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猫球形马拉色菌脂肪酶SMG 1基因的真核表达及重组载体脂肪酶活性分析
1
作者 王开开 赵懿侔 +4 位作者 张含露 邱实 刘艺佳 张文鑫 杨丰利 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2037-2046,共10页
【目的】马拉色菌(Malassezia)是引起猫外耳炎的病因之一,具有脂质依赖性,脂肪酶SMG 1基因能调控球形马拉色菌脂肪酶的合成。本研究旨在构建脂肪酶SMG 1基因毕赤酵母表达载体,获得SMG 1基因重组表达产物,并对脂肪酶酶活性进行分析,为后... 【目的】马拉色菌(Malassezia)是引起猫外耳炎的病因之一,具有脂质依赖性,脂肪酶SMG 1基因能调控球形马拉色菌脂肪酶的合成。本研究旨在构建脂肪酶SMG 1基因毕赤酵母表达载体,获得SMG 1基因重组表达产物,并对脂肪酶酶活性进行分析,为后续马拉色菌脂肪酶SMG 1基因功能研究提供依据。【方法】对1例疑似猫马拉色菌性外耳炎病例的致病菌进行真菌分离鉴定,并通过相似性比对确定菌种类型;利用DNAworks软件优化脂肪酶SMG 1基因,构建克隆载体并鉴定;使用毕赤酵母表达系统构建SMG 1基因真核表达载体,并对重组表达载体进行筛选及鉴定;对重组载体脂肪酶活性进行测定。【结果】试验成功从疑似患有马拉色菌性外耳炎的患猫耳道中分离得到1株马拉色菌菌株,鉴定为球形马拉色菌;通过对马拉色菌脂肪酶SMG 1基因密码子的优化,将密码子适应指数(codon adaptation index,CAI)提高至0.95;成功构建脂肪酶SMG 1基因克隆载体,成功构建重组质粒pGAPZαA-SMG1并转入毕赤酵母X33中,诱导表达后使用SDS-PAGE分析,蛋白产物大小为35 ku,脂肪酶酶活性测定为0.023 U/mL;重组脂肪酶SMG1在30℃酶活性最高(0.027 U/mL),与40、45℃组间差异均极显著(P<0.01)。【结论】球形马拉色菌在猫耳道皮肤温度附近有较高的脂肪酶活性,同时脂质促进了马拉色菌的生长;毕赤酵母表达系统可成功表达并分泌重组脂肪酶SMG1。试验结果为后续猫马拉色菌性外耳炎的致病机制研究、脂肪酶抑制剂研制及快速检测技术的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 猫 球形马拉色菌 脂肪酶 毕赤酵母 真核表达
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犬猫微创绝育手术和杨氏缝合法的开发与应用 被引量：2
2
作者 吕熙 赵懿侔 +5 位作者 赵梦杉 刘诗雨 邱实 张含露 杨丰利 万春云 《今日畜牧兽医》 2022年第11期3-5,共3页
本实验旨在通过改进犬猫绝育普通手术方式(微创),尽可能地减少对肌肉的横断破坏,降低机体的损伤,减轻动物的疼痛;通过新型皮内缝合方式(为了区分现有皮内缝合方法,下文统称杨氏缝合法),使用可吸收缝线并隐藏线结,避免犬猫舔舐缝线,降低... 本实验旨在通过改进犬猫绝育普通手术方式(微创),尽可能地减少对肌肉的横断破坏,降低机体的损伤,减轻动物的疼痛;通过新型皮内缝合方式(为了区分现有皮内缝合方法,下文统称杨氏缝合法),使用可吸收缝线并隐藏线结,避免犬猫舔舐缝线,降低伤口感染的风险,增强其美观性。本实验采用微创绝育手术和杨氏缝合法分别对1岁龄和2岁龄的犬以及8月龄和1岁龄的猫进行绝育。结果表明微创绝育手术的犬猫伤口长度在7~15mm,伤口无缝线暴露于体表,且缝合后伤口紧缩2mm左右,术后不易感染,切口恢复快。 展开更多
关键词 微创 犬猫 绝育 皮内缝合
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协同论证驱动式教学对动物医学实践技能的影响——基于不同成就动机水平的分析 被引量：2
3
作者 赵懿侔 赵梦杉 +4 位作者 吕熙 张含露 邱实 杨丰利 李小杉 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期124-130,共7页
为全面深化农林教育教学改革,为我国生态文明、农业现代化建设提供专业人才支撑、科技贡献以及智力支持,深化农科类科教结合,2018年10月,教育部、农业农村部、国家林业和草原局共同发布了《关于加强农科教结合实施卓越农林人才教育培养... 为全面深化农林教育教学改革,为我国生态文明、农业现代化建设提供专业人才支撑、科技贡献以及智力支持,深化农科类科教结合,2018年10月,教育部、农业农村部、国家林业和草原局共同发布了《关于加强农科教结合实施卓越农林人才教育培养计划2.0的意见》,旨在打破农林人才的固有培养方式,提高学生对专业学习的兴趣和积极性,同时解决理论知识掌握不扎实、实践动手能力差、理论学习与实际应用脱环等问题,为我国农业发展建设提供高层次的农林人才[1-2]。 展开更多
关键词 农业现代化建设 理论知识掌握 农科教结合 驱动式教学 生态文明 全面深化 农科类 实践动手能力
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犬猫马拉色菌性外耳炎研究进展 被引量：1
4
作者 赵懿侔 张含露 +5 位作者 邱实 吕熙 王开开 赵梦杉 郭灿森 杨丰利 《现代畜牧兽医》 2023年第3期79-84,共6页
马拉色菌性外耳炎是一类由马拉色菌大量繁殖引起的犬猫耳道皮肤病,该病往往造成犬猫耳部红肿瘙痒并分泌大量黑褐色油性分泌物。马拉色菌属于人畜共患病原微生物,在伴侣动物越来越多地与人类亲密接触时,马拉色菌也在人和宠物之间交互传播... 马拉色菌性外耳炎是一类由马拉色菌大量繁殖引起的犬猫耳道皮肤病,该病往往造成犬猫耳部红肿瘙痒并分泌大量黑褐色油性分泌物。马拉色菌属于人畜共患病原微生物,在伴侣动物越来越多地与人类亲密接触时,马拉色菌也在人和宠物之间交互传播,为马拉色菌的传播、感染、流行创造了条件。文章拟对犬猫马拉色菌性外耳炎病原学、流行病学、致病机制、临床表现及诊疗现状等方面进行综述,旨在为犬猫马拉色菌性外耳炎诊断及治疗提供参考。 展开更多
关键词 马拉色菌 外耳炎 致病机制 宠物疾病诊疗
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人工复制病例在《兽医内科学》实验教学中的创新应用 被引量：1
5
作者 杨丰利 赵懿侔 +1 位作者 赵梦杉 李小杉 《中国畜禽种业》 2021年第11期9-11,共3页
为提高《兽医内科学》的实验教学质量,模拟动物医院接诊场景,增强学生的临场感,本团队筛选了14种人工复制的动物病例,采取情景教学模式,以小组为单位进行病例诊疗。小组独立接待病例,必要时开展实验室检查,根据检查结果做出诊断并制定... 为提高《兽医内科学》的实验教学质量,模拟动物医院接诊场景,增强学生的临场感,本团队筛选了14种人工复制的动物病例,采取情景教学模式,以小组为单位进行病例诊疗。小组独立接待病例,必要时开展实验室检查,根据检查结果做出诊断并制定治疗方案。实验教师以小组同学实验技能的熟练程度、对病例检查项目的必要性、制定的治疗方案及实验报告结果给予评价。在人工复制动物病例实验教学过程中,教师承担了宠物家长和化验师的角色,学生是临床兽医师的角色,从而真切模拟动物医院兽医师接诊场景,增强学生的临场感。 展开更多
关键词 病例复制 兽医内科学 教学研究 疾病模型 临床兽医 实验教学
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动物肠上皮细胞体外模型用于中药作用机制研究进展 被引量：1
6
作者 刘诗雨 赵梦杉 +3 位作者 赵懿侔 郭帅 万春云 杨丰利 《动物医学进展》 北大核心 2021年第5期95-101,共7页
肠上皮细胞(IECs)体外模型广泛用于肠道致病菌菌株、药物、食品的细胞毒性评估和作用机理研究。通过测定相关指标的变化评价细胞毒性、细胞完整性及屏障功能,分析信号通路中特定蛋白水平探讨药物作用的信号通路及其作用机制,由于许多中... 肠上皮细胞(IECs)体外模型广泛用于肠道致病菌菌株、药物、食品的细胞毒性评估和作用机理研究。通过测定相关指标的变化评价细胞毒性、细胞完整性及屏障功能,分析信号通路中特定蛋白水平探讨药物作用的信号通路及其作用机制,由于许多中药的作用机制至今尚不清晰,在治疗和预防相关疾病时尚未有明确的理论支持。论文通过对多酚类、多糖类、生物碱类、皂苷类及中药方剂在IECs中的作用机制的研究进行综述,以期为未来中药治疗和预防胃肠相关疾病的研究提供理论基础。 展开更多
关键词 动物肠上皮细胞 中药 中药作用机制
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某麋鹿保护区水源中细菌耐药基因携带情况调查 被引量：1
7
作者 邱实 张含露 +5 位作者 朱丹怡 吕熙 万春云 赵懿侔 杨丰利 李鹏飞 《现代畜牧兽医》 2021年第11期67-70,共4页
为了解某麋鹿保护区水源中耐药基因的携带情况,从该麋鹿保护区地表水源中采集了14份水样,利用PCR方法对水源中的细菌进行耐药基因检测,包括四环素类、糖肽类、碳青霉烯类以及喹诺酮类,共4类14种耐药基因。结果表明,四环素类耐药基因tetA... 为了解某麋鹿保护区水源中耐药基因的携带情况,从该麋鹿保护区地表水源中采集了14份水样,利用PCR方法对水源中的细菌进行耐药基因检测,包括四环素类、糖肽类、碳青霉烯类以及喹诺酮类,共4类14种耐药基因。结果表明,四环素类耐药基因tetA、tetB、tetO、tetX的携带率分别为7.14%、28.57%、7.14%、21.43%,未检测到耐药基因tetC、tetL、tetM、tetW;糖肽类耐药基因VanA的携带率为35.71%,未检测到耐药基因VanB、VanC;碳青霉烯类耐药基因NDM、KPC、VIM携带率分别为35.71%、14.28%、14.28%,未检测到耐药基因OXA-48及IPM;未检测到喹诺酮类耐药基因。应加强对麋鹿保护区周边及长江中上游地区水源中耐药细菌的定期监测,以降低耐药菌在环境中转移的潜在风险,并减少耐药基因变异的可能。 展开更多
关键词 耐药基因 抗生素 水源 细菌
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犬细小病毒荆州株的分离鉴定及VP2基因序列分析
8
作者 张含露 刘诗雨 +5 位作者 赵梦杉 赵懿侔 邱实 吕熙 杨丰利 万春云 《现代畜牧兽医》 2022年第4期1-6,共6页
研究旨在了解荆州地区犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的流行变异情况。试验对CPV进行分离鉴定,并对该毒株进行病毒滴度测定、病毒VP2基因测序鉴定及VP2基因序列分析。结果显示,成功分离到1株CPV,将其命名为CPV-JZ2020,且该分离株可... 研究旨在了解荆州地区犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的流行变异情况。试验对CPV进行分离鉴定,并对该毒株进行病毒滴度测定、病毒VP2基因测序鉴定及VP2基因序列分析。结果显示,成功分离到1株CPV,将其命名为CPV-JZ2020,且该分离株可使F81细胞出现明显的细胞病变。第5代病毒在F81细胞上的TCID50为105.0/mL。通过PCR扩增出1755 bp的VP2基因;将CPV-JZ2020株VP2基因(VP2-JZ1)与国内外CPV毒株VP2基因比对,核苷酸同源性为98.39%~99.83%,氨基酸同源性为97.56%~100.00%,申请GenBank登录号为MW495851。研究表明,VP2-JZ1属于CPV-2c型,是目前国内较为多见的一种基因型,但与传统疫苗株的亲缘性较低,可能是造成目前临床上出现免疫失败的原因之一。 展开更多
关键词 犬细小病毒 分离鉴定 VP2基因 序列分析
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荆州市犬细小病毒病临床诊疗分析
9
作者 刘诗雨 赵懿侔 +8 位作者 赵梦杉 郭帅 郭灿森 邱实 吕熙 张含露 杨丰利 万春云 王家乡 《中国畜禽种业》 2021年第3期51-53,共3页
为了进一步明确犬细小病毒病的诊疗方式,提高该病治愈率,本文对荆州某动物医院2019年1月至2020年9月确诊并收治的22例犬细小病毒病的病例进行整理,依据宠物症状、病毒含量及宠主要求制定不同治疗方案。结果表明,使用单抗、抑制蛋白干扰... 为了进一步明确犬细小病毒病的诊疗方式,提高该病治愈率,本文对荆州某动物医院2019年1月至2020年9月确诊并收治的22例犬细小病毒病的病例进行整理,依据宠物症状、病毒含量及宠主要求制定不同治疗方案。结果表明,使用单抗、抑制蛋白干扰素等生物制剂治疗结合对症支持治疗可有效治疗犬细小病毒病,使患犬恢复健康,且检测结果中病毒含量低的患犬的治愈率明显高出平均水平。 展开更多
关键词 犬细小病毒病 诊断 治疗
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1例犬巨食道症并发吸入性肺炎的诊断和治疗
10
作者 郭灿森 李梦玲 +2 位作者 赵梦杉 赵懿侔 杨丰利 《现代畜牧兽医》 2021年第11期51-54,共4页
巨食道症是一种以食管运动障碍、弥漫性食管扩张为特征的综合征,多发于犬。临床常见呕吐、进行性消瘦、咳嗽及口臭等症状,吸入性肺炎为犬巨食道症最常见、最危险的并发症。文章分享1例典型犬巨食道症并发吸入性肺炎的病例,以期为犬巨食... 巨食道症是一种以食管运动障碍、弥漫性食管扩张为特征的综合征,多发于犬。临床常见呕吐、进行性消瘦、咳嗽及口臭等症状,吸入性肺炎为犬巨食道症最常见、最危险的并发症。文章分享1例典型犬巨食道症并发吸入性肺炎的病例,以期为犬巨食道症的诊治及研究提供参考。通过临床检查、血液学检查、影像学检查后确诊为犬巨食道症;采用对因治疗、对症治疗、调整饮食、改善采食方式等手段治疗9 d后痊愈出院。但因宠物主人所用直立饮食凳较小,患犬无法完全站立,造成二次吸入性肺炎。由于犬巨食道症缺少有效的治疗方法,药物或手术恢复犬食道运动能力的效果不佳,因此,已患巨食道症的犬可通过直立饮食的方式减少因呕吐和反流造成的并发症,延长动物寿命。 展开更多
关键词 巨食道症 反流 吸入性肺炎 诊断 治疗
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