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肝癌患者血浆RASSF1A异常甲基化检测的意义 被引量:6
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作者 赵强 祁志芳 +2 位作者 魏万礼 李开宗 窦科峰 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第17期1577-1579,共3页
目的采用甲基化特异性PCR法(MSP)检测41例原发性肝癌(HCC)患者血浆中游离Ras相关结构域家族蛋白1A(RASSF1A)异常高甲基化情况,探讨血浆RASSF1A检测在肝癌诊断中的意义.方法收集患者血浆,提取游离DNA,亚硫酸氢钠修饰并纯化,以甲基化特异... 目的采用甲基化特异性PCR法(MSP)检测41例原发性肝癌(HCC)患者血浆中游离Ras相关结构域家族蛋白1A(RASSF1A)异常高甲基化情况,探讨血浆RASSF1A检测在肝癌诊断中的意义.方法收集患者血浆,提取游离DNA,亚硫酸氢钠修饰并纯化,以甲基化特异性引物及非甲基化引物进行PCR.结果41例患者血浆中有17例RASSF1A呈现异常高甲基化(41.5%),对照血浆均为阴性.患者一般情况、临床病理资料等与血浆中RASSF1A异常高甲基化检测结果无关(P>0.05);在10例AFP阴性的HCC患者中,有7例结果为阳性.结论血浆RASSF1A甲基化检测对肝癌的早期诊断及筛选有重要意义,并有助于判断预后. 展开更多
关键词 肝肿瘤 RASSF1A基因 甲基化 血浆
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原发性肝癌组织RASSF1A异常甲基化与DNMTs及HBV的关系 被引量:3
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作者 赵强 窦科峰 +3 位作者 祁志芳 魏万礼 杨雁灵 李开宗 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2006年第4期287-289,共3页
目的探讨原发性肝癌ras相关结构域家族1A(ras association domain family 1A, RASSF1A)异常甲基化与肿瘤组织中DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)转录水平变化及HBV感染的关系。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specifi... 目的探讨原发性肝癌ras相关结构域家族1A(ras association domain family 1A, RASSF1A)异常甲基化与肿瘤组织中DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)转录水平变化及HBV感染的关系。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)技术检测 61例原发性肝癌组织RASSF1A基因异常甲基化情况,RT-PCR法检测其中三种主要DNA甲基转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)水平的变化。结果61例肝癌标本中RASSF1A基因启动子区异常甲基化45例(73.8%);HBV感染者47例(77.1%),其中MSP阳性32例;无HBV感染者14例,其中MSP阳性13例,RASSF1A基因异常甲基化与HBV感染之间的关系无统计学意义(X2=2.260, P=0.133)。肝癌组、肝癌细胞系组及HBV感染组DNMTs表达水平与正常对照组相比均显著升高; 组内比较显示肝癌组中DNMT3A、DNMT3B在MSP阳性患者中较阴性患者升高(分别为t=3.494, P<0.01:t=4.258,P<0.01),而DNMT1下降(t=3.221,P<0.05);HBV感染组中,MSP阳性组织其 DNMT3B较阴性者升高(t=12.171,P<0.01)。结论肝癌组织DNMTs水平变化与RASSF1A异常甲基化有密切关系;HBV感染与DNMT3B转录水平变化相关。 展开更多
关键词 肝细胞 基因 ras 甲基化 DNA甲基转移酶 肝炎病毒 乙型
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“三镜”联合序贯治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床价值探讨 被引量:5
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作者 江帆 黎建军 +3 位作者 吴国俊 赵强 邢宏松 罗刚 《海军医学杂志》 2018年第2期129-132,138,共5页
目的比较"三镜"联合与"二镜"联合及传统开腹手术治疗胆囊结石合并胆总管结石的治疗效果,探讨"三镜"联合治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床价值。方法采用随机分组的方法,将确诊为胆囊结石合并胆总管结石... 目的比较"三镜"联合与"二镜"联合及传统开腹手术治疗胆囊结石合并胆总管结石的治疗效果,探讨"三镜"联合治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床价值。方法采用随机分组的方法,将确诊为胆囊结石合并胆总管结石的患者,先筛选排除上腹部手术史、胆总管直径<0.6 cm、胆总管结石直径大于2.0 cm的病例后,再按治疗方法分成4组:即A组为传统开腹手术(TOS组)、B组为腹腔镜加胆道镜(LC+LCBDE组)、C组为腹腔镜加十二指肠镜(LC+ERCP组)和D组为"三镜"联合(LC+LCBDE+ERCP组),每组各50人。比较各组的手术成功率、残余结石率、术中失血、手术时间、引流管留置时间、术后肛门平均排气时间、术后早期下床活动时间、近期并发症例数和平均住院日。结果 D组的手术成功率与其他组比较差异无统计学意义(P>0.05)。在术中失血量[(109.6±53.7)ml]、手术时间[(117.3±53.2)h]和引流管留置时间[(5.3±0.2)d]要明显少于A组[(273.6±67.3)ml、(162.3±23.7)h、(33.6±5.3)d],引流管留置时间要明显少于A组及B组患者(P<0.05),但与C组手术患者相比差异无统计学意义(P>0.05)。在C组的患者术后残余结石发生率、术后肛门排气时间、术后下床活动时间、近期并发症例数及平均住院日均显著少于A组及C组手术组患者(P<0.05)。结论与传统开腹及"二镜"联合相比,"三镜"联合治疗胆囊结石合并胆总管结石创伤更小、并发症更少、恢复更快,减少住院时间,值得进一步推广应用。 展开更多
关键词 胆囊结石 胆总管结石 腹腔镜 胆道镜 十二指肠镜
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抗肝癌单链抗体融合PE38重组免疫毒素的构建、表达及纯化 被引量:2
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作者 赵强 刘彦仿 +2 位作者 窦科峰 张静 李开宗 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第9期809-812,共4页
目的 :构建绿脓杆菌外毒素PE38融合人源化鼠抗肝癌单链抗体 (hscFv)原核表达载体 ,并对其产物作初步纯化 ,检测其对人肝癌细胞系SMMC 772 1的毒性作用 .方法 :采用基因工程原理 ,将PE38基因片段亚克隆入hscFv表达载体 pGEX 4T 1中 ,重... 目的 :构建绿脓杆菌外毒素PE38融合人源化鼠抗肝癌单链抗体 (hscFv)原核表达载体 ,并对其产物作初步纯化 ,检测其对人肝癌细胞系SMMC 772 1的毒性作用 .方法 :采用基因工程原理 ,将PE38基因片段亚克隆入hscFv表达载体 pGEX 4T 1中 ,重组克隆载体经酶切及DNA序列测定证实两片段连接正确 ;转化大肠杆菌JM10 9后 ,受IPTG诱导表达GST融合蛋白 ,产物包涵体经变性、复性及重折叠并经GST亲合层析柱层析、凝血酶消化后 ,得到纯化的hscFv PE38融合蛋白 .采用MTT法检测hscFv PE38对SMMC772 1的杀伤作用 .结果 :实验成功构建了免疫毒素表达载体pGEX 4T 1 hscFv PE38(以下简称pGEXh PE38) ;诱导产物主要以包涵体形式存在 ,表达量为 11% ;纯化的hscFv PE38对SMMC 772 1细胞系具有较明显的杀伤作用 ,最大杀伤率为78% ,IC50 为 0 .386mg·L-1.结论 :人源化抗肝癌单链抗体与PE38重组免疫毒素的成功表达纯化及对人肝癌细胞系的试验结果 。 展开更多
关键词 PE38 免疫毒素 肝细胞 表达 纯化
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PE38与人源化抗肝癌单链抗体重组免疫毒素的构建及表达 被引量:1
5
作者 赵强 窦科峰 刘彦仿 《西北国防医学杂志》 CAS 2002年第6期421-423,共3页
目的 :构建绿脓杆菌外毒素PE38融合人源化鼠抗肝癌单链抗体 (hscFv)原核表达载体 ,对其产物作初步鉴定 ,为肝癌的导向治疗奠定基础。方法 :采用分子克隆技术 ,PCR法扩增PE38基因片段 ,克隆入GST -融合蛋白表达载体pGEX - 4T - 1-hscFv... 目的 :构建绿脓杆菌外毒素PE38融合人源化鼠抗肝癌单链抗体 (hscFv)原核表达载体 ,对其产物作初步鉴定 ,为肝癌的导向治疗奠定基础。方法 :采用分子克隆技术 ,PCR法扩增PE38基因片段 ,克隆入GST -融合蛋白表达载体pGEX - 4T - 1-hscFv中 ,重组克隆载体经酶切及DNA序列测定证实两片段连接正确 ,受IPTG诱导表达后 ,SDS -PAGE及Westernblot分析GST融合蛋白结果。结果 :成功构建免疫毒素表达载体pGEX - 4T - 1-hscFv -PE38(以下简称pGEXh -PE38) ;SDS -PAGE清晰显示Mr为 90 0 0 0的目的蛋白条带 ,光密度薄层扫描提示表达量为 11% ,Westernblot在相同位置显示蛋白印迹 ,证实载体构建及表达均正确。结论 :利用基因重组技术 ,在原核细胞中表达重组免疫毒素hscFv -PE38。 展开更多
关键词 PE38 人源化抗肝癌单链抗体 重组免疫毒素 构建 肝细胞肝癌
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长链非编码RNA MCM3AP-AS1在胆管癌细胞中的表达及其功能 被引量:1
6
作者 李博 赵强 黎建军 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1039-1047,共9页
背景与目的:长链非编码RNA MCM3AP-AS1(MCM3AP-AS1)在原发性肝癌、乳腺癌及胶质母细胞瘤等多种肿瘤中发挥癌基因功能,然而MCM3AP-AS1在胆管癌中的表达、功能及作用机制尚知之甚少。因此,本研究观察MCM3AP-AS1在胆管癌细胞中的表达及其... 背景与目的:长链非编码RNA MCM3AP-AS1(MCM3AP-AS1)在原发性肝癌、乳腺癌及胶质母细胞瘤等多种肿瘤中发挥癌基因功能,然而MCM3AP-AS1在胆管癌中的表达、功能及作用机制尚知之甚少。因此,本研究观察MCM3AP-AS1在胆管癌细胞中的表达及其对细胞增殖和侵袭的影响,并初步探讨机制。方法:采用qRT-PCR法检测胆管癌细胞株(CCLP、RBE、9810、HuCCT1)及人肝内胆管上皮细胞株(HIBEC)中MCM3AP-AS1的表达。将胆管癌细胞转染MCM3AP-AS1 siRNA后,以转染无义序列的胆管癌细胞为阴性对照,分别用MTT实验和Transwell实验检测细胞增殖与侵袭能力的变化,用Western blot法检测JAK/STAT3信号通路与上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达的变化;最后,用JAK/STAT3通路激动剂白血病抑制因子(LIF)行功能拯救实验验证。结果:所有胆管癌细胞系中MCM3AP-AS1表达量均明显高于HIBEC(均P<0.05)。与阴性对照组比较,CCLP细胞转染MCM3AP-AS1 siRNA后增殖能力与侵袭能力均明显减弱(均P<0.05);JAK1/2与STAT3表达量无明显变化(均P>0.05),但p-JAK1/2与p-STAT3表达量明显降低(均P<0.05),同时,EMT相关蛋白E-cadherin表达升高、vimentin表达降低(均P<0.05)。功能拯救实验结果显示,同时加入LIF后,MCM3AP-AS1沉默对CCLP细胞后的以上作用均被取消,与阴性对照组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:胆管癌细胞中MCM3AP-AS1表达上调,MCM3AP-AS1可能通过活化JAK/STAT3通路与EMT过程而促进胆管癌细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 胆管肿瘤 RNA 长链非编码 细胞增殖 肿瘤浸润
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探讨儿童股骨头缺血坏死的致病原因
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作者 王延福 李松森 赵强 《影像技术》 CAS 2009年第2期58-59,共2页
目的:探讨儿童股骨头缺血坏死可能的致病原因。方法:分析25例儿童股骨头缺血性坏死的病史、生活环境及接触史等可能与疾病的联系。结果:25例患儿均无明显的外伤史,无其它疾病史及不良接触史,均有患感冒后接受输液治疗的习惯史。结论:儿... 目的:探讨儿童股骨头缺血坏死可能的致病原因。方法:分析25例儿童股骨头缺血性坏死的病史、生活环境及接触史等可能与疾病的联系。结果:25例患儿均无明显的外伤史,无其它疾病史及不良接触史,均有患感冒后接受输液治疗的习惯史。结论:儿童股骨头缺血性坏死有区域性分布的特点,其致病多与不当使用或滥用激素密切相关。 展开更多
关键词 儿童 股骨头 致病因素 激素
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