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碳纳米管原子力显微镜针尖及其在生物学研究中的应用 被引量:4
1
作者 国立秋 +1 位作者 董申 钟照华 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第4期36-41,共6页
碳纳米管是制作原子力显微镜针尖的理想材料 ,这是由于碳纳米管具有很小的半径、较高的纵横比、高的柔软性能、独特的化学结构和确定的电子特性。运用碳纳米管针尖成功地获得了免疫球蛋白和单个蛋白分子等的高分辨率结构图像。
关键词 原子力显微镜 化学结构 碳纳米管针尖 生物学 半径 纵横比 柔软性能
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局部肾素血管紧张素系统在心肌细胞氧反常中的作用 被引量:14
2
作者 朱甫祥 马丽英 +2 位作者 王孝铭 李晓哲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期126-128,共3页
利用成年大鼠分离的心肌细胞氧反常模型,用新一代钙荧光探针(Fluo-3)检测细胞内游离钙浓度。对比观察了血管紧张素Ⅱ及转换酶抑制剂(巯甲丙脯酸)对钙超载的影响。结果表明前者促成钙超载的形成,而后者可以防止钙超载。从而证明心肌细胞... 利用成年大鼠分离的心肌细胞氧反常模型,用新一代钙荧光探针(Fluo-3)检测细胞内游离钙浓度。对比观察了血管紧张素Ⅱ及转换酶抑制剂(巯甲丙脯酸)对钙超载的影响。结果表明前者促成钙超载的形成,而后者可以防止钙超载。从而证明心肌细胞的肾素血管紧张素系统在氧反常时细胞钙超载中具有重要作用。 展开更多
关键词 心肌缺血 血管紧张素 卡托普利
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碳纳米管原子力显微镜针尖在结构生物学研究中的应用 被引量:5
3
作者 国立秋 董小瑛 +3 位作者 清亮 张飞虎 董申 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期525-528,共4页
碳纳米管以其较小的半径、较高的纵横比和高的柔韧性成为原子力显微镜对结构生物学进行研究的理想针尖。新的制备方法获得了亚纳米级半径的碳纳米管针尖 ,运用它们得到了生物大分子及其复合物的生物结构 ,并获得了新的生物信息 。
关键词 结构生物学 碳纳米管针尖 原子力显微镜 生物大分子 生物化学
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原子力显微镜在生物学研究中的应用进展 被引量:3
4
作者 周为民 +1 位作者 梁瑛娟 董申 《生物技术通讯》 CAS 2002年第4期312-314,共3页
原子力显微镜(atomicforcemicroscope,AFM)具有原子级分辨率,能够在生理条件下对生物样品进行观察。本文综述了AFM的原理及技术要点,举例说明了它在核酸、蛋白质、微生物及细胞等领域的应用进展。相信AFM必将在生物学研究中起到越来越... 原子力显微镜(atomicforcemicroscope,AFM)具有原子级分辨率,能够在生理条件下对生物样品进行观察。本文综述了AFM的原理及技术要点,举例说明了它在核酸、蛋白质、微生物及细胞等领域的应用进展。相信AFM必将在生物学研究中起到越来越重要的作用。 展开更多
关键词 原子力显微镜 生物学研究 应用
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碳纳米管原子力显微镜针尖的研究进展 被引量:3
5
作者 国立秋 +1 位作者 董申 陈明君 《微细加工技术》 2002年第3期52-59,共8页
碳纳米管具有很小的半径、较高的纵横比、高的柔软性能、独特的化学结构和确定的电子特性 ,这一系列性质使得它很适合用作原子力显微镜针尖。针尖的制作原先是手工操作 ,目前应用较广泛的是化学汽相沉积法 (CVD)。这种针尖使原子力显微... 碳纳米管具有很小的半径、较高的纵横比、高的柔软性能、独特的化学结构和确定的电子特性 ,这一系列性质使得它很适合用作原子力显微镜针尖。针尖的制作原先是手工操作 ,目前应用较广泛的是化学汽相沉积法 (CVD)。这种针尖使原子力显微镜的分辨率得到很大的提高 。 展开更多
关键词 原子力显微镜 AFM 碳纳米管 针尖
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柯萨奇病毒B1/B3型二价VP1基因疫苗的构建及其免疫试验 被引量:4
6
作者 吴晓羽 +7 位作者 田野 沈景霞 孟繁超 刘雅君 王乐民 李晓光 钟照华 李呼伦 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期480-484,共5页
目的 构建柯萨奇病毒 (CV)B1/B3型二价VP1基因免疫质粒 ,并探讨其免疫原性。方法 通过逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术扩增CVB1的主要中和抗原VP1基因 ,将分别由CMV和SV40启动子控制的CVB1和CVB3的VP1基因反向串联插入到真核表达载体... 目的 构建柯萨奇病毒 (CV)B1/B3型二价VP1基因免疫质粒 ,并探讨其免疫原性。方法 通过逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术扩增CVB1的主要中和抗原VP1基因 ,将分别由CMV和SV40启动子控制的CVB1和CVB3的VP1基因反向串联插入到真核表达载体pCR3 Uni中。将该质粒转染鼠NIH3T3细胞 ,于转染后 2 4、48、96h进行免疫荧光及RT PCR检测。应用该重组质粒免疫BALB/c小鼠 ,于免疫前、免疫后 2、4、6周分别断尾采血 ,用ELISA方法检测CVB特异性抗体。结果 获得了含有CVB1和CVB3的VP1基因免疫质粒 ,RT PCR及免疫荧光检测结果表明该质粒在NIH3T3细胞获得瞬时表达 ,小鼠免疫后 4、6周均有特异性抗体产生。结论 本研究构建的CVB1/B3型二价VP1基因疫苗能诱导小鼠产生CVB特异性抗体 ,可以作为候选基因疫苗。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒 基因疫苗 免疫试验 病毒性心肌炎
原文传递
柯萨奇B3病毒中国分离株VP1基因序列分析 被引量:5
7
作者 钟照华 田野 +7 位作者 郭淑元 文然 安毅 孟繁超 谷鸿喜 鲁凤民 叶鸿瑁 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期8-10,共3页
目的 分析柯萨奇 B3病毒 (CVB3 )中国分离株编码主要中和抗原的 VP1基因序列。方法 用逆转录 PCR技术扩增 CVB3中国分离株的 VP1基因 ,通过 TA克隆法构建 p CR2 .1-VP1并进行核苷酸序列的测定分析。结果 测序发现 CVB3中国分离株与 C... 目的 分析柯萨奇 B3病毒 (CVB3 )中国分离株编码主要中和抗原的 VP1基因序列。方法 用逆转录 PCR技术扩增 CVB3中国分离株的 VP1基因 ,通过 TA克隆法构建 p CR2 .1-VP1并进行核苷酸序列的测定分析。结果 测序发现 CVB3中国分离株与 CVB3 Nancy株 VP1基因均编码 2 93个氨基酸 ,二者存在 5 9个核苷酸差异 ,其中 10处影响到氨基酸的编码 ,其余均为同义变异。结论  CVB3中国分离株与 Nancy株 VP1基因序列存在一定的差异 。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒B 序列测定 VP1基因
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原子力显微镜碳纳米管探针的制备及其生物学应用 被引量:2
8
作者 国立秋 +1 位作者 董申 张飞虎 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 2003年第2期352-355,共4页
原子力显微镜 (Atomic force microscope,AFM)具有原子级分辨率 ,探针是决定其分辨率的核心部件。碳纳米管以其独特的结构和理化性质 ,成为理想的 AFM探针。碳纳米管探针可用手工法和化学气相沉积法制备。在多种蛋白质、核酸、细胞的研... 原子力显微镜 (Atomic force microscope,AFM)具有原子级分辨率 ,探针是决定其分辨率的核心部件。碳纳米管以其独特的结构和理化性质 ,成为理想的 AFM探针。碳纳米管探针可用手工法和化学气相沉积法制备。在多种蛋白质、核酸、细胞的研究中 ,碳纳米管探针不仅能获得高分辨率的图像 ,还有助于判断特定的 DNA序列及确定单元型 ,必将在生物学领域起到越来越重要的作用。 展开更多
关键词 原子力显微镜 碳纳米管探针 制备 生物结构 DNA序列
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颈动脉狭窄的治疗现状 被引量:5
9
作者 田野 《心血管病学进展》 CAS 2000年第1期1-4,共4页
关键词 颈动脉狭窄 治疗 外科手术
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柯萨奇病毒B组3型VP1基因真核表达重组质粒诱导小鼠中和抗体反应
10
作者 田野 孙淑梅 +6 位作者 钟照华 黄建林 李春江 孟繁超 鲁凤民 叶鸿瑁 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 1999年第5期333-335,共3页
以构建的柯萨奇病毒B 组3 型(CVB3)VP1 基因的真核表达重组质粒pCEP4CVB3VP1 作为候选的基因疫苗,评价其诱导小鼠产生的中和抗体反应。大量制备并提纯pCEP4CVB3VP1 DNA,用其接种BALB... 以构建的柯萨奇病毒B 组3 型(CVB3)VP1 基因的真核表达重组质粒pCEP4CVB3VP1 作为候选的基因疫苗,评价其诱导小鼠产生的中和抗体反应。大量制备并提纯pCEP4CVB3VP1 DNA,用其接种BALB/C小鼠,取血清进行病毒中和试验。结果证明其可诱导小鼠机体产生特异性中和抗体,并能中和CVB3 毒力,起到基因疫苗的预防作用。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒 中和抗体 pCEP4-CVB3VP1 CVB3
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碳纳米管原子力显微镜探针对生物样品高分辨率成像的研究 被引量:1
11
作者 国立秋 梁吉 +2 位作者 董申 清亮 《中国生物医学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第3期243-246,共4页
本研究将碳纳米管安装到原子力显微镜的标准硅探针上 ,制备了碳纳米管原子力显微镜针尖 ,运用其对生物样品进行高分辨率的成像研究 ,成功地获得了DNA的精细结构和G型免疫球蛋白 (Immunoglobulin G ,IgG)的Y形结构 。
关键词 碳纳米管 原子力显微镜 针尖 生物分子
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柯萨奇病毒B组3型基因疫苗预防实验性心肌炎的研究 被引量:3
12
作者 田野 钟照华 +7 位作者 杨巍 刘明 黄建林 孟繁超 黄永鳞 鲁凤民 叶鸿瑁 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期259-261,共3页
目的 以构建的柯萨奇病毒 B组 3型 (CVB3) VP1基因的真核表达系统 p CEP4- CVB3VP1作为基因疫苗 ,评价其对 CVB3实验性心肌炎的预防作用。方法 大量制备 p CEP4- CVB3VP1,提纯后将其接种 BAL B/C小鼠 ,取血清进行 EL ISA、病毒中和试... 目的 以构建的柯萨奇病毒 B组 3型 (CVB3) VP1基因的真核表达系统 p CEP4- CVB3VP1作为基因疫苗 ,评价其对 CVB3实验性心肌炎的预防作用。方法 大量制备 p CEP4- CVB3VP1,提纯后将其接种 BAL B/C小鼠 ,取血清进行 EL ISA、病毒中和试验和病毒攻击保护实验。结果  EL ISA证明 p CEP4- CVB3VP1表达产物可刺激机体产生抗 CVB3的特异性 Ig M;病毒中和试验证明其可诱导机体产生中和抗体 ,中和 CVB3毒力 ;病毒攻击保护实验证明其可保护接种小鼠抵抗 CVB3攻击。结论  p CEP4- CVB3VP1能诱导机体产生免疫应答 ,可作为基因疫苗预防 展开更多
关键词 柯萨奇病毒 基因疫苗 实验性心肌炎 CVB3 VP1基因
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碳纳米管原子力显微镜针尖的研究(英文) 被引量:2
13
作者 国立秋 +3 位作者 徐宗伟 清亮 张飞虎 董申 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期259-262,共4页
本文研究了制作碳纳米管原子力显微镜针尖的方法和过程。在光学显微镜下 ,通过两个微工作台操纵将纯化后的多壁碳纳米管粘结在传统的原子力显微镜的Si针尖上。运用电蚀的方法优化碳管针尖的长度使其达到高分辨率的要求。我们运用制作的... 本文研究了制作碳纳米管原子力显微镜针尖的方法和过程。在光学显微镜下 ,通过两个微工作台操纵将纯化后的多壁碳纳米管粘结在传统的原子力显微镜的Si针尖上。运用电蚀的方法优化碳管针尖的长度使其达到高分辨率的要求。我们运用制作的碳纳米管针尖在敲击模式下对G型免疫球蛋白进行扫描成像 ,结果显示了其典型的Y形结构 。 展开更多
关键词 碳纳米管 原子力显微镜 针尖 电蚀法 分辨率 扫描成像 AFM
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应用RNA干扰技术体外抑制脂蛋白脂肪酶基因的表达 被引量:3
14
作者 刘明 +4 位作者 冼勋德 高松 范江霖 黄薇 刘国庆 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第1期45-47,共3页
目的 给探讨脂蛋白脂肪酶基因作为动脉粥样硬化基因治疗靶点提供实验基础。方法 利用RNA干扰技术在细胞水平抑制脂蛋白脂肪酶基因的表达 ,根据人脂蛋白脂肪酶基因设计靶序列短发夹RNA ,构建重组干扰质粒pSIREN DNR shRNA ,将干扰质粒... 目的 给探讨脂蛋白脂肪酶基因作为动脉粥样硬化基因治疗靶点提供实验基础。方法 利用RNA干扰技术在细胞水平抑制脂蛋白脂肪酶基因的表达 ,根据人脂蛋白脂肪酶基因设计靶序列短发夹RNA ,构建重组干扰质粒pSIREN DNR shRNA ,将干扰质粒与人脂蛋白脂肪酶真核表达质粒 pCDNA3 hLPL以脂质体方法共转染COS 7细胞 ,通过实时荧光定量聚合酶链反应、Westernblot和活性检测等方法判断脂蛋白脂肪酶基因抑制的效果。结果 转染干扰质粒的细胞中脂蛋白脂肪酶mRNA、蛋白表达以及酶活性均明显降低 ,抑制率可达 70 %以上。结论 所选靶序列可以有效抑制细胞中脂蛋白脂肪酶基因的表达 。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 脂蛋白脂肪酶基因的RNA干扰 RNA干扰 脂蛋白脂肪酶 短发夹RNA 基因表达 动脉粥样硬化
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颈动脉狭窄的介入性治疗 被引量:2
15
作者 田野 《国外医学(临床放射学分册)》 2000年第1期9-12,共4页
本文介绍了颈动脉经皮血管成形术和支架植入治疗颈动脉狭窄的疗效、适应证、技术方法及并发症等,并将介入性疗法和颈动脉内膜切除术的优缺点做了比较,认为介入性疗法具有广阔的应用前景。
关键词 介入性放射学 颈动脉狭窄 血管成形术
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NiTi放射性支架置入兔腹主动脉后对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
16
作者 迟永辉 毕亚艳 +3 位作者 田野 刘剑 孟繁超 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期460-461,共2页
目的 观察NiTi放射性支架对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法 在 76只家兔腹主动脉中分别置入放射与非放射性支架。用免疫组化法和TUNEL法观察放射性支架对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。结果  (1) 2周时放射与非放射性组新生内膜面... 目的 观察NiTi放射性支架对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法 在 76只家兔腹主动脉中分别置入放射与非放射性支架。用免疫组化法和TUNEL法观察放射性支架对平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。结果  (1) 2周时放射与非放射性组新生内膜面积无显著差异 (P >0 0 5 ) ,1个月和 3个月时放射支架组新生内膜面积小于非放射性组 (P <0 0 1) ;(2 )PCNA法测定平滑肌细胞增殖显示放射性组在各时间点PCNA表达低于非放射性组 (P <0 0 5 ) ;(3)TUNEL法测定放射性组平滑肌细胞凋亡与对照组相比在 2周和 1个月时有显著差异 (P<0 0 5 ) ,在 3个月时两组平滑肌细胞凋亡无显著差异 (P >0 0 5 )。结论  (1)放射性支架可减少支架置入术后支架内新生内膜面积。 (2 )放射性支架可抑制血管平滑肌细胞增殖。 (3) 展开更多
关键词 腹主动脉 放射性支架 再狭窄 增殖细胞核抗原 TUNEL法 平滑肌细胞 动物实验 细胞凋亡 细胞增殖
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含CpG基序的大肠杆菌DNA对柯萨奇病毒基因免疫的增强作用
17
作者 吴晓羽 田野 +7 位作者 刘雅君 孟繁超 艾银红 王乐民 钟照华 李呼伦 周令望 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期649-650,共2页
关键词 柯萨奇病毒B组 CPG基序 大肠杆菌 DNA 免疫增强作用
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碳纳米管原子力显微镜针尖的制作研究 被引量:1
18
作者 国立秋 董申 +3 位作者 董小瑛 清亮 张飞虎 《中国机械工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第15期1329-1330,共2页
研究在光学显微镜下 ,运用两个独立的三维工作台分别控制针尖和碳纳米管的位置 ,将碳纳米管吸附在传统的原子力显微镜针尖上。首先将碳纳米管粘附在导电的胶带上 ,然后用涂胶的针尖与其接触将碳纳米管粘附到针尖上 ,最后运用电蚀的方法... 研究在光学显微镜下 ,运用两个独立的三维工作台分别控制针尖和碳纳米管的位置 ,将碳纳米管吸附在传统的原子力显微镜针尖上。首先将碳纳米管粘附在导电的胶带上 ,然后用涂胶的针尖与其接触将碳纳米管粘附到针尖上 ,最后运用电蚀的方法优化碳纳米管针尖的长度 ,以达到高分辨率的要求。运用制作的碳纳米管针尖对硅表面的深槽进行成像 。 展开更多
关键词 碳纳米管 原子力显微镜 针尖长度 纳米尺度
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一种新的Ⅲ类抗心律失常药dofetilide 被引量:1
19
作者 富路 黄永麟 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期252-254,共3页
关键词 Ⅲ类抗心律失常药 DOFETILIDE 抗心律失常药 药理学 临床实验 药物副作用.
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DNA原子力显微镜成象条件的研究
20
作者 国立秋 +1 位作者 董申 钟照华 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期497-499,共3页
原子力显微镜 (AFM)在空气中对DNA进行观察时 ,针尖很容易对其造成损伤 ,从而影响图象质量 .为探索此问题的解决办法 ,本研究在空气、水和无水乙醇中对DNA进行成象 ,同时对针尖的结构进行了扫描电镜观察 .取 10 0 μg ml质粒pQE30水溶液... 原子力显微镜 (AFM)在空气中对DNA进行观察时 ,针尖很容易对其造成损伤 ,从而影响图象质量 .为探索此问题的解决办法 ,本研究在空气、水和无水乙醇中对DNA进行成象 ,同时对针尖的结构进行了扫描电镜观察 .取 10 0 μg ml质粒pQE30水溶液 2 0 μl滴加在新鲜剥离的云母基底上 ,吸附 1min ,用滤纸吸去基底上的多余残液 ,氮气吹干后在空气中成像 ;pQE30分别溶于去离子水和无水乙醇 ,质量浓度为 10 0 μg ml ,各取10 0 μl加入液体池中成象 .成象时均采用MultiModeAFM (NanoscopeⅢa)的敲击模式 ,并记录力曲线 .结果发现 :在液体中DNA的图象分辨率优于在空气中 ,在无水乙醇中优于在水中 ;针尖与DNA样品间的相互作用力越大 ,成象的分辨率越低 ;多次使用后针尖磨损 ,分辨率降低 .这一结果为选择DNA的理想AFM成象环境 。 展开更多
关键词 成象条件 DNA 质粒 原子力显微镜 力曲线 微观结构
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