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一株大黄鱼虹彩病毒的分离鉴定及多克隆抗体的制备
被引量：
1
1
作者
刘笑茹
郑义华
+5 位作者
赵
路
品
高娃
祁婧婷
吕利群
胡鲲
姜有声
《水产学杂志》
CAS
2024年第2期39-45,共7页
2021年7月,浙江省象山某养殖场养殖的大黄鱼(Larimichthys crocea)出现类似大黄鱼虹彩病毒引起的疾病。采用鲤上皮瘤细胞培养和病毒主要衣壳蛋白测序分析的方法,从患病的大黄鱼中分离到一株病毒。该病毒接种到鲤上皮瘤细胞(EPC)后出现...
2021年7月,浙江省象山某养殖场养殖的大黄鱼(Larimichthys crocea)出现类似大黄鱼虹彩病毒引起的疾病。采用鲤上皮瘤细胞培养和病毒主要衣壳蛋白测序分析的方法,从患病的大黄鱼中分离到一株病毒。该病毒接种到鲤上皮瘤细胞(EPC)后出现空斑、脱落的细胞病变症状。根据虹彩病毒MCP和ATPase基因保守序列设计特异性引物对病毒组织样本进行PCR扩增,得到分别为1 367 bp和740 bp的目的基因片段。将MCP基因扩增片段测序,经BLAST对比及系统发育树聚类分析,确定该分离的病毒属虹彩病毒科细胞肿大病毒属。通过蔗糖密度梯度离心纯化,用透射电镜观察该病毒粒子呈正六边形,直径为120~150 nm。用纯化病毒作为抗原免疫小鼠获得抗大黄鱼虹彩病毒的多克隆抗体,效价为1∶7 000;通过SDS-PAGE和Western blotting初步确定3个免疫蛋白。本研究为大黄鱼虹彩病毒纯化提供一种新方法,并初步分离出免疫蛋白,为该病毒相关分子生物学研究、蛋白研究以及疫苗制备等提供理论依据。
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关键词
大黄鱼
虹彩病毒
细胞肿大病毒
分离鉴定
病毒纯化
多克隆抗体
下载PDF
职称材料
鲤疱疹病毒2型不同分离株的基因组比较分析
2
作者
周怡
赵
路
品
+1 位作者
刘笑茹
姜有声
《水产养殖》
CAS
2023年第6期20-27,共8页
从流行病学和病原学方面简述了鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2),对感染CyHV-2的金鱼、鲫的状态进行了比较。通过GenBank数据库查找,显示CyHV-2完整基因序列有7株,虽然这7株的基因组具有很高的同源性,但是不同的分离株在...
从流行病学和病原学方面简述了鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2),对感染CyHV-2的金鱼、鲫的状态进行了比较。通过GenBank数据库查找,显示CyHV-2完整基因序列有7株,虽然这7株的基因组具有很高的同源性,但是不同的分离株在其基因组中包含很多突变、插入、缺失和重排。CyHV-2基因组约含150个ORF,其中部分ORF的功能在病毒感染过程中起重要作用。CyHV-2是一种具有高度传染性的病原体,主要感染金鱼、鲫及其变种,严重危害金鱼和异育银鲫养殖业发展。指出,应以CyHV-2的基因组序列为基础,加强对CyHV-2的基因功能以及宿主对CyHV-2的免疫反应等基础研究,以获得更有效地预防、控制和治疗方法,遏制其病毒的传播扩散。
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关键词
鲤疱疹病毒2型
基因组学
蛋白功能
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职称材料
题名
一株大黄鱼虹彩病毒的分离鉴定及多克隆抗体的制备
被引量：
1
1
作者
刘笑茹
郑义华
赵
路
品
高娃
祁婧婷
吕利群
胡鲲
姜有声
机构
上海海洋大学国家水生动物病原库
上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心
上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心
出处
《水产学杂志》
CAS
2024年第2期39-45,共7页
基金
国家重点研发计划(2019YFD0900101)
江苏水产重大病毒性疫病快速诊断技术研发及示范应用(BE2021369)
国家淡水水产种质资源库(FGRC:18537)。
文摘
2021年7月,浙江省象山某养殖场养殖的大黄鱼(Larimichthys crocea)出现类似大黄鱼虹彩病毒引起的疾病。采用鲤上皮瘤细胞培养和病毒主要衣壳蛋白测序分析的方法,从患病的大黄鱼中分离到一株病毒。该病毒接种到鲤上皮瘤细胞(EPC)后出现空斑、脱落的细胞病变症状。根据虹彩病毒MCP和ATPase基因保守序列设计特异性引物对病毒组织样本进行PCR扩增,得到分别为1 367 bp和740 bp的目的基因片段。将MCP基因扩增片段测序,经BLAST对比及系统发育树聚类分析,确定该分离的病毒属虹彩病毒科细胞肿大病毒属。通过蔗糖密度梯度离心纯化,用透射电镜观察该病毒粒子呈正六边形,直径为120~150 nm。用纯化病毒作为抗原免疫小鼠获得抗大黄鱼虹彩病毒的多克隆抗体,效价为1∶7 000;通过SDS-PAGE和Western blotting初步确定3个免疫蛋白。本研究为大黄鱼虹彩病毒纯化提供一种新方法,并初步分离出免疫蛋白,为该病毒相关分子生物学研究、蛋白研究以及疫苗制备等提供理论依据。
关键词
大黄鱼
虹彩病毒
细胞肿大病毒
分离鉴定
病毒纯化
多克隆抗体
Keywords
large yellow croaker
Iridoviridae
Megalocytivirus
isolation and identification
virus purification
polyclonal antibody
分类号
S965.322 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
鲤疱疹病毒2型不同分离株的基因组比较分析
2
作者
周怡
赵
路
品
刘笑茹
姜有声
机构
上海海洋大学
上海海洋大学
上海海洋大学
出处
《水产养殖》
CAS
2023年第6期20-27,共8页
基金
国家重点研发计划(2019YFD0900101)。
文摘
从流行病学和病原学方面简述了鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2),对感染CyHV-2的金鱼、鲫的状态进行了比较。通过GenBank数据库查找,显示CyHV-2完整基因序列有7株,虽然这7株的基因组具有很高的同源性,但是不同的分离株在其基因组中包含很多突变、插入、缺失和重排。CyHV-2基因组约含150个ORF,其中部分ORF的功能在病毒感染过程中起重要作用。CyHV-2是一种具有高度传染性的病原体,主要感染金鱼、鲫及其变种,严重危害金鱼和异育银鲫养殖业发展。指出,应以CyHV-2的基因组序列为基础,加强对CyHV-2的基因功能以及宿主对CyHV-2的免疫反应等基础研究,以获得更有效地预防、控制和治疗方法,遏制其病毒的传播扩散。
关键词
鲤疱疹病毒2型
基因组学
蛋白功能
Keywords
Cyprinid herpesvirus 2
Genomics
Protein function
分类号
S917 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一株大黄鱼虹彩病毒的分离鉴定及多克隆抗体的制备
刘笑茹
郑义华
赵
路
品
高娃
祁婧婷
吕利群
胡鲲
姜有声
《水产学杂志》
CAS
2024
1
下载PDF
职称材料
2
鲤疱疹病毒2型不同分离株的基因组比较分析
周怡
赵
路
品
刘笑茹
姜有声
《水产养殖》
CAS
2023
0
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职称材料
已选择
0
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