CD3AK细胞过继免疫治疗的实验研究 被引量：16

1

作者 孙瑛勋 程绍辉 +4 位作者 于鸣 贺永怀 赖春宁 黎燕 沈倍奋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期218-221,共4页

　目的: 分析抗CD3分子的单克隆抗体 (mAb)yCD3的免疫学特性和生物学活性, 观察其激活的免疫活性细胞CD3AK体外及动物体内的抑瘤作用。方法: 用流式细胞术(FCM)测定yCD3的特异性, 以及CD3AK细胞的免疫表型和产生细胞因子的情况。用 3H -... 　目的: 分析抗CD3分子的单克隆抗体 (mAb)yCD3的免疫学特性和生物学活性, 观察其激活的免疫活性细胞CD3AK体外及动物体内的抑瘤作用。方法: 用流式细胞术(FCM)测定yCD3的特异性, 以及CD3AK细胞的免疫表型和产生细胞因子的情况。用 3H -TdR法测定yCD3对淋巴细胞转化的作用; 乳酸脱氢酶法 (LDH)测定CD3AK细胞的体外细胞毒活性。建立荷瘤小鼠模型, 观察静脉注射CD3AK细胞后肿瘤生长的情况、转移灶数量和小鼠存活天数。结果: yCD3与T细胞呈特异性反应, 5μgyCD3可竞争抑制 70%的标准抗CD3抗体与细胞表面CD3分子的结合。yCD3刺激外周血淋巴细胞增殖的有效浓度为 8μg/L, 并与IL- 2、抗CD28抗体有协同作用。活化的CD3AK细胞中CD3+、CD8+和CD25+细胞增多; 产生IL- 2和IFN γ的CD3+细胞均有不同程度的增加, 在抗CD28抗体协同刺激下分别增加 3. 29和 2. 47倍。当效靶细胞比为 80∶1时, CD3AK细胞对体外肿瘤细胞杀伤的百分率为 57. 54%。分组观察荷瘤动物, CD3AK细胞治疗组的抑瘤率为 33. 17%, 对小鼠肿瘤肺转移的抑制率为39. 70%, 与LAK细胞联合治疗的疗效更显著。结论: yCD3可活化T细胞, 诱导的CD3AK细胞在体外及动物体内显示抑制肿瘤的作用, 在临床抗肿瘤过继性免疫治疗中具有重要意义。 展开更多

关键词 抗CD3单克隆抗体 CD3AK细胞 过继性免疫治疗

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抗T细胞免疫毒素的T细胞清除效率及其对造血细胞的影响 被引量：11

2

作者 黎燕 沈倍奋 +3 位作者 陈兴 贺永怀 陈勇 白炎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期197-200,共4页

抗T细胞免疫毒素主要用于同种异体骨髓移植中清除T细胞,减轻移植物抗宿主反应(GVHD),提高移植成功率,也可用于白血病自体骨髓移植中清除残留白血病细胞,减少移植后白血病复发的可能性。本实验结果表明抗T细胞免疫毒素在10^(-8)M浓度对... 抗T细胞免疫毒素主要用于同种异体骨髓移植中清除T细胞,减轻移植物抗宿主反应(GVHD),提高移植成功率,也可用于白血病自体骨髓移植中清除残留白血病细胞,减少移植后白血病复发的可能性。本实验结果表明抗T细胞免疫毒素在10^(-8)M浓度对靶细胞的杀伤达3.0log以上,即可清除99.99%的靶细胞,并可有效地抑制周血T细胞转化功能和骨髓T细胞分泌IL—2的功能,同时对骨髓粒单系和红系造血细胞的增殖无明显的抑制作用。 展开更多

关键词 T细胞 免疫毒素 造血细胞

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计算机辅助设计使重组ricin-A链在E.coli中的高效表达 被引量：8

3

作者 裴武红 沈倍奋 +3 位作者 李伍举 胡美茹 黎燕 贺永怀 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期33-36,共4页

基于对螺旋区随机堆积的ＲＮＡ二级结构的预测和密码子偏性计算，建立了ｐＢＶ２２０载体中外源基因高效表达的判别模型。该模型认为，外源基因的表达水平，与其５′端３０３９区域，以及３′端３０３９区域的二级结构自由能具有显... 基于对螺旋区随机堆积的ＲＮＡ二级结构的预测和密码子偏性计算，建立了ｐＢＶ２２０载体中外源基因高效表达的判别模型。该模型认为，外源基因的表达水平，与其５′端３０３９区域，以及３′端３０３９区域的二级结构自由能具有显著的统计学意义；其次与３′端９ｂｐ的局部密码子偏性相关。据此模型，我们设计了用于克隆表达ｒｉｃｉｎＡ链的引物。将ＰＣＲ扩增的基因克隆入ｐＢＶ２２０载体中，在ＤＨ５α宿主中获得了高效表达（表达水平在２０％以上），而且在ｐＥｘＳｅｃＩ载体系统中亦获得了高效表达。 展开更多

关键词 重组ricin-A链 RNA 二级结构 CAD

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两种纯化蓖麻毒素方法的比较 被引量：3

4

作者 陈兴 赵立超 +1 位作者 贺永怀 沈倍奋 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第5期636-638,共3页

两种纯化蓖麻毒素方法的比较陈兴，赵立超，贺永怀，沈倍奋（军事医学科学院基础医学研究所，北京１００８５０）高纯度的蓖麻毒素（ｒｉｃｉｎ）对于免疫毒素的制备至关重要，直接影响到免疫毒素的应用效果。总结本实验室纯化ｒｉｃｉ... 两种纯化蓖麻毒素方法的比较陈兴，赵立超，贺永怀，沈倍奋（军事医学科学院基础医学研究所，北京１００８５０）高纯度的蓖麻毒素（ｒｉｃｉｎ）对于免疫毒素的制备至关重要，直接影响到免疫毒素的应用效果。总结本实验室纯化ｒｉｃｉｎ的经验，我们发现蓖麻粗提物依次通... 展开更多

关键词 蓖麻毒素 提纯 免疫毒素 蓖麻

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不同交联方法制备的免疫毒素及其体内外特性 被引量：2

5

作者 汲言山 贺永怀 +2 位作者 陈兴 赵薇薇 沈倍奋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第6期443-447,共5页

用三种不同的异型双功能交联剂把单抗和完整蓖麻毒素连接起来,经适当(?)化获得了高活性免疫毒素(ITs),体外试验中蛋白质合成抑制50％的浓度IC_(50)达到2.7×10^(-12)mol/L.以二硫键连接的ITs比硫醚键连接的ITs细胞毒性高5—10倍(P&l... 用三种不同的异型双功能交联剂把单抗和完整蓖麻毒素连接起来,经适当(?)化获得了高活性免疫毒素(ITs),体外试验中蛋白质合成抑制50％的浓度IC_(50)达到2.7×10^(-12)mol/L.以二硫键连接的ITs比硫醚键连接的ITs细胞毒性高5—10倍(P<0.05),而硫醚键连接的ITs在动物体内代谢慢1倍,且其原型药物维持时间更长,稳定性更好。两类ITs在体内的代谢产物也不相同。 展开更多

关键词 免疫毒素 菌麻毒素 单克隆抗体

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rRTA:DS27免疫毒素的制备及胞内运输研究 被引量：5

6

作者 裴武红 沈倍奋 +4 位作者 黎燕 贺永怀 王国华 张贺秋 汪宝珍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期174-176,共3页

目的：探讨免疫毒素ｒＲＴＡ：ＤＳ２７的内化行为。方法：用原核系统来获得重组蓖麻毒素Ａ链（ｒＲＴＡ）；用胶体金双标记法进行Ｍｏｌｔ４细胞中免疫毒素的导向研究。结果：ＣＭＳｅｐｈｏｒｏｓｅ一步纯化到电泳纯的ｒＲＴＡ，电... 目的：探讨免疫毒素ｒＲＴＡ：ＤＳ２７的内化行为。方法：用原核系统来获得重组蓖麻毒素Ａ链（ｒＲＴＡ）；用胶体金双标记法进行Ｍｏｌｔ４细胞中免疫毒素的导向研究。结果：ＣＭＳｅｐｈｏｒｏｓｅ一步纯化到电泳纯的ｒＲＴＡ，电镜观察到ｒＲＴＡ：ＤＳ２７遵循特异的胞内运输途径。结论：上述结果对于深入了解免疫毒素的作用机理，并进而改善其临床应用具有重要作用。 展开更多

关键词 免疫毒素 胶体金标记 电镜 rRTA 制备

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免疫毒素的细胞毒性测定方法 被引量：7

7

作者 陈兴 黎燕 +3 位作者 汲言山 贺永怀 赵微微 沈倍奋 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1990年第2期10-13,共4页

免疫毒素是一种常见的导向药物,根据它对靶细胞杀伤的机理,可建立一些测定其细胞毒毒性的方法。本及叙述了4种测定免疫毒素细胞毒毒性的方法,~3H-亮氨酸参入法,染料排斥法,MTT法和克隆培养法。并进行了比较。

关键词 免疫毒素 蓖麻毒素 单克隆抗体

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用抗HCV多抗从随机15肽库中筛选抗原表位 被引量：4

8

作者 柯屾 朱继萍 +5 位作者 温新宇 施明 贺永怀 沈倍奋 赵平 姚志建 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期65-67,共3页

目的:分析丙肝患者血清中抗HCV抗体的抗原表位。方法: 制备Protein A亲和层析柱,从丙肝患者血清中纯化、制备抗HCV多克隆抗体;并以此为筛选配基,对噬菌体表面展示的随机15肽库进行亲和筛选。结果:三轮筛选的投入产出比逐轮升高至3.3... 目的:分析丙肝患者血清中抗HCV抗体的抗原表位。方法: 制备Protein A亲和层析柱,从丙肝患者血清中纯化、制备抗HCV多克隆抗体;并以此为筛选配基,对噬菌体表面展示的随机15肽库进行亲和筛选。结果:三轮筛选的投入产出比逐轮升高至3.3×10-3,假阳性率逐轮降低至0.2％,提示具有良好的富集效果。对从第3轮挑选出的16个克隆进行结合试验,发现9个克隆只与HCV抗体有较强的结合力而不与正常人血清起反应。测序表明,8个克隆的外源肽含有核心序列WPWS。用阳性噬菌体克隆检测20例丙肝患者血清,有程度不等的阳性反应。结论:用多克隆抗体从噬菌体随机肽库中,筛选到有一定功能的模拟表位。 展开更多

关键词 噬菌体随机肽库 抗原表位 丙型肝炎病毒

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CD9、CD10单克隆抗体免疫毒素对白血病细胞的清除率及对造血细胞的影响 被引量：5

9

作者 黎燕 贺永怀 +2 位作者 陈兴 孙英勋 沈倍奋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期303-306,共4页

特异性识别C-ALL、Null-ALL白血病细胞表面相应抗原的单克隆抗体(CD9、CD10)与具有杀伤细胞的蓖麻毒素偶联制备的免疫毒素在自体骨髓移植中,对残留白血病细胞的清除,预防移植后白血病的复发是有意义的。本实验观察了两组抗人白细胞分化... 特异性识别C-ALL、Null-ALL白血病细胞表面相应抗原的单克隆抗体(CD9、CD10)与具有杀伤细胞的蓖麻毒素偶联制备的免疫毒素在自体骨髓移植中,对残留白血病细胞的清除,预防移植后白血病的复发是有意义的。本实验观察了两组抗人白细胞分化抗原单克隆抗体(CD9、CD10)免疫毒素对白血病细胞(Nalm-6)的清除率。及它们在有效清除白血病细胞剂量范围内对骨髓多向性造血祖细胞、红系和粒单系造血祖细胞增殖的影响。探讨了免疫毒素在骨髓移植中应用的可行性。 展开更多

关键词 白血病 免疫毒素 造血细胞

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抗T免疫毒素用于异基因骨髓移植的实验研究及初步应用 被引量：3

10

作者 沈倍奋 黎燕 +3 位作者 陈兴 贺永怀 陈勇 孙瑛勋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1994年第1期18-22,共5页

异基因骨髓移植是治疗白血病的有效途径,其主要并发症是供体骨髓中成熟T细胞介导的移植物抗宿主病(GVHD)。抗人T淋巴细胞的单克隆抗体与蓖麻毒素组成的抗T免疫毒素能特异性地去除T细胞。体外实验证明它们能有效地抑制靶细胞的蛋白质合成... 异基因骨髓移植是治疗白血病的有效途径,其主要并发症是供体骨髓中成熟T细胞介导的移植物抗宿主病(GVHD)。抗人T淋巴细胞的单克隆抗体与蓖麻毒素组成的抗T免疫毒素能特异性地去除T细胞。体外实验证明它们能有效地抑制靶细胞的蛋白质合成和T细胞功能。在1×10^(-9)mol/L浓度时对靶细胞的杀伤可达到99.9％,而对非靶细胞则无细胞毒作用。该浓度的抗T免疫毒素对骨髓中造血干祖细胞的增殖没有明显影响。在10例异基因骨髓移植中(8例为HLA二个位点不相同的移植)用它在体外清除供体骨髓中的T细胞,结果未见明显的GVHD发生。 展开更多

关键词 抗T免疫毒素 异基因骨髓移植 实验研究 T细胞 移植物抗宿主病 单克隆抗体 蓖麻毒素

全文增补中

CD_(10)单克隆抗体与造血细胞间关系的研究 被引量：3

11

作者 黎燕 沈倍奋 +3 位作者 陈兴 贺永怀 陈勇 张双喜 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1990年第3期208-211,共4页

单克隆抗体的特异性在导向药物治疗某些疾病的应用研究中起着重要的作用。尽管单克隆抗体对靶细胞具有特异性识别能力,但仍可能与一些无关细胞有着不同程度的交叉反应。本实验结果表明:(1)用浓度为10^(-8)M、10^(-9)M 的抗普通型急性淋... 单克隆抗体的特异性在导向药物治疗某些疾病的应用研究中起着重要的作用。尽管单克隆抗体对靶细胞具有特异性识别能力,但仍可能与一些无关细胞有着不同程度的交叉反应。本实验结果表明:(1)用浓度为10^(-8)M、10^(-9)M 的抗普通型急性淋巴细胞白血病单克隆抗体免疫毒素(79:ricin)处理骨髓细胞后,CFU-GM 的增殖分别受到抑制.(2)用79单克隆抗体阻断后,抑制作用明显减弱.(3)去除骨髓中79抗体阳细胞后,CFU-GM 的增殖也明显减弱。这表明79单克隆抗体不仅仅是一个识别普通型急性淋巴细胞白血病细胞的单克隆抗体,它还可能是一个识别部分骨髓粒单系造血祖细胞的单克隆抗体。 展开更多

关键词 免疫毒素 CFU-GM 增殖

原文传递

rRTA:DS27,ricin:DS27两种免疫毒素的初步比较 被引量：3

12

作者 裴武红 沈倍奋 +2 位作者 黎燕 贺永怀 赖春宁 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第1期4-7,共4页

目的:用重组的蓖麻毒素A链与抗CD5的单克隆抗体DS27交联为免疫毒素rTRA:DS27,与完整蓖麻毒素制备的ricin:DS27进行对比研究.方法:分析它们对靶细胞的特异性杀伤,对骨髓造血细胞增殖的影响,内化情况,以及NH_4cl对rRTA:DS27毒性的增强作用... 目的:用重组的蓖麻毒素A链与抗CD5的单克隆抗体DS27交联为免疫毒素rTRA:DS27,与完整蓖麻毒素制备的ricin:DS27进行对比研究.方法:分析它们对靶细胞的特异性杀伤,对骨髓造血细胞增殖的影响,内化情况,以及NH_4cl对rRTA:DS27毒性的增强作用.结果:rRTA:DS27具有更好的导向特异性,对骨髓造血功能影响较小,NH_4cl能明显增强rRTA:DS27的毒性.结论:rTRA:DS27免疫毒素具有更多的优点. 展开更多

关键词 蓖麻毒素A链 免疫毒素 导向药物

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化学交联的抗TNF和抗CALLA双功能抗体的制备及其导向功能研究 被引量：1

13

作者 刘明旭 贺永怀 +1 位作者 沈倍奋 赵薇薇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第6期341-344,共4页

本文探索了用抗 CALLA 和抗 TNF 的双功能抗体导向 TNF 杀伤 CALLA 阳性白血病细胞的可行性.用化学交联剂 SPDP 制备了抗 TNF 和抗 CALLA 抗体的交联物,经鉴定为双功能抗体;与 TNF 联合使用,在 CALLA 阳性白血病细胞系 nalm—6上进行体... 本文探索了用抗 CALLA 和抗 TNF 的双功能抗体导向 TNF 杀伤 CALLA 阳性白血病细胞的可行性.用化学交联剂 SPDP 制备了抗 TNF 和抗 CALLA 抗体的交联物,经鉴定为双功能抗体;与 TNF 联合使用,在 CALLA 阳性白血病细胞系 nalm—6上进行体外杀伤实验。MTT 比色法测定杀伤效果。我们发现经双功能抗体导向后,nalm—6细胞对 TNF 的敏感性明显增加。 展开更多

关键词 双功能抗体 肿瘤 血白病 免疫疗法

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人FKBP52的基因克隆、表达及活性研究 被引量：1

14

作者 裴武红 贺永怀 +2 位作者 陈兴 李松 沈倍奋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第2期236-239,共4页

为获得具有生物学活性的hFKBP5 2 ,来筛选新型的促神经再生药物 .采用半巢式、桥联PCR及亲和层析方法 ,从人胎脑cDNA文库中成功扩增出hFKBP5 2基因 ,在 pET2 8a (+ )中实现了高效、可溶性的融合表达 ,表达量约 30 % .重组的蛋白质经亲... 为获得具有生物学活性的hFKBP5 2 ,来筛选新型的促神经再生药物 .采用半巢式、桥联PCR及亲和层析方法 ,从人胎脑cDNA文库中成功扩增出hFKBP5 2基因 ,在 pET2 8a (+ )中实现了高效、可溶性的融合表达 ,表达量约 30 % .重组的蛋白质经亲和纯化至电泳纯 ,纯化后的hFKBP5 2显示出肽基脯氨基顺反异构酶活性 .表明原核表达的hFKBP5 2具有类似于其天然蛋白质的生物学活性 . 展开更多

关键词 人FKBP52 基因克隆 原核表达 肽基脯氨基顺反异构酶

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抗人CD130胞内磷酸化酪氨酸单克隆抗体的制备与鉴定

15

作者 于鸣 黎燕 +2 位作者 贺永怀 孙瑛勋 沈倍奋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期547-548,共2页

目的获得一组抗人CD130胞内磷酸化酪氨酸单克隆抗体mAb,用于研究IL-6介导的信号转导。方法按照CD130分子胞内N752-G766区的氨基酸序列,化学合成Y759磷酸化的15肽作为抗原,应用细胞融合法制备一组抗CD130磷酸化酪氨酸的mAb,并用ELISA... 目的获得一组抗人CD130胞内磷酸化酪氨酸单克隆抗体mAb,用于研究IL-6介导的信号转导。方法按照CD130分子胞内N752-G766区的氨基酸序列,化学合成Y759磷酸化的15肽作为抗原,应用细胞融合法制备一组抗CD130磷酸化酪氨酸的mAb,并用ELISA、Westernblot、免疫沉淀和免疫组化染色等技术,对这组mAb的性质和功能进行探讨。结果(1)通过细胞融合获得了4株稳定分泌抗CD130胞内Y759磷酸化mAb的杂交瘤细胞株(MIY1、MIY2、MIY3和MIY4)这组mAb仅对合成肽N752-G766产生特异性反应。(2)Westernblot分析表明这组mAb识别的靶分子的相对分子质量Mr为13×104～14×104的。用此组mAb免疫沉淀的Mr为13×104～14×104蛋白,可被抗CD130mAb所识别;同时用抗CD130mAb免疫沉淀的13×104～14×104分子也可被这组mAb所识别;(3)进一步研究证实这组mAb可识别由IL-6诱导的细胞内酪氨酸磷酸化的蛋白分子。结论成功地研制了抗人CD130胞内磷酸化酪氨酸的mAb。 展开更多

关键词 CD130分子 单克隆抗体 免疫沉淀 酪氨酸磷酸化 制备 鉴定

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抗人gp130分子单克隆抗体的制备和鉴定 被引量：1

16

作者 黎燕 李小军 +5 位作者 贺永怀 赖春宁 倪长源 胡美茹 董家新 沈倍奋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期74-77,共4页

目的 gp130(亦称CD130)可与许多细胞因子受体(IL 6R,IL 11R,OSMR,LIFR,CNTFR和CT 1R)组成受体复合物,并在这类细胞因子的信号转导中起着重要的作用。方法以痘苗病毒为载体构建获得的可溶性CD130(sCD130)为免疫原 ,通过细胞融合的方法 ,... 目的 gp130(亦称CD130)可与许多细胞因子受体(IL 6R,IL 11R,OSMR,LIFR,CNTFR和CT 1R)组成受体复合物,并在这类细胞因子的信号转导中起着重要的作用。方法以痘苗病毒为载体构建获得的可溶性CD130(sCD130)为免疫原 ,通过细胞融合的方法 ,得到4株稳定分泌抗CD130单克隆抗体(mAb) (L2,L4a,L4b和L5)的杂交瘤细胞株。结果本组mAb对靶细胞具有识别特异性 ,不但可识别相对分子质量 (Mr)为98000的sCD130分子,也可识别Mr为130000的膜表达型CD130分子(mCD130)。另外 ,mAb还可与CD130分子形成免疫复合物 ,用于免疫沉淀CD130分子 ,但这组抗体中仅mAbL2可部分组断IL 6对靶细胞的增殖作用。结论成功地研制了抗人gp130分子mAb。 展开更多

关键词 CD130分子 单克隆抗体 制备 鉴定

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免疫毒素的纯化 被引量：1

17

作者 贺永怀 陈兴 +2 位作者 汲言山 赵薇薇 沈倍奋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1990年第6期467-469,共3页

本文采用Ultrogel AcA 34凝胶柱纯化单克隆抗体和蓖麻毒素的结合物。结合物与游离毒素的分离较Sephadex G150柱好。继而利用蓖麻毒素B链能与半乳糖基结合的特性,用酸化Sepharose 4B柱进一步纯化结合物;达到完全除去游离抗体,使免疫毒素... 本文采用Ultrogel AcA 34凝胶柱纯化单克隆抗体和蓖麻毒素的结合物。结合物与游离毒素的分离较Sephadex G150柱好。继而利用蓖麻毒素B链能与半乳糖基结合的特性,用酸化Sepharose 4B柱进一步纯化结合物;达到完全除去游离抗体,使免疫毒素对靶细胞的特异性毒性提高20倍。 展开更多

关键词 免疫毒素 纯化 单克隆抗体

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CTLA4Ig融合蛋白在CHO细胞中的表达 被引量：1

18

作者 陈兴 于继云 +8 位作者 沈倍奋 黎燕 王嘉玺 程绍辉 贺永怀 曲梅花 胡美茹 孙瑛勋 于鸣 《生物技术通讯》 CAS 2004年第4期357-358,共2页

CTLA4Ig是人CTLA4胞外区与人免疫球蛋白铰链区、CH2区、CH3区组成的融合蛋白,可以与B7结合,通过阻断B7与CD28的结合,从而阻断B7介导的T细胞活化必需的共刺激信号,可作为免疫抑制剂用于器官移植。将CTLA4Ig融合分子克隆到真核表达载体pCI... CTLA4Ig是人CTLA4胞外区与人免疫球蛋白铰链区、CH2区、CH3区组成的融合蛋白,可以与B7结合,通过阻断B7与CD28的结合,从而阻断B7介导的T细胞活化必需的共刺激信号,可作为免疫抑制剂用于器官移植。将CTLA4Ig融合分子克隆到真核表达载体pCI-dhfr,并用脂质体方法转染到COS7和CHO-dhfr-细胞中,用氨甲喋呤筛选转染的CHO-dhfr-细胞。用RT-PCR、ELISA、细胞免疫荧光染色和Western-blot鉴定重组蛋白的表达。采用A蛋白纯化重组蛋白。 展开更多

关键词 CTLA4Ig融合蛋白 CHO细胞 表达 免疫抑制剂

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免疫毒素清除人骨髓中克隆化白血病细胞的研究 被引量：1

19

作者 沈倍奋 方美玉 +1 位作者 贺永怀 陈兴 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1989年第2期91-94,共4页

识别普通型急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)的单克隆抗体共价连接到完整的蓖麻毒素上,间接免疫荧光显示此免疫毒素(79:Ricin)能与Nalm-1靶细胞结合。克隆化试验表明:半乳糖存在时,10^(-9)～10^(-3)M 79:Ricin能杀死99.9％ Nalm-1细胞。... 识别普通型急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)的单克隆抗体共价连接到完整的蓖麻毒素上,间接免疫荧光显示此免疫毒素(79:Ricin)能与Nalm-1靶细胞结合。克隆化试验表明:半乳糖存在时,10^(-9)～10^(-3)M 79:Ricin能杀死99.9％ Nalm-1细胞。正常骨髓细胞的存在并不影响它清除靶细胞的效果。79:Ricin免疫毒素对骨髓造血干细胞毒性不很大。 展开更多

关键词 免疫 毒素 骨髓 白血病

原文传递

免疫毒素用于自体骨髓移植治疗白血病的实验研究及初步临床 被引量：1

20

作者 沈倍奋 黎燕 +7 位作者 贺永怀 陈兴 汲言山 赵薇薇 王文香 杨科 藤爱萍 梅巍 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1991年第4期6-10,共5页

目前自体骨髓移植被越来越多地用于白血病治疗,然而在缓解期从病人抽取的骨髓细胞可能含有残留的肿瘤细胞,当大剂量放、化疗后回输给病人,将来有可能引起白血病复发。现在有很多方法可以用来去除这些瘤细胞,免疫毒素是安全有效的方法之... 目前自体骨髓移植被越来越多地用于白血病治疗,然而在缓解期从病人抽取的骨髓细胞可能含有残留的肿瘤细胞,当大剂量放、化疗后回输给病人,将来有可能引起白血病复发。现在有很多方法可以用来去除这些瘤细胞,免疫毒素是安全有效的方法之一。本文报道了由抗CD2、CD5和CD8单抗与蓖麻毒素组成的抗T免疫毒素,抗CD9、CD10单抗与蓖麻毒素组成的抗C-ALL免疫毒素在体外对靶细胞的特异性细胞毒作用,及用于临床净化骨髓的初步结果。 展开更多

关键词 自体骨髓移植 免疫毒素 白血病

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