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衰老皮肤中ⅩⅦ型胶原蛋白α1对表皮干细胞的影响及微小RNA干预机制 被引量：2
1
作者 孙佳辰 孙天骏 +3 位作者 申传安 赵虹晴 刘馨竹 张熠杰 《中华烧伤与创面修复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期839-848,共10页
目的探讨ⅩⅦ型胶原蛋白α1(COL17α1)在小鼠衰老皮肤中的表达与作用及其对人表皮干细胞(ESC)干性和增殖能力的影响,并且探讨相关微小RNA(miR)干预人ESC中COL17α1表达的机制。方法采用实验研究方法。取2个月龄(青年)和24个月龄(老年)雄... 目的探讨ⅩⅦ型胶原蛋白α1(COL17α1)在小鼠衰老皮肤中的表达与作用及其对人表皮干细胞(ESC)干性和增殖能力的影响,并且探讨相关微小RNA(miR)干预人ESC中COL17α1表达的机制。方法采用实验研究方法。取2个月龄(青年)和24个月龄(老年)雄性C57BL/6J小鼠各12只,取其胸背部全层皮肤标本进行后续检测。对青年小鼠和老年小鼠全层皮肤标本,行苏木精-伊红染色后观察表皮层结构并测量表皮厚度,用透射电子显微镜观察表皮基底膜形态和半桥粒并行半桥粒计数,分别采用实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)法与蛋白质印迹法检测COL17α1的mRNA与蛋白表达,采用免疫荧光法观测COL17α1的蛋白表达与分布。取于解放军总医院第四医学中心行包皮切除手术的3名20~30岁健康男性术后弃用的新鲜包皮组织,提取ESC,取生长良好的细胞进行后续实验。按随机数字表法(分组方法下同)将ESC分为进行相应处理的空白对照组、转染试剂对照组、空载体质粒组、敲低COL17α1质粒组,培养48 h后,采用实时荧光定量RT-PCR法检测COL17α1的mRNA表达,采用蛋白质印迹法检测COL17α1和细胞角蛋白14(CK14)的蛋白表达,采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖水平。通过DIANA、miRTarBase、miRNAMap、TargetScan、microRNA数据库筛选可能作用于COL17α1 mRNA 3’’非编码区的miR。将ESC分为转染miR模拟物阴性对照物的阴性对照组和转染前述筛选出的各miR的模拟物的各miR模拟物组,转染后48 h,通过蛋白质印迹法检测COL17α1的蛋白表达。基于基因表达综合数据库(GEO)的miR测序数据集GSE114006,使用GEO2R工具统计分析前述筛选出的可造成COL17α1蛋白表达下降的miR在30名青年(18~25岁)人和30名老年(>70岁)人皮肤中的表达。取青年小鼠和老年小鼠全层皮肤标本,采用实时荧光定量RT-PCR法检测前述老年人皮肤中表达增多的miR的表达。取2批ESC,第1批分为COL17α 展开更多
关键词 衰老 皮肤 半桥粒 ⅩⅦ型胶原蛋白α1 表皮干细胞 微小RNA
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表皮和表皮干细胞衰老的研究进展
2
作者 孙佳辰 宋垚垚 +2 位作者 申传安 赵虹晴 孙天骏 《中华损伤与修复杂志（电子版）》 CAS 2022年第6期531-534,共4页
表皮位于机体的最外层,是保护机体免受外界有害物质损伤的首道屏障。表皮干细胞位于表皮基底层,是表皮结构维持的种子细胞,其分裂增殖、分化能力和凋亡水平同表皮稳态维持和损伤修复密切相关。本文介绍了表皮的结构、功能、细胞组成和... 表皮位于机体的最外层,是保护机体免受外界有害物质损伤的首道屏障。表皮干细胞位于表皮基底层,是表皮结构维持的种子细胞,其分裂增殖、分化能力和凋亡水平同表皮稳态维持和损伤修复密切相关。本文介绍了表皮的结构、功能、细胞组成和损伤修复能力随衰老发生的变化,并总结了表皮干细胞分裂增殖、分化和凋亡随衰老发生的变化。分析表明,表皮内细胞成分和细胞功能状态的变化同表皮衰老密切相关,有望成为抑制皮肤衰老的靶点。 展开更多
关键词 表皮 衰老 细胞增殖 凋亡
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