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用于开关磁阻电机驱动系统的新型单电阻电流采样技术 被引量:10
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作者 周聪 刘闯 +2 位作者 王凯 赵燕 管旻珺 《电工技术学报》 EI CSCD 北大核心 2017年第5期55-61,共7页
为进一步降低开关磁阻电动自行车设计成本,提出了单电阻电流采样的四相电流重构技术。对单电阻电流采样的四相电流重构技术的原理进行研究,建立了不同开关状态下四相电流与采样电流的关系。对换相而引起的非换相相电流波动问题进行分析... 为进一步降低开关磁阻电动自行车设计成本,提出了单电阻电流采样的四相电流重构技术。对单电阻电流采样的四相电流重构技术的原理进行研究,建立了不同开关状态下四相电流与采样电流的关系。对换相而引起的非换相相电流波动问题进行分析,定义了无法重构相电流的区域为非观测区。提出使用单脉冲注入控制解决非观测区内无法重构相电流的方法,通过在非观测区注入单个脉冲信号,依据直流母线电压值重构得到相电流,并根据给定电流参考量,计算得到脉宽调制补偿信号的占空比,从而实现在非观测区的斩波控制。建立了Matlab/Simulink数字仿真模型,并进行仿真验证,最后进行了开关磁阻电机单电阻电流采样及控制算法的实验。结果表明,所提单电阻电流采样技术具备可行性和使用价值。 展开更多
关键词 开关磁阻电机 电动自行车 单电阻电流采样 单脉宽调制
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无人驾驶汽车技术的社会影响及其应对策略 被引量:8
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作者 徐祥运 赵燕 《学术交流》 CSSCI 北大核心 2021年第3期134-148,192,共16页
无人驾驶汽车便捷高效、绿色安全,并有利于优化城市布局,但目前还存在技术缺陷和成本压力,且会影响人的驾驶体验。无人驾驶技术的应用不仅在伦理上面临“电车难题”,还会造成就业破坏、社会分化、认知冲击和技能退化,并将挑战现有社会... 无人驾驶汽车便捷高效、绿色安全,并有利于优化城市布局,但目前还存在技术缺陷和成本压力,且会影响人的驾驶体验。无人驾驶技术的应用不仅在伦理上面临“电车难题”,还会造成就业破坏、社会分化、认知冲击和技能退化,并将挑战现有社会规则。国家应及时制定切实可行的科技政策、产业政策、财税政策、伦理原则等,助力无人驾驶汽车产业健康发展;同时,针对无人驾驶汽车质量标准、道路通行权、事故责任等法律难题,加强跨界合作及国际交流,渐进性、前瞻性地完善相关立法,及时修订道路交通法,做到“无人驾驶有人负责”。未来一个时期,要努力突破无人驾驶汽车的成本和技术瓶颈,增强社会认同,依托政策和法律,借力5G技术,推动无人驾驶广泛应用,促进技术、社会与人和谐发展。 展开更多
关键词 自动驾驶 汽车产业 产业政策 电车难题 交通安全法
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蛋白酶辅助发酵结合脂肪酶酶解法制备天然奶酪风味剂 被引量:6
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作者 周美玉 傅亮 赵燕 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期13-16,共4页
以产香型复合乳酸菌为菌种,全脂奶粉为原料,采用发酵及酶解联合工艺制备天然奶酪风味剂。研究了3种蛋白酶对发酵速率和感官评分的影响,结果表明,3种蛋白酶均可加快发酵进程,优化的蛋白酶组合可进一步促进发酵。依据感官评分,添加风味蛋... 以产香型复合乳酸菌为菌种,全脂奶粉为原料,采用发酵及酶解联合工艺制备天然奶酪风味剂。研究了3种蛋白酶对发酵速率和感官评分的影响,结果表明,3种蛋白酶均可加快发酵进程,优化的蛋白酶组合可进一步促进发酵。依据感官评分,添加风味蛋白酶的发酵物风味最丰富,评分最高,而添加复合蛋白酶的发酵物滋味最饱满,且发酵产酸最快。综合二者,采用风味蛋白酶:复合蛋白酶为3:1的混合酶系辅助发酵,时间缩短了4 h,风味丰富且滋味饱满。为进一步快速增强发酵物的风味强度,采用脂肪酶进一步酶解,经正交优化,得到酶解最佳条件为无水奶油、脂肪酶MER、脂肪酶20 000 L的添加量(质量分数)分别为20%,0.15%,0.10%,酶解温度及时间分别为40℃和9 h。最终产物奶酪香气浓郁,滋味厚重,协调性好,可用于调配高档奶酪风味剂。 展开更多
关键词 乳酸菌 蛋白酶 脂肪酶 发酵 奶酪风味剂
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青铜峡市8~12岁学龄儿童氟斑牙防治效果分析 被引量:4
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作者 赵燕 周进才 李胜玲 《中国学校卫生》 CAS 北大核心 2012年第9期1108-1110,共3页
目的了解青铜峡市地方性氟中毒病区改水后儿童氟斑牙患病情况及其防治效果,为指导地方性氟中毒的防治工作提供科学依据。方法采取整群随机抽样的方法,对青铜峡市2006年已改水的改水队1(高氟重病区叶盛镇叶盛5队)、改水队2(高氟轻病区大... 目的了解青铜峡市地方性氟中毒病区改水后儿童氟斑牙患病情况及其防治效果,为指导地方性氟中毒的防治工作提供科学依据。方法采取整群随机抽样的方法,对青铜峡市2006年已改水的改水队1(高氟重病区叶盛镇叶盛5队)、改水队2(高氟轻病区大坝镇新桥5队)、未改水队(大坝镇滑石沟5队)670名8~12岁儿童进行氟斑牙患病情况调查,根据病变程度进行分型分度,计算患病率。结果 2011年改水队1和改水队2儿童氟斑牙患病率均低于未改水队,差异有统计学意义(χ2值分别为5.012,20.676,P值均<0.05)。儿童氟斑牙临床分度与水氟质量浓度间显著相关(r=0.638,P<0.05)。2个改水队改水后水氟质量浓度分别为(0.24±0.05)mg/L、(0.32±0.07)mg/L,已达到国家正常标准。结论青铜峡市地方性氟中毒病区改水降氟防治措施取得了一定成效。但儿童氟斑牙尚存在一定程度的流行,未达到完全控制。 展开更多
关键词 氟中毒 患病率 治疗结果 儿童
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初产妇孕期体重增长对分娩方式及新生儿体重的影响 被引量:4
5
作者 朴海善 赵燕 +2 位作者 罗惠琴 田玲 李胜玲 《宁夏医科大学学报》 2013年第11期1254-1256,共3页
目的探讨初产妇孕期体重增长对分娩方式及新生儿体重的影响。方法选择在宁夏三所三级甲等医院及某妇幼保健院2011年10月至2012年10月的分娩的单胎初产妇,根据孕期体重增长将初产妇分为体重增长过多组(>16kg)、体重增长适宜组(11~16kg... 目的探讨初产妇孕期体重增长对分娩方式及新生儿体重的影响。方法选择在宁夏三所三级甲等医院及某妇幼保健院2011年10月至2012年10月的分娩的单胎初产妇,根据孕期体重增长将初产妇分为体重增长过多组(>16kg)、体重增长适宜组(11~16kg)、体重增长过少组(<11kg),追踪监测孕期体重增长情况、分娩方式及新生儿出生体重。结果孕期体重增长过多组剖宫产率高于孕期体重增长适宜组和过少组(P<0.05),孕期体重增长过多组巨大儿分娩率大于孕期体重增长适宜组(P<0.05),孕期不同体重增长组新生儿出生体重比较差异有统计学意义(H=24.43,P<0.05)。结论初产妇孕期体重增长可增加新生儿出生体重,孕期体重增长过度可增加剖宫产率及巨大儿的分娩率。 展开更多
关键词 孕期体重增长 分娩方式 新生儿体重
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利用光合细菌进行微生物修复:一种降低辛硫磷在养殖水中积累的低成本方法 被引量:5
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作者 孙阳 赵燕 +1 位作者 王浩 吕利群 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期4541-4554,共14页
【背景】中国是农业生产大国,渔林农牧占比庞大。有机农药无论在畜牧业还是水产养殖业都有广泛的应用。有机磷农药(Organophosphorus Pesticide,OP)是应用最广泛的有机农药,具有低毒和不易残留的优点。OP在水体中大量积累可通过生物富... 【背景】中国是农业生产大国,渔林农牧占比庞大。有机农药无论在畜牧业还是水产养殖业都有广泛的应用。有机磷农药(Organophosphorus Pesticide,OP)是应用最广泛的有机农药,具有低毒和不易残留的优点。OP在水体中大量积累可通过生物富集作用间接影响人体健康,由此产生的生殖毒性不容忽视。光合细菌作为环境友好型水体有益菌,部分菌种具有降解有机农药的功能。【目的】自上海海洋大学明湖中分离纯化得到一株光合细菌(编号SPZ)。探究其对辛硫磷的耐受程度及降解效果,为养殖水体中有机磷农药的生物降解提供目的菌株。【方法】利用16S rRNA基因序列分析方法对目标菌株进行种属鉴定;利用紫外分光光度法测定分离菌株SPZ和标准菌株ST在不同接种量下的OD660并测定实验周期内光合细菌在不同浓度辛硫磷中OD660的变化趋势,以示辛硫磷对光合细菌的毒性作用;利用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定菌株对水体辛硫磷的降解能力;通过HPLC测定加热致死菌与活菌对水体辛硫磷的降解能力,确定菌株对辛硫磷的降解方式。【结果】16S rRNA基因序列分析表明菌株SPZ与红假单胞菌属相似度高达99%以上,与沼泽红假单胞菌ATCC 17001菌株聚为一支,置信度为100%;菌株SPZ与菌株ST的适宜接种量为10%;菌株SPZ可耐受100mg/L的辛硫磷,当浓度超过该值后,辛硫磷对光合细菌生长产生显著的抑制作用;当光合细菌进入生长稳定期后添加辛硫磷,1d时可相对降解辛硫磷(12.97%-26.69%,20.0 mg/L;24.25%-32.85%,2.0 mg/L;16.66%-34.59%,0.2 mg/L),3 d时可相对降解辛硫磷(46.63%-53.95%,20.0 mg/L;24.78%-30.34%,2.0 mg/L;31.92%-39.25%,0.2 mg/L),5 d时可相对降解辛硫磷(93.65%-97.72%,20.0 mg/L;67.69%-74.41%,2.0 mg/L;10.34%-24.27%,0.2mg/L)。【结论】菌株SPZ作为一种常见光合细菌,能够有效去除水体中的辛硫磷农药,具有生物修复功 展开更多
关键词 光合细菌 辛硫磷 毒性 微生物修复
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青铜峡市地方性氟中毒病区改水后防治效果调查 被引量:3
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作者 赵燕 赵红梅 +1 位作者 李小军 李胜玲 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期446-447,共2页
目的了解青铜峡市饮水型地方性氟中毒病区改水后儿童氟斑牙及成人氟骨症的患病情况。方法选择已改水的高氟重病区叶盛镇叶盛5队(改水区1)、高氟轻病区大坝镇新桥5队(改水区2)和未改水的高氟轻病区大坝镇滑石沟5队(未改水区)。于2011年3... 目的了解青铜峡市饮水型地方性氟中毒病区改水后儿童氟斑牙及成人氟骨症的患病情况。方法选择已改水的高氟重病区叶盛镇叶盛5队(改水区1)、高氟轻病区大坝镇新桥5队(改水区2)和未改水的高氟轻病区大坝镇滑石沟5队(未改水区)。于2011年3—4月,对全部670名儿童进行氟斑牙诊断并对所有25岁以上成人共1400名进行氟骨症诊断。结果两个改水区水氟浓度分别为(0.24±0.05)、(0.32±0.07)mg/L,均合格;未改水区水氟浓度为(1.03±0.19)mg/L。改水地区儿童氟斑牙患病率和成人氟骨症患病率均低于未改水地区,差异有统计学意义(P<0.05)。结论青铜峡市地方性氟中毒病区经改水降氟后,饮用水符合卫生要求,但氟斑牙及氟骨症尚存在一定程度的流行。 展开更多
关键词 饮水型氟中毒 氟斑牙 氟骨症 尿氟
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辛硫磷胁迫对异育银鲫细胞基因表达的影响 被引量:3
8
作者 赵燕 周宏正 +2 位作者 李婉娟 王浩 吕利群 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期4953-4963,共11页
辛硫磷(Phoxim)是一种高效、低毒、低残留的广谱有机磷农药,因其对水生动物寄生虫有较好的防控效果,在水产养殖中被大量使用;但辛硫磷对水生动物生理水平、基因水平的影响研究尚属空白。本研究围绕辛硫磷使用中的潜在安全性开展基因水... 辛硫磷(Phoxim)是一种高效、低毒、低残留的广谱有机磷农药,因其对水生动物寄生虫有较好的防控效果,在水产养殖中被大量使用;但辛硫磷对水生动物生理水平、基因水平的影响研究尚属空白。本研究围绕辛硫磷使用中的潜在安全性开展基因水平的风险评估研究。采用高通量测序平台Illumina HiSeqTM2500,对经0.5 mg/L的辛硫磷(DMSO溶解)处理的异育银鲫尾鳍细胞(GiCF)样品进行测序分析。研究结果显示:细胞活性检测试验(CCK)证明0.5 mg/L的辛硫磷对细胞活性无显著影响;与对照组(0.25%DMSO处理)表达的基因相比,辛硫磷处理组细胞中分别有550个和422个基因显著上调和下调。根据GO功能分类,差异表达基因可分为生物过程、细胞组分、分子功能等三大类别中的55个分支。KEGG信号通路显著性富集分析结果表明:差异表达基因共涉及260条生物学代谢途径,包括赖氨酸降解、谷胱甘肽代谢、PI3K/AKT等通路;其中和药物代谢相关的信号通路有药物代谢—细胞色素P450、药物代谢—其他酶类和酪氨酸激酶抑制剂耐药。为了验证转录组结果的准确性,运用荧光定量RT-PCR技术对随机挑选的9个上调或下调的宿主基因进行了辛硫磷胁迫下的表达水平分析,其变化与转录组测序结果基本一致。本研究结果表明0.5 mg/L浓度的辛硫磷对GiCF无显著毒性,但是能对其基因表达谱产生系统性影响。该结果也表明GiCF细胞可以作为农药的细胞毒性研究材料。本研究为深入揭示辛硫磷对Gi CF细胞基因水平的影响及潜在生理毒性提供了依据,相关转录组数据可以为辛硫磷在水产养殖中的分子毒理学评价提供参考。 展开更多
关键词 辛硫磷 GiCF 转录组 验证
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盐酸氯苯胍在异育银鲫体内的药代动力学研究 被引量:3
9
作者 周宏正 赵燕 +3 位作者 张祎桐 孙皓 童文涛 吕利群 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期916-923,共8页
盐酸氯苯胍是防治鲫孢子虫病的常用药。为了给鲫养殖过程中的临床科学用药提供理论依据,在水温为(25±1)℃时,分别用20、30和40 mg/kg的剂量口灌质量为(120±10) g的异育银鲫,利用高效液相色谱法测定ROBH在其肾脏、肝脏、血液... 盐酸氯苯胍是防治鲫孢子虫病的常用药。为了给鲫养殖过程中的临床科学用药提供理论依据,在水温为(25±1)℃时,分别用20、30和40 mg/kg的剂量口灌质量为(120±10) g的异育银鲫,利用高效液相色谱法测定ROBH在其肾脏、肝脏、血液、肌肉等4种组织的药时曲线。结果显示,3种剂量给药下,异育银鲫各组织中的ROBH药时曲线均呈双峰现象。不同剂量的药物在异育银鲫血液中的达峰时间、血药质量浓度峰值、药时曲线下面积分别为:20 mg/kg,T_(max)=2. 3 h,C_(max)=0. 55 mg/L,AUC=9. 35 [(mg/L)·h]; 30 mg/kg,T_(max)=2. 1 h,C_(max)=0. 73 mg/L,AUC=13. 02 [(mg/L)·h]; 40 mg/kg,T_(max)=2. 2 h,C_(max)=1. 17 mg/L,AUC=13. 98[(mg/L)·h]。给药剂量相同时,ROBH在异育银鲫各组织中的药时曲线下面积呈现肾脏、肝脏、血液、肌肉由大到小的排列顺序。清除速率显示,ROBH在肌肉中清除最慢,其次是血液。ROBH在肾脏和肝脏中具有一定蓄积作用,主要表现在药物含量高、MRT值偏大。本实验条件下,ROBH在异育银鲫体内的休药期不低于9 d。但考虑到实际养殖情况和天气原因,临床休药期可根据实际情况适当延长。本文系首次在大宗淡水鱼中报道ROBH的药代规律,为包括鲫在内的大宗淡水鱼养殖科学用药提供一定的理论指导。 展开更多
关键词 异育银鲫 盐酸氯苯胍 药代动力学 黏孢子虫
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新媒体时代涉民族因素网络舆情研究 被引量:3
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作者 徐祥运 赵燕 《黑龙江民族丛刊》 CSSCI 北大核心 2021年第4期52-57,共6页
新媒体是在多媒体和网络技术相结合的基础上发展起来的新型传播媒体,具有传播主体多样化、传播路径互动化、传播客体个性化的特征。在涉民族因素网络舆情的危机管控中充当着预警员、引导者、过滤器的角色,同时也对涉民族因素网络舆情的... 新媒体是在多媒体和网络技术相结合的基础上发展起来的新型传播媒体,具有传播主体多样化、传播路径互动化、传播客体个性化的特征。在涉民族因素网络舆情的危机管控中充当着预警员、引导者、过滤器的角色,同时也对涉民族因素网络舆情的管控工作提出了新的挑战。涉民族因素网络舆情管控面临着舆论载体分离、引导力度不够、分析不到位的困境。坚持在网络舆情引导的过程中,铸牢中华民族共同体意识,化被动为主动,充分利用新媒体的优势,做好舆情的正确引导和分析,是摆脱这些困境的重要途径。 展开更多
关键词 新媒体时代 民族问题 网络舆情
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次氯酸钠真空处理绿豆消毒效果评价及机理研究 被引量:1
11
作者 赵燕 傅亮 +1 位作者 罗欣 周美玉 《工业微生物》 CAS CSCD 2016年第3期47-50,共4页
本研究讨论了绿豆中微生物的分布规律及相关联的结构特征,次氯酸钠常规及真空处理绿豆全豆、表皮及内部消毒效果的评价及机理分析。结果证明,绿豆全豆、表皮及内部的菌落总数分别为8.41×10~5cfu/g、6.70×10~3cfu/g及8.30×... 本研究讨论了绿豆中微生物的分布规律及相关联的结构特征,次氯酸钠常规及真空处理绿豆全豆、表皮及内部消毒效果的评价及机理分析。结果证明,绿豆全豆、表皮及内部的菌落总数分别为8.41×10~5cfu/g、6.70×10~3cfu/g及8.30×10~5cfu/g,经有效氯浓度为(3 000~33 000)mg/kg的次氯酸钠溶液,1 h常规浸种处理后绿豆全豆、表皮及内部菌落总数分别下降(0.93~2.22)log cfu/g、(0.92~2.20)log cfu/g及(0.94~2.09)log cfu/g。真空度0.05 MPa下,经有效氯浓度(3 000~33 000)mg/kg的次氯酸钠溶液1 h浸泡后,绿豆全豆、表皮及内部菌落总数分别下降(1.67~4.15)log cfu/g、(1.15~2.38)log cfu/g及(1.62~4.11)log cfu/g。经分析,真空处理能使次氯酸钠克服绿豆表皮蜡质层及内部空腔结构的影响,有效接触微生物从而提高消毒效果。 展开更多
关键词 绿豆 次氯酸钠 真空处理 菌落总数
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建模思想在地理高考备考中的运用
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作者 赵燕 《世纪之星—高中版》 2022年第3期1-3,共3页
建模思想指根据实际问题来建立模型,再对模型进行求解,最后根据结果达到解决实际问题的目的,本质上是培养学生灵活运用所学知识解决实际问题的能力,锻炼学生的抽象思维、简化思维等。在地理高考中,试题通过提供真实复杂的地理情境,检测... 建模思想指根据实际问题来建立模型,再对模型进行求解,最后根据结果达到解决实际问题的目的,本质上是培养学生灵活运用所学知识解决实际问题的能力,锻炼学生的抽象思维、简化思维等。在地理高考中,试题通过提供真实复杂的地理情境,检测学生运用地理知识与技能解决实际问题的能力。将建模思想运用到地理高考备考中,能有效辅助学生透过现象看本质,将复杂的地理情境清晰化、简单化,对地理问题的解决能够做到举一反三,提高复习有效性。 展开更多
关键词 建模思想 高中地理 高考备考
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影响少数民族大学生就业的观念因素及消解对策--以辽宁省大连市高校为例 被引量:1
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作者 徐祥运 王丽双 +1 位作者 赵燕 李金秀 《大连大学学报》 2020年第1期136-144,共9页
本研究以辽宁省大连市高校的少数民族大学生为例,采用半结构访谈方法,通过了解他们的基本情况、个人就业目标和未来发展方向等,分析影响少数民族大学生就业观念的各种因素,用统计性就业歧视理论、人力资本理论、教育筛选理论、劳动力市... 本研究以辽宁省大连市高校的少数民族大学生为例,采用半结构访谈方法,通过了解他们的基本情况、个人就业目标和未来发展方向等,分析影响少数民族大学生就业观念的各种因素,用统计性就业歧视理论、人力资本理论、教育筛选理论、劳动力市场分割理论分析论述少数民族大学生就业观念形成的原因和就业困境,并针对如何改变少数民族大学生就业处于劣势的局面提出相关建议与对策。 展开更多
关键词 少数民族大学生 就业观念 对策建议 大连高校
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鲤池塘养殖中后期藻华动态与水环境特征 被引量:1
14
作者 付琴琴 高云霓 +6 位作者 董静 王磊 宋冬蓥 胡旖媚 陈婧婉 赵燕 聂万林 《江苏农业科学》 2018年第21期190-195,共6页
于2016年9—11月对比观测2个鲤养殖池塘藻华动态,并结合池塘藻类组成、水华营养因子分析水环境特征。结果显示,1#、2#池塘的藻华优势种整体为铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa),密度范围分别为1. 03×106~3. 20×106cells/m ... 于2016年9—11月对比观测2个鲤养殖池塘藻华动态,并结合池塘藻类组成、水华营养因子分析水环境特征。结果显示,1#、2#池塘的藻华优势种整体为铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa),密度范围分别为1. 03×106~3. 20×106cells/m L、0. 72×105~7. 54×105cells/m L,均值分别占各池塘藻类总量的88. 15%、56. 22%。1#池塘蓝藻一直占优势,而2#池塘在10月中下旬硅藻占据最大比重。2个池塘在p H值、温度、电导率、盐度、碱度、平均总氮浓度等水环境指标方面没有明显差异,而磷酸盐浓度等指标差异明显。营养因子与藻类CCA分析结果显示,养殖池塘秋季藻类动态主要与总氮(TN)、总磷(TP)、活性磷(PO4-P)、氨态氮(NH3-N)、硝态氮(NO3-N)浓度相关,其中活性磷(PO4-P)浓度是主要影响因子,有必要在养殖中后期从内源和外源进行调控。 展开更多
关键词 养殖池塘 藻华 营养因子 水环境 典范对应分析(CCA)
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草鱼Ⅲ型呼肠孤病毒NS66抗体制备及应用
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作者 李婉娟 王龙龙 +2 位作者 喻飞 赵燕 吕利群 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期182-189,共8页
[背景]草鱼Ⅲ型呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV genotypeⅢ) 104株可导致典型性草鱼出血病,对其编码片段的分析有望为临床免疫学检测提供依据。[目的]研究GCRV104株s6基因节段编码蛋白NS66的可能功能,制备良好的GCRV104株NS66蛋... [背景]草鱼Ⅲ型呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV genotypeⅢ) 104株可导致典型性草鱼出血病,对其编码片段的分析有望为临床免疫学检测提供依据。[目的]研究GCRV104株s6基因节段编码蛋白NS66的可能功能,制备良好的GCRV104株NS66蛋白多克隆抗体并分析其特异性。[方法]PCR方法扩增GCRV104株s6基因片段,并克隆至表达载体pGEX-4T-3,转化到大肠杆菌BL21后用IPTG诱导表达,其产物经SDS-PAGE鉴定分析后,通过纯化获得目的蛋白。然后用纯化的pGEX-4T-3-NS66重组蛋白免疫小鼠,获得Anti pGEX-4T-3-NS66多克隆抗体,Western blot测定抗体效价,Western blotting和间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)鉴定抗体特异性。[结果]SDS-PAGE分析显示表达的重组蛋白约66 kD,大小与预期相符,主要存在于包涵体中;Western blotting测得制备的多克隆抗体效价大于1:50 000,Western blotting和IFA结果表明,制备的多克隆抗体能特异性识别GCRV104病毒。[结论]GCRV104病毒编码的非结构蛋白NS66可能参与了复制和组装过程,形成病毒包涵体,这为建立GCRV104免疫诊断方法及研究GCRV编码的NS66蛋白的功能奠定了前期基础。 展开更多
关键词 草鱼呼肠孤病毒 104株 NS66 多克隆抗体
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