目的探讨树突状细胞经60Co-γ射线照射后激活调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)的能力,以及在Treg诱导的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法免疫磁珠分选的小鼠CD4+CD25-常规T细胞(conventio...目的探讨树突状细胞经60Co-γ射线照射后激活调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)的能力,以及在Treg诱导的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法免疫磁珠分选的小鼠CD4+CD25-常规T细胞(conventional T cells,Tcon)与60Co-γ线照射(6 Gy)后的树突状细胞共培养,72 h后采用流式术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例。通过磁珠分选后的Treg与小鼠肺上皮细胞系MLE-12共培养72 h后取MLE-12细胞,免疫荧光和Western印迹技术检测上皮标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和细胞表面蛋白C(prosurfactant protein C,Spc)以及间充质标志蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)和波形蛋白(vimentin)的表达。结果免疫磁珠法分选小鼠脾Treg比例>90%,效果良好;树突状细胞照后抗原提呈功能增强,能显著诱导Tcon分化为Treg; Western印迹和免疫荧光实验证明,Treg能明显促进上皮标志E-cad和Spc表达下调,间充质标志N-cad和vimentin表达升高。结论树突状细胞照射后能显著诱导Treg分化,而Treg能明显诱导肺上皮细胞发生EMT。展开更多
文摘目的探讨树突状细胞经60Co-γ射线照射后激活调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)的能力,以及在Treg诱导的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法免疫磁珠分选的小鼠CD4+CD25-常规T细胞(conventional T cells,Tcon)与60Co-γ线照射(6 Gy)后的树突状细胞共培养,72 h后采用流式术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例。通过磁珠分选后的Treg与小鼠肺上皮细胞系MLE-12共培养72 h后取MLE-12细胞,免疫荧光和Western印迹技术检测上皮标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和细胞表面蛋白C(prosurfactant protein C,Spc)以及间充质标志蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)和波形蛋白(vimentin)的表达。结果免疫磁珠法分选小鼠脾Treg比例>90%,效果良好;树突状细胞照后抗原提呈功能增强,能显著诱导Tcon分化为Treg; Western印迹和免疫荧光实验证明,Treg能明显促进上皮标志E-cad和Spc表达下调,间充质标志N-cad和vimentin表达升高。结论树突状细胞照射后能显著诱导Treg分化,而Treg能明显诱导肺上皮细胞发生EMT。
