术测定了90日龄略阳乌鸡和良凤花鸡肌肉肌苷酸含量。结果表明:2个鸡种间略阳乌鸡肌肉肌苷酸含量显著高于良凤花鸡(P<0.05);不同性别间同一鸡种公鸡肌肉肌苷酸含量低于母鸡,且略阳乌鸡公、母鸡间差异显著(P<0.05);随着鸡体质量的增大,肌肉肌苷酸含量有下降趋势,其中良凤花鸡肌肉肌苷酸含量与90日龄鸡体质量呈显著负相关(P<0.05)。通过对2个鸡种肌肉肌苷酸含量分析发现,略阳乌鸡鸡肉鲜味明显优于良凤花鸡。 展开更多
关键词 略阳乌鸡 良凤花鸡 肌苷酸
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快速构建CRISPR/Cas9基因组靶向编辑系统 被引量：7
18
作者 王令 张涛 +1 位作者 路宏朝 尹亚军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1117-1124,共8页
CRISPR/Cas9核酸酶作为一种新的基因组靶向编辑技术,已成功应用于多种动植物基因组修饰研究.CRISPR/Cas9作用后的阳性细胞筛选和富集是该技术的关键之一.本研究以鸡EAVHP(endogenous avian retrovirus-HP)基因和MSTN(myostatin)基因为例... CRISPR/Cas9核酸酶作为一种新的基因组靶向编辑技术,已成功应用于多种动植物基因组修饰研究.CRISPR/Cas9作用后的阳性细胞筛选和富集是该技术的关键之一.本研究以鸡EAVHP(endogenous avian retrovirus-HP)基因和MSTN(myostatin)基因为例,从靶位点的选择、表达载体构建、双基因报告载体构建和核酸酶活性验证4个方面,系统研究了CRISPR/Cas9核酸酶技术平台.结果表明,利用寡聚核苷酸直接退火方法,构建表达载体和报告载体的阳性率分别高达100%和89.5%.报告载体的PuroR(puromycin resistant gene)和e GFP(enhanced green fluorescent protein)基因的成功表达表明,构建的CRISPR/Cas9系统能有效切割靶序列,并用于后续阳性克隆的筛选和富集.本方法摒弃了传统分子克隆的PCR扩增和酶切处理目标基因的方法,而是利用寡聚核苷酸直接退火获得含有黏性末端的目标DNA,简化了载体构建过程,低成本且快速获得CRISPR/Cas9基因组靶向编辑系统. 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9核酸酶 基因组靶向编辑 报告载体 活性验证
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贵州马4个微卫星位点遗传多态性研究 被引量：7
19
作者 张涛 路宏朝 李新生 《家畜生态学报》 2009年第6期19-21,共3页
用4个微卫星标记对20匹贵州马进行遗传多样性分析。结果表明在4个微卫星位点上存在遗传多态性,各位点平均有效等位基因数5.20、平均多态信息含量为0.745,平均杂合度0.825。表明贵州马保持了较为纯净的原始基因库。
关键词 贵州马 微卫星标记 遗传多样性
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维生素D受体基因敲除小鼠品系的建立与鉴定 被引量：7
20
作者 赵家荣 刘欢 +3 位作者 张涛 王令 路宏朝 杜伟立 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期766-772,共7页
目的探讨维生素D受体(VDR)基因敲除小鼠的最优繁育方式与鉴定方法,为进一步研究VDR功能及相关疾病提供动物模型。方法针对课题组前期构建的VDR敲除小鼠,采用4种不同的交配方式产生子代小鼠,统计子代的表型和基因型,比较VDR基因敲除纯合... 目的探讨维生素D受体(VDR)基因敲除小鼠的最优繁育方式与鉴定方法,为进一步研究VDR功能及相关疾病提供动物模型。方法针对课题组前期构建的VDR敲除小鼠,采用4种不同的交配方式产生子代小鼠,统计子代的表型和基因型,比较VDR基因敲除纯合子(VDR^(-/-))和杂合子(VDR^(+/-))小鼠的繁殖能力,同时在mRNA和蛋白水平分析VDR表达情况。结果 VDR^(-/-)小鼠与VDR^(+/+)小鼠在表型上具有显著差异,主要表现在脱毛、体型小和活动能力下降等方面;4种繁育方式所产子代小鼠的基因型分布基本符合孟德尔遗传定律;VDR^(-/-)互交方式小鼠的生殖能力差,不能直接用于扩大VDR^(-/-)敲除鼠品系,而VDR^(+/-)互交方式可成功获得VDR^(-/-)小鼠,并且检测到VDR基因敲除性状能稳定遗传至子代小鼠,因此该方法是扩大品系的最佳途径。结论本实验成功鉴定出子代小鼠基因型并建立VDR基因敲除小鼠品系,为后续VDR功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 维生素D受体 基因敲除 基因型鉴定 稳定遗传
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