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基于ERIC-PCR指纹图谱技术的小鼠肠道菌群失调分析方法的建立
被引量：
4
1
作者
孙杰
孙丽妲
+3 位作者
伦永志
潘志鹏
潘凌鸿
赵
梓
晗
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2016年第12期1386-1388,1392,共4页
目的采用常规菌群分析方法和ERIC-PCR技术对正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠模型分别进行肠道菌群检测,结合细菌培养和DNA指纹图谱检测结果分析小鼠肠道内主导菌群数量和种类的改变情况,建立利用ERIC-PCR技术分析小鼠肠道菌群失调的检...
目的采用常规菌群分析方法和ERIC-PCR技术对正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠模型分别进行肠道菌群检测,结合细菌培养和DNA指纹图谱检测结果分析小鼠肠道内主导菌群数量和种类的改变情况,建立利用ERIC-PCR技术分析小鼠肠道菌群失调的检测方法。方法先利用常规菌群分析方法鉴定正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠的菌群状况,再提取其基因组DNA,最后以肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)为模板,利用ERIC-PCR方法获得正常小鼠和模型小鼠的肠道菌群指纹图谱,与常规菌群分析结果作比较,验证ERIC-PCR技术的准确性。结果常规菌群分析结果表明四种优势菌群在数量上出现明显的变化,证实造模成功。经ERIC-PCR技术成功获得两组小鼠粪便基因组DNA图谱,两组间呈现具有一定对比性的特异性指纹图谱。结论从小鼠粪便基因组经ERIC-PCR后的图谱中特异性条带的分布、数目和亮度来看,能说明肠道菌群的分布状况存在明显差异,结合常规菌群分析方法作对比,说明ERIC-PCR技术是一种分析小鼠肠道菌群失调高效快捷的检测方法。
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关键词
小鼠粪便基因组
菌群失调
常规菌群培养
ERIC-PCR
原文传递
重组人Hespintor对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用
2
作者
孙杰
赵
梓
晗
+2 位作者
潘志鹏
潘凌鸿
伦永志
《重庆医学》
CAS
北大核心
2017年第9期1182-1185,共4页
目的完善重组Hespintor蛋白(rHespintor)的纯化方法,提高蛋白提取效率,并探讨其对肝母细胞瘤HepG2细胞增殖及侵袭作用的影响。方法在重组蛋白提取中增加包涵体洗涤过程,更改蛋白纯化缓冲体系,并利用Na-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基酰胺盐酸...
目的完善重组Hespintor蛋白(rHespintor)的纯化方法,提高蛋白提取效率,并探讨其对肝母细胞瘤HepG2细胞增殖及侵袭作用的影响。方法在重组蛋白提取中增加包涵体洗涤过程,更改蛋白纯化缓冲体系,并利用Na-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基酰胺盐酸盐(BAPNA)为作用底物,测定纯化的rHespintor对胰蛋白酶水解抑制活性。以空白组为对照组,通过MTT实验、细胞划痕愈合实验、肿瘤细胞侵袭实验分别检测rHespintor对肝母细胞瘤HepG2细胞生长的影响及作用效果。结果对包涵体蛋白进行尿素梯度洗涤后可有效去除目的蛋白中绝大多数杂蛋白,一步纯化后,目的蛋白rHespintor具有较高胰蛋白酶水解抑制活性,且抑制效果呈剂量依赖关系。rHespintor作用于肝母细胞瘤HepG2细胞后,细胞增殖受到抑制,迁移能力减弱,侵袭的细胞数量显著减少。结论 rHespintor在体外可明显抑制肝母细胞瘤HepG2细胞的增殖及侵袭作用。
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关键词
重组蛋白质类
丝氨酸蛋白酶抑制因子
细胞增殖
细胞运动
细胞侵袭
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职称材料
题名
基于ERIC-PCR指纹图谱技术的小鼠肠道菌群失调分析方法的建立
被引量：
4
1
作者
孙杰
孙丽妲
伦永志
潘志鹏
潘凌鸿
赵
梓
晗
机构
莆田学院药学与医学技术学院医学检验系
天津医科大学基础医学院免疫学系
大连大学医学院医学检验系
出处
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2016年第12期1386-1388,1392,共4页
文摘
目的采用常规菌群分析方法和ERIC-PCR技术对正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠模型分别进行肠道菌群检测,结合细菌培养和DNA指纹图谱检测结果分析小鼠肠道内主导菌群数量和种类的改变情况,建立利用ERIC-PCR技术分析小鼠肠道菌群失调的检测方法。方法先利用常规菌群分析方法鉴定正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠的菌群状况,再提取其基因组DNA,最后以肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)为模板,利用ERIC-PCR方法获得正常小鼠和模型小鼠的肠道菌群指纹图谱,与常规菌群分析结果作比较,验证ERIC-PCR技术的准确性。结果常规菌群分析结果表明四种优势菌群在数量上出现明显的变化,证实造模成功。经ERIC-PCR技术成功获得两组小鼠粪便基因组DNA图谱,两组间呈现具有一定对比性的特异性指纹图谱。结论从小鼠粪便基因组经ERIC-PCR后的图谱中特异性条带的分布、数目和亮度来看,能说明肠道菌群的分布状况存在明显差异,结合常规菌群分析方法作对比,说明ERIC-PCR技术是一种分析小鼠肠道菌群失调高效快捷的检测方法。
关键词
小鼠粪便基因组
菌群失调
常规菌群培养
ERIC-PCR
Keywords
Mouse droppings genome
Flora disequilibrium
Routine bacterial culture
ERIC-PCR
分类号
R372 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
重组人Hespintor对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用
2
作者
孙杰
赵
梓
晗
潘志鹏
潘凌鸿
伦永志
机构
莆田学院药学与医学技术学院医学检验系
大连大学医学院医学检验系
出处
《重庆医学》
CAS
北大核心
2017年第9期1182-1185,共4页
文摘
目的完善重组Hespintor蛋白(rHespintor)的纯化方法,提高蛋白提取效率,并探讨其对肝母细胞瘤HepG2细胞增殖及侵袭作用的影响。方法在重组蛋白提取中增加包涵体洗涤过程,更改蛋白纯化缓冲体系,并利用Na-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基酰胺盐酸盐(BAPNA)为作用底物,测定纯化的rHespintor对胰蛋白酶水解抑制活性。以空白组为对照组,通过MTT实验、细胞划痕愈合实验、肿瘤细胞侵袭实验分别检测rHespintor对肝母细胞瘤HepG2细胞生长的影响及作用效果。结果对包涵体蛋白进行尿素梯度洗涤后可有效去除目的蛋白中绝大多数杂蛋白,一步纯化后,目的蛋白rHespintor具有较高胰蛋白酶水解抑制活性,且抑制效果呈剂量依赖关系。rHespintor作用于肝母细胞瘤HepG2细胞后,细胞增殖受到抑制,迁移能力减弱,侵袭的细胞数量显著减少。结论 rHespintor在体外可明显抑制肝母细胞瘤HepG2细胞的增殖及侵袭作用。
关键词
重组蛋白质类
丝氨酸蛋白酶抑制因子
细胞增殖
细胞运动
细胞侵袭
Keywords
recombinant protein
serine proteinase inhibitor
cell proliferation
cell movement
cell invasion
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于ERIC-PCR指纹图谱技术的小鼠肠道菌群失调分析方法的建立
孙杰
孙丽妲
伦永志
潘志鹏
潘凌鸿
赵
梓
晗
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2016
4
原文传递
2
重组人Hespintor对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用
孙杰
赵
梓
晗
潘志鹏
潘凌鸿
伦永志
《重庆医学》
CAS
北大核心
2017
0
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已选择
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