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食品中椰毒假单胞菌酵米亚种实时荧光PCR检测的研究 被引量:13
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作者 林捷 方陈玉 +3 位作者 陆晶芳 尹丹韩 王加胜 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第11期3538-3544,共7页
目的建立食品中椰毒假单胞菌酵米面亚种实时荧光PCR检测方法。方法根据椰毒假单胞菌酵米面亚种16S^23S rRNA基因片段序列,用Oligo7设计一对特异性引物和一个TaqMan探针,摸索最佳退火温度,最佳引物和探针浓度,建立椰毒假单胞菌酵米面亚... 目的建立食品中椰毒假单胞菌酵米面亚种实时荧光PCR检测方法。方法根据椰毒假单胞菌酵米面亚种16S^23S rRNA基因片段序列,用Oligo7设计一对特异性引物和一个TaqMan探针,摸索最佳退火温度,最佳引物和探针浓度,建立椰毒假单胞菌酵米面亚种实时荧光PCR检测方法。通过对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌以及22种其他标准菌株进行实时荧光PCR检测,验证本法的特异性和抗干扰性。同时从菌液浓度和DNA浓度水平上进行研究,确定该检测方法的灵敏度。结果用该方法检测23种菌,除唐菖蒲伯克霍尔德氏菌外,其他22种细菌均为阴性。抗干扰性试验显示杂菌对检测结果不影响,本法抗干扰能力强。通过灵敏度试验的研究,确定本法检测椰毒假单胞菌酵米面亚种的菌液灵敏度为1×10^2 CFU/mL,DNA灵敏度为250 fg/μL。结论本试验设计的引物和探针具有较强特异性、抗干扰性以及灵敏度,该方法具有很好的研究价值和应用前景。 展开更多
关键词 椰毒假单胞菌酵米面亚种 实时荧光PCR TAQMAN探针
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食源性致病菌快速检测仪器现场评价分析 被引量:6
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作者 尹丹韩 林捷 +2 位作者 方陈玉 肖海龙 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第10期2384-2389,共6页
目的加快快速检测技术和装备的推广,规范其在食品安全监管中的应用,组织食品安全快速检测技术现场验证评价活动。方法以准确率、假阴性率、假阳性率、时效性被作为检测结果的考量指标,考察14家企业的仪器检测食源性致病菌情况,主要考核... 目的加快快速检测技术和装备的推广,规范其在食品安全监管中的应用,组织食品安全快速检测技术现场验证评价活动。方法以准确率、假阴性率、假阳性率、时效性被作为检测结果的考量指标,考察14家企业的仪器检测食源性致病菌情况,主要考核的项目为沙门氏菌和金黄色葡萄球菌,每家企业考核样为4个,每个考核样均需检验沙门氏菌和金黄色葡萄球菌。结果各参试企业的表现差距较大,大部分快检仪器灵敏度在103~104 CFU/m L之间。14家企业中,4家企业准确率为100%,有71.42%的企业出现了假阴性。结论恒温实时荧光PCR技术在食源性致病菌快检中发挥比较明显的优势。准确率、假阴性率、假阳性率、时效性这4个参数能科学有效地评价食源性致病菌快检仪器。 展开更多
关键词 食源性致病菌 快速检测 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌
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羊乳对小鼠肠道微生物的影响 被引量:1
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作者 尹丹韩 +6 位作者 王红青 方陈玉 林捷 李高天 胡弘宇 陆晶芳 肖海龙 《发酵科技通讯》 CAS 2021年第4期206-211,共6页
以小鼠为模式动物,研究羊乳对小鼠肠道微生物菌群的影响,选取36只SPF级小鼠进行试验,试验分为对照组A、试验组B,C。组A采用蒸馏水喂养,组B,C在喂养所用蒸馏水中按体积分别加入30%,60%的羊乳;喂养周期均为20周。第20周最后1天,取小鼠直... 以小鼠为模式动物,研究羊乳对小鼠肠道微生物菌群的影响,选取36只SPF级小鼠进行试验,试验分为对照组A、试验组B,C。组A采用蒸馏水喂养,组B,C在喂养所用蒸馏水中按体积分别加入30%,60%的羊乳;喂养周期均为20周。第20周最后1天,取小鼠直肠部位粪便进行高通量测序。结果显示:摄入羊乳的小鼠的肠道菌群发生了变化,菌群多样性得到提升,其中拟杆菌门(Bacteroidetes)、拟普雷沃氏菌属(Alloprevotella)、乳酸菌属(Lactobacillus)、普雷沃氏菌属(Prevotella_9)、Faecalibacterium属的相对丰度显著提高,厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌属(Bacteroides)、另枝菌属(Alistipes)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、Allobaculum属、链球菌属(Streptococcus)的相对丰度显著降低。羊乳的摄入增加了小鼠肠道微生物多样性,在一定程度上改善了小鼠肠道环境。 展开更多
关键词 羊乳 肠道微生物 高通量测序
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