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人狂犬病病毒抗体ELISA定量检测方法的建立 被引量：3
1
作者 卞论 赵卉 +5 位作者 贾庆钊 方浩霖 何春辉 叶珂 林冠峰 吴英松 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期330-334,共5页
目的建立人狂犬病病毒抗体ELISA定量检测方法,用于评价人用狂犬病疫苗的免疫效果。方法将抗狂犬病病毒单克隆抗体(S010)包被酶标板,加入1∶100稀释的狂犬病病毒灭活全病毒孵育1 h,加入标准品与HRP标记的抗人IgG孵育1.5 h,显色并检测,建... 目的建立人狂犬病病毒抗体ELISA定量检测方法,用于评价人用狂犬病疫苗的免疫效果。方法将抗狂犬病病毒单克隆抗体(S010)包被酶标板,加入1∶100稀释的狂犬病病毒灭活全病毒孵育1 h,加入标准品与HRP标记的抗人IgG孵育1.5 h,显色并检测,建立检测狂犬病病毒抗体的ELISA方法,确定该方法空白限,并进行准确度、精密度验证。用建立的ELISA方法及快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT)对62份阳性血清进行检测,比较相关性。结果捕获抗体最佳包被浓度为3.5μg/mL,酶标抗体最佳稀释度为1∶10 000;样品浓度与信号值具有良好的线性关系,r^(2)> 0.99。该方法检测空白限为0.03 IU/mL;两个不同浓度(1.23和3.12 IU/mL)血清样本检测回收率分别为89.6%和92.6%;两个不同浓度(5和2.5 IU/mL)自制质控品分析内和分析间变异系数分别为13.9%、14.3%和11.5%、13.2%。建立的ELISA方法检测结果与RFFIT法检测结果相关性良好,R^(2)=0.712。结论建立的人狂犬病病毒抗体ELISA定量检测方法充实了人用狂犬病疫苗免疫效果的检测技术,有望用于疫苗免疫效果的初步评估。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 酶联免疫吸附试验 抗体检测 免疫效果
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