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人参皂苷Rg1抗同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的作用及相关机制研究 被引量：13
1
作者 贺国洋 李永真 +3 位作者 李新强 朱慧芳 韩芳毅 千新来 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1376-1378,共3页
目的探讨人参皂苷Rg1抗同型半胱氨酸(Hcy)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的作用及相关机制。方法体外培养HUVECs细胞,采用琼脂糖凝胶电泳和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况,逆转录-聚合酶... 目的探讨人参皂苷Rg1抗同型半胱氨酸(Hcy)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的作用及相关机制。方法体外培养HUVECs细胞,采用琼脂糖凝胶电泳和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting分析各组内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA和蛋白质的表达。结果琼脂糖凝胶电泳显示:与对照组和Rg1组比较,Hcy组可见特征性DNA的"梯状"条带。TUNEL染色显示:与对照组和Rg1组比较Hcy组细胞凋亡率增加差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR显示:与对照组和Rg1组相比,Hcy组eNOS mRNA水平表达降低差异有统计学意义(P<0.01);与Hcy组相比,Hcy+Rg1组eNOS mRNA水平表达增加差异有统计学意义(P<0.01),但仍低于对照组和Rg1组,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blotting显示:与对照组和Rg1组相比,Hcy组eNOS蛋白水平表达降低差异有统计学意义(P<0.01);与Hcy组相比,Hcy+Rg1组eNOS蛋白水平表达增加差异有统计学意义(P<0.01),但仍低于对照组和Rg1组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论人参皂苷Rg1能够抑制Hcy诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,此作用可能与上调血管内皮细胞eNOS水平有关。 展开更多
关键词 人参皂苷 细胞凋亡 同型半胱氨酸 内皮型一氧化氮合酶
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miR-7-5p和miR-152-3p联合调控Wnt/β-catenin通路对乳腺癌细胞上皮-间质转化及化疗耐药的影响 被引量：10
2
作者 李娜 张哲莹 +5 位作者 朱会芳 贺国洋 韩正华 原志庆 王凡平 王明永 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期765-770,共6页
目的探讨miR-7-5p和miR-152-3p协同抑制乳腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)进程及紫杉醇耐药的分子机制。方法采用生物信息学软件预测miR-7-5p和miR-152-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因检测两者与TCF4的... 目的探讨miR-7-5p和miR-152-3p协同抑制乳腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)进程及紫杉醇耐药的分子机制。方法采用生物信息学软件预测miR-7-5p和miR-152-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因检测两者与TCF4的靶向关系;Western blot法检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路关键调控因子β-catenin及TCF4蛋白的表达;在转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics基础上给予Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl处理后,Western blot法检测MCF-7/TAX细胞中β-catenin、TCF4和EMT相关蛋白(E-cadherin、vimentin)的表达,Transwell小室实验检测MCF-7/TAX细胞侵袭和迁移能力;MTT实验检测激活Wnt/β-catenin信号通路对MCF-7/TAX细胞紫杉醇耐药性的影响。结果TCF43′UTR区域存在能够与miR-7-5p及miR-152-3p互补的结合位点;转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics后可使TCF4野生型(TCF4-WT)报告基因载体的荧光素酶活性较NC组明显降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与NC组相比,转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics后各组紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞中β-catenin和TCF4蛋白的表达水平明显降低(P<0.05),且两者共同转染后MCF-7/TAX细胞中β-catenin和TCF4蛋白的表达水平较miR-7-5p组或miR-152-3p组进一步降低(P<0.05)。Western blot结果显示,LiCl处理后MCF-7/TAX细胞中β-catenin、TCF4和vimentin蛋白表达水平明显升高,而E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。Transwell小室结果显示,LiCl处理后MCF-7/TAX细胞侵袭和迁移能力明显增强(P<0.05)。MTT结果显示,不同浓度紫杉醇作用下,miR-7-5p+LiCl组细胞增殖活力较miR-7-5p组明显升高;同时miR-152-3p+LiCl组和miR-7-5p/152-3p+LiCl组细胞的增殖活力较NC组均明显升高(P<0.05)。结论TCF4是miR-7-5p和miR-152-3p的共同靶标。miR-7-5p和miR-152-3p可共同抑制MCF-7/TAX细胞中Wnt/β-catenin信号通路的活化。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 WNT/Β-CATENIN信号通路 miR-7-5p miR-152-3p 上皮-间质转化 耐药性
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蛋白激酶C活性变化影响内皮-单核细胞黏附 被引量：8
3
作者 王中群 李丽华 +6 位作者 赵卫星 赵琪 冶亚平 杨晓煜 崔静 张景航 贺国洋 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2008年第7期529-532,共4页
目的探讨蛋白激酶C(PKC)激动剂佛波酯(PMA)和抑制剂钙磷酸结合蛋白(Calphostin C)对荷脂ECV304内皮细胞黏附能力影响的机制。方法采用体外培养和直接计数法观察内皮细胞黏附能力变化;PepTag Non-Radioactive Assay法定性定量细胞膜上PK... 目的探讨蛋白激酶C(PKC)激动剂佛波酯(PMA)和抑制剂钙磷酸结合蛋白(Calphostin C)对荷脂ECV304内皮细胞黏附能力影响的机制。方法采用体外培养和直接计数法观察内皮细胞黏附能力变化;PepTag Non-Radioactive Assay法定性定量细胞膜上PKC活性状态;RT-PCR和Western blot检测黏附相关指标细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、I-κBα和ezrin表达的变化。结果100nmol/L PMA在激活细胞膜PKC活性的同时,可以与氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)协同增强ICAM-1和ezrin表达,但下调I-κBα的表达,并使内皮-单核细胞的黏附能力增强;300nmol/L Calphostin C基本上可以逆转50μg/ml ox-LDL诱导的酶活化和对ICAM-1、I-κBα和ezrin表达的调节,即PKC活性减弱,ICAM-1和ezrin表达下调,I-κBα表达上调,内皮细胞黏附能力明显降低。结论PMA、Calphostin C→PKC→NF-κB/I-κB→ICAM-1→Adhesion可能是黏附信息传递整合的一条重要途径,而黏附分子→ezrin→细胞骨架途径则可能起到加强内皮-单核细胞间黏附能力的作用。 展开更多
关键词 蛋白激酶C 细胞黏附分子 单核细胞 内皮细胞 动脉硬化
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铁调素与地中海贫血研究进展 被引量：7
4
作者 任峰 肖莉 +2 位作者 李健 张会敏 贺国洋 《新乡医学院学报》 CAS 2016年第4期329-331,共3页
铁调素是维持机体铁代谢平衡的关键物质,通过调节机体血液和肝脏等储铁脏器的铁负荷程度,协调体内铁稳态。地中海贫血是一种危害严重的单基因遗传病,我国发病地区主要集中在广东、广西。地中海贫血患者常因并发严重的铁超载导致脏器损... 铁调素是维持机体铁代谢平衡的关键物质,通过调节机体血液和肝脏等储铁脏器的铁负荷程度,协调体内铁稳态。地中海贫血是一种危害严重的单基因遗传病,我国发病地区主要集中在广东、广西。地中海贫血患者常因并发严重的铁超载导致脏器损伤甚至死亡。本文就铁调素的表达与调控及其治疗地中海贫血患者铁超载的前景进行综述,为地中海贫血铁超载的治疗提供崭新的视角。 展开更多
关键词 铁调素 地中海贫血 铁超载
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沉默缺氧诱导因子-2α对乳腺癌细胞化疗敏感性的影响 被引量：7
5
作者 李娜 贺国洋 +1 位作者 李永真 王志慧 《临床与实验病理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期501-504,共4页
目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2α,HIF-2α)siRNA对人乳腺癌细胞增殖及化疗药物敏感性的影响。方法 RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中HIF-2α的表达;采用免疫细胞化学和RT-PCR法检测转染后HIF-2α基因的表达,Co C_l2... 目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2α,HIF-2α)siRNA对人乳腺癌细胞增殖及化疗药物敏感性的影响。方法 RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中HIF-2α的表达;采用免疫细胞化学和RT-PCR法检测转染后HIF-2α基因的表达,Co C_l2模拟缺氧条件下,采用MTT比色法和流式细胞术检测不同剂量的化疗药物(5-氟尿嘧啶、阿霉素和紫杉醇)在HIF-2α沉默后对细胞生长抑制率和细胞凋亡的影响。结果经HIF-2αsiRNA处理的MCF-7细胞中HIF-2α基因表达明显下调(P<0.05),HIF-2αsiRNA处理的MCF-7细胞在不同剂量化疗药物作用后,细胞生长抑制率和细胞凋亡率与对照组相比其明显增加,化疗药物敏感性明显增强(P<0.05)。结论 HIF-2αsiRNA具有促进化疗药物诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡、抑制增殖及增强化疗药物敏感性的作用,沉默HIF-2α有望成为乳腺癌基因治疗的新途径。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 缺氧诱导因子-2Α RNA干扰 化疗敏感性
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以学生为中心的教学理念在病理教学中的应用 被引量：6
6
作者 李永真 贺国洋 +1 位作者 崔静 千新来 《科技创新导报》 2016年第4期103-103,105,共2页
病理学是一门极其重要的医学桥梁学科,教师在教学中应抓住病理学的课程特点,采用理论课、实验课、临床病例讨论等多种授课形式,贯穿以学生为中心的教学理念,采取动态思维方法,并注意动静结合认识病变,激发学生的学习兴趣和自主性,为进... 病理学是一门极其重要的医学桥梁学科,教师在教学中应抓住病理学的课程特点,采用理论课、实验课、临床病例讨论等多种授课形式,贯穿以学生为中心的教学理念,采取动态思维方法,并注意动静结合认识病变,激发学生的学习兴趣和自主性,为进入临床打下坚实的基础。同时引导学生利用网络技术,查阅相关知识及新进展,培养学生自主学习的能力。 展开更多
关键词 病理学 教学内容 教学理念 网络资源
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缺血后处理对缺血-再灌注肝脏的抗损伤作用研究 被引量：4
7
作者 武步强 褚薇薇 +2 位作者 贺国洋 李健 王殿华 《昆明医学院学报》 2005年第3期64-67,共4页
目的:探讨缺血后处理(ischemic postconditioning,I-post)对缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)大鼠肝脏的抗损伤作用.方法:建立SD大鼠肝部分I/R损伤模型;实验分为6组:假手术组、单纯缺血组、I/R组I、-post 1组、I-post 2组和I-pos... 目的:探讨缺血后处理(ischemic postconditioning,I-post)对缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)大鼠肝脏的抗损伤作用.方法:建立SD大鼠肝部分I/R损伤模型;实验分为6组:假手术组、单纯缺血组、I/R组I、-post 1组、I-post 2组和I-post 3组;测定血清ALT、AST的活性和肝组织MDA、GSH含量以及SOD、GSH-PX、MPO的活性;观察肝脏病理组织形态学变化和I-post后大鼠的存活率.结果:与I/R组相比,I-post 1组和I-post 2组大鼠血清ALT和AST活性明显降低(P<0.05),I-post 2组更明显;I-post 2组肝组织MDA、MPO显著降低,而SOD、GSH-PX和GSH则明显增加(P<0.05);I-post 2组大鼠存活率高于I/R组.结论:缺血后处理对缺血-再灌注大鼠肝脏有明显的抗损伤作用,其可能与降低活性氧的产生、保护肝脏抗氧化系统和减轻中性粒细胞聚集程度有关. 展开更多
关键词 肝脏 缺血-再灌注 缺血后处理 抗氧化酶 中性粒细胞
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用药干预对普外科围术期抗菌药物应用的影响 被引量：5
8
作者 何思森 李桢 贺国洋 《中国医药导报》 CAS 2010年第19期194-195,共2页
目的:观察用药干预对普外科围术期抗菌药物应用的影响。方法:采用回顾性调查方法随机抽取河南省某三级甲等医院普通外科2007年(对照组)和2009年(干预组)出院的部分手术病例,观察其围术期用药况,评价药物应用合理性。结果:干预组第一、... 目的:观察用药干预对普外科围术期抗菌药物应用的影响。方法:采用回顾性调查方法随机抽取河南省某三级甲等医院普通外科2007年(对照组)和2009年(干预组)出院的部分手术病例,观察其围术期用药况,评价药物应用合理性。结果:干预组第一、二代头孢菌素的使用率较对照组显著增高,第三、四代头孢菌素和喹诺酮类的使用率显著降低,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);干预组手术期抗菌药物的使用率显著高于对照组(P<0.05),手术前期抗菌药物使用率及三联以上抗菌药物的使用率显著低于对照组(P<0.05);干预组抗菌药物的使用天数显著低于对照组(P<0.05)。结论:用药干预可显著提高本资料来源医院普通外科围术期预防性应用抗菌药物的合理性,干预后药物应用基本合理。 展开更多
关键词 用药干预 抗菌药物 围术期
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FEZ1基因在甲状腺乳头状癌中的表达及其意义 被引量：5
9
作者 原志庆 陈晓磊 +4 位作者 李娜 贺国洋 王霞 杨慧林 郑丽丽 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期437-440,共4页
目的:探讨肿瘤抑制基因FEZ1在甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid cancer,PTC)中的表达及其与PTC临床病理特征之间的关系。方法:采用原位杂交(Insitu hybridizationI,SH)技术和免疫组织化学(Immunohistoc hemistryI,HC)检测30例正常甲状... 目的:探讨肿瘤抑制基因FEZ1在甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid cancer,PTC)中的表达及其与PTC临床病理特征之间的关系。方法:采用原位杂交(Insitu hybridizationI,SH)技术和免疫组织化学(Immunohistoc hemistryI,HC)检测30例正常甲状腺组织、30例PTC组织和30例PTC组织中FEZ1 mRNA和蛋白的表达情况,并分析其与PTC临床病理参数的关系。结果:FEZ1 mRNA和蛋白在正常甲状腺组织中的阳性表达率均显著高于甲状腺腺瘤(P均<0.05)和PTC组织(P均<0.05);FEZ1 mRNA和蛋白在Ⅰ、Ⅱ期PTC组织中的阳性表达率均显著高于Ⅲ、Ⅳ期PTC组织中的阳性表达率(P均<0.05);无淋巴结转移组中的FEZ1 mRNA和蛋白阳性表达率亦均显著高于伴淋巴结转移组(P均<0.05)。PTC中FEZ1 mRNA和蛋白的表达呈正相关关系(P<0.05)。结论:FEZ1基因的表达缺失或下调与PTC的发生与演进存在密切关系。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 FEZ1 免疫组织化学 原位杂交 甲状腺腺瘤
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当归多糖对肝细胞Hepcidin表达的影响 被引量：5
10
作者 任峰 李健 +2 位作者 贺国洋 贾昭华 千新来 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第19期4749-4751,共3页
目的探讨当归多糖(ASP)对人肝癌细胞Hep G2和人正常肝细胞L-02 Hepcidin表达的抑制作用。方法体外培养Hep G2和L-02细胞,RT-PCR检测不同浓度(0、100、200、400 mg/L)的ASP诱导不同时间(0、24、48、72 h和96 h)对两种细胞Hepcidin mRNA... 目的探讨当归多糖(ASP)对人肝癌细胞Hep G2和人正常肝细胞L-02 Hepcidin表达的抑制作用。方法体外培养Hep G2和L-02细胞,RT-PCR检测不同浓度(0、100、200、400 mg/L)的ASP诱导不同时间(0、24、48、72 h和96 h)对两种细胞Hepcidin mRNA影响。Western印迹观察400 mg/L ASP诱导96 h对两种细胞Hepcidin表达的抑制作用。结果与对照组(0 mg/L)相比,浓度高于200 mg/L ASP能够显著下调Hep G2和L-02细胞Hepcidin mRNA表达(P<0. 001); 400 mg/L ASP连续作用48 h后对Hep G2和L-02细胞产生显著的Hepcidin抑制效应且抑制强度呈时间相关性; 400 mg/L ASP连续作用96 h后显著抑制Hep G2和L-02细胞Hepcidin表达(P<0. 001)。结论 ASP可以抑制Hep G2和L-02细胞中Hepcidin的表达。 展开更多
关键词 当归多糖 HEPCIDIN 人肝癌细胞HEPG2 人正常肝细胞L-02
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HPV16 DNA阳性乳腺良、恶性病变组织中E6和E7蛋白的表达 被引量：4
11
作者 千新来 赵杰 +10 位作者 张钢 张洁 常海敏 李新强 贺国洋 冶亚平 朱慧芳 韩芳毅 杨慧林 王霞 原志庆 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第4期717-719,共3页
目的:研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)DNA阳性乳腺良、恶性病变组织中E6和E7蛋白的表达情况。方法:以经PCR筛选证实的HPV16DNA阳性的56例乳癌和41例乳腺良性病变组织为研究对象,采用Westernblotting方法检测HPV16E6和E7蛋白。结果:56例HPV1... 目的:研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)DNA阳性乳腺良、恶性病变组织中E6和E7蛋白的表达情况。方法:以经PCR筛选证实的HPV16DNA阳性的56例乳癌和41例乳腺良性病变组织为研究对象,采用Westernblotting方法检测HPV16E6和E7蛋白。结果:56例HPV16DNA阳性乳癌组织中,HPV16E6、E7和E6/E7共表达阳性率分别为67.9%(38/56)、75.0%(42/56)和57.1%(32/56);41例HPV16DNA阳性乳腺良性病变组织中,HPV16E6、E7和E6/E7共表达阳性率分别为36.6%(15/41)、43.9%(18/41)和24.4%(10/41)。HPV16DNA阳性乳癌组织中E6、E7和E6/E7共表达阳性率均高于乳腺良性病变组织(χ2分别为9.34,9.70,10.34,P均<0.01)。HPV16DNA阳性乳癌组织中E6、E7和E6/E7共表达阳性率与患者年龄和肿瘤组织学类型无关(P均>0.05),但与淋巴结转移有关(χ2分别为3.88,15.86,9.34,P均<0.05)。结论:HPV16E6和E7蛋白在乳癌发生发展中具有重要作用,并与乳癌淋巴结转移有关。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16型 早期基因6 早期基因7 乳癌 淋巴结转移
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人参皂苷Rg1对血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响 被引量：3
12
作者 贺国洋 李巍 +1 位作者 焦红丽 千新来 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期2581-2582,2585,共3页
目的探讨人参皂苷Rg1对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的逆转作用。方法体外培养HUVECs,采用台盼蓝染色方法筛选人参皂苷Rg1最适浓度,采用琼脂糖凝胶电泳和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)... 目的探讨人参皂苷Rg1对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的逆转作用。方法体外培养HUVECs,采用台盼蓝染色方法筛选人参皂苷Rg1最适浓度,采用琼脂糖凝胶电泳和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况。结果台盼蓝染色显示人参皂苷Rg1的最适浓度为40μg/mL。琼脂糖凝胶电泳显示,对照组和Rg1组未见凋亡条带,AngⅡ组可见清楚的细胞凋亡的"梯状"条带,而AngⅡ+Rg1组可见不明显的细胞凋亡的"梯状"DNA断裂条带。TUNEL染色显示,与对照组和Rg1组相比,AngⅡ组细胞凋亡数量增加,差异有统计学意义(P<0.01);与AngⅡ组相比,AngⅡ+Rg1组细胞凋亡数量减少,差异有统计学意义(P<0.01),凋亡百分比由38.667%下降到10.667%,但仍高于对照组和Rg1组(P<0.01)。结论 40μg/mL人参皂苷Rg1可一定程度逆转AngⅡ诱导的HUVECs凋亡。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 血管紧张素Ⅱ 人脐静脉内皮细胞 凋亡
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临床医学研究生教育现状及改革的几点建议 被引量：4
13
作者 贺国洋 李巍 《科技信息》 2009年第29期I0165-I0165,I0391,共2页
随着研究生教育规模的扩大,临床医学研究生培养单位在培养过程中遇到一系列问题,文章对主要问题进行了归纳,并针对这些问题提出了几点改革建议,以求解决。
关键词 临床医学研究生 教育 改革
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Muc2和DCN基因敲除小鼠食子现象的初步研究 被引量：4
14
作者 李巍 贺国洋 《中国比较医学杂志》 CAS 2013年第4期28-30,共3页
目的探讨Muc2和DCN基因敲除小鼠繁殖能力和食子现象的异同。方法分别将Muc2和DCN基因敲除纯合子雌雄小鼠按1∶1或1∶2的合笼,观察1～3胎产仔量、胎次间隔时间、出生存活率和食子现象。结果Muc2基因敲除小鼠平均产子量5.80±0.95只,... 目的探讨Muc2和DCN基因敲除小鼠繁殖能力和食子现象的异同。方法分别将Muc2和DCN基因敲除纯合子雌雄小鼠按1∶1或1∶2的合笼,观察1～3胎产仔量、胎次间隔时间、出生存活率和食子现象。结果Muc2基因敲除小鼠平均产子量5.80±0.95只,平均胎次间隔时间(42.29±2.28)d;DCN基因敲除小鼠平均产子量3.85±0.76只,平均胎次间隔时间(24.86±10.42)d。Muc2和DCN基因敲除小鼠在产仔量、胎次间隔时间、出生存活率和食子率差异均存在显著性。结论两组基因敲除小鼠繁殖性能有差异,揭示可能与Muc2和DCN基因有关。 展开更多
关键词 MUC2 DCN基因敲除 食子现象
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乳腺良、恶性病变组织中人乳头瘤病毒检测和分型 被引量：4
15
作者 千新来 崔静 +11 位作者 冶亚平 张洁 张钢 常海敏 李新强 贺国洋 赵杰 朱慧芳 韩芳毅 杨慧林 王霞 原志庆 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第4期713-717,共5页
目的:研究乳腺良、恶性病变组织中人乳头瘤病毒(HPVs)感染情况。方法:收集新鲜乳癌组织标本73例和乳腺良性病变组织标本84例,采用PCR方法对乳腺良、恶性病变组织中HPVs进行检测和分型。结果:73例乳癌组织中,HPV16阳性率为76.7%(56/73),... 目的:研究乳腺良、恶性病变组织中人乳头瘤病毒(HPVs)感染情况。方法:收集新鲜乳癌组织标本73例和乳腺良性病变组织标本84例,采用PCR方法对乳腺良、恶性病变组织中HPVs进行检测和分型。结果:73例乳癌组织中,HPV16阳性率为76.7%(56/73),高危型HPVs(HPV16和59)总阳性率76.7%(56/73);其中HPV16单独感染20例,HPV16、59混合感染6例,HPV16、6/11混和感染28例,3者混和感染2例。84例乳腺良性病变组织中,HPV16阳性率为48.8%(41/84),高危型HPVs总阳性率为51.2%(43/84);其中HPV16单独感染15例,HPV59单独感染2例,HPV6/11单独感染2例,HPV16、6/11混和感染24例,3者混和感染2例。乳腺良、恶性病变组织中均未检测到HPV18、31、33、52和58。乳癌组织中HPV16阳性率和高危型HPVs总阳性率高于乳腺良性病变(χ2分别为12.879,10.921,P<0.01)。浸润性导管癌组织中HPV16阳性率为86.0%(43/50),高于浸润性小叶癌组织中的56.6%(13/23)(χ2=7.663,P<0.01)。结论:HPV16在乳癌发生发展中可能具有重要作用,与乳癌组织学类型有关;其与其他HPVs亚型的混合感染值得重视。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 乳癌 乳腺良性病变
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Calphostin C对乳腺癌细胞增殖的抑制作用及相关机制 被引量：3
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作者 千新来 崔静 +9 位作者 任峰 赵杰 冶亚平 贺国洋 李新强 朱慧芳 韩芳毅 杨慧林 王霞 原志庆 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期582-586,共5页
目的研究Calphostin C对乳腺癌细胞MDA-MB-435S增殖的影响及初步机制。方法通过观察Calphostin C处理MDA-MB-435S细胞前后细胞的生长速度、倍增时间、克隆形成率和细胞周期分布等变化,探讨Calphostin C对MDA-MB-435S细胞增殖的影响;通过... 目的研究Calphostin C对乳腺癌细胞MDA-MB-435S增殖的影响及初步机制。方法通过观察Calphostin C处理MDA-MB-435S细胞前后细胞的生长速度、倍增时间、克隆形成率和细胞周期分布等变化,探讨Calphostin C对MDA-MB-435S细胞增殖的影响;通过Western blotting、免疫细胞化学染色和RT-PCR等方法探讨Calphostin C影响MDA-MB-435S细胞增殖的初步机制。结果与MDA-MB-435S亲本细胞(对照组)相比,Calphostin C处理的MDA-MB-435S细胞(实验组)生长速度明显减慢,倍增时间明显延长(P<0.01),并且呈现浓度和时间依赖性;对照组和实验组细胞克隆形成率分别为(82.33±6.81)%和(22.00±1.73)%,差异有统计学意义(P<0.01);实验组细胞周期出现明显的G1期阻滞(P<0.01)。Western blotting和免疫细胞化学染色结果显示,与对照组细胞相比,实验组细胞中蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)表达没有明显变化,但活性状态(胞质转位至胞膜)的PKCα显著减少。West-ern blotting和RT-PCR结果显示,与对照组细胞相比,实验组细胞中p53、Cyclin A和Cyclin B表达没有明显变化,但p21表达上调,Cyclin E表达下调。结论Calphostin C可显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-435S的增殖,该作用可能与其抑制PKCα活性、上调p21表达和下调Cyclin E表达有关。 展开更多
关键词 钙磷酸蛋白C 蛋白激酶C 乳腺癌 增殖
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血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响 被引量：3
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作者 贺国洋 李巍 +2 位作者 冶亚平 朱慧芳 韩芳毅 《新乡医学院学报》 CAS 2009年第3期257-259,共3页
目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响。方法体外培养HUVECs,取对数生长期HUVECs细胞接种96孔培养板中,常规培养细胞24 h后,弃掉旧培养基,加入新Ham′s F12k培养基,并分别加入AngⅡ,使其终浓度分别为0μmol... 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响。方法体外培养HUVECs,取对数生长期HUVECs细胞接种96孔培养板中,常规培养细胞24 h后,弃掉旧培养基,加入新Ham′s F12k培养基,并分别加入AngⅡ,使其终浓度分别为0μmol.L-1、0.01μmol.L-1、0.1μmol.L-1、1μmol.L-1和10μmol.L-1,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测不同浓度AngⅡ在不同时间点的细胞活性,琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果MTT结果:与对照组相比,1μmol.L-1AngⅡ组作用24 h和10μmol.L-1AngⅡ组作用12 h、18 h和24 h的HUVECs的细胞活性均显著下降(P<0.05或P<0.01),并呈现时间依赖性;其余各组差异均无统计学意义(P>0.05)。琼脂糖凝胶电泳结果:10μmol.L-1AngⅡ组作用18 h的HUVECs呈现明显的"梯状"DNA断裂条带。流式细胞术结果:对照组和10μmol.L-1AngⅡ组作用18 h的HUVECs细胞凋亡率分别为(1.11±0.54)%和(19.87±3.18)%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论10μmol.L-1AngⅡ可通过诱导细胞凋亡引起HUVECs损伤,从而可能在动脉粥样硬化发生发展中发挥作用。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ 人脐静脉内皮细胞 凋亡
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长非编码RNA HOXA10-AS促进肝癌细胞侵袭和迁移 被引量：3
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作者 朱会芳 张哲莹 +3 位作者 贺国洋 李娜 钟加滕 王海军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1438-1445,共8页
研究表明,长非编码RNA HOXA10-AS发挥促癌基因的作用,调控肿瘤细胞的侵袭和迁移。然而,关于其在肝癌细胞侵袭和迁移中的作用及机制尚不明确。本研究旨在分析HOXA10-AS在肝细胞癌中的表达及其临床意义,研究HOXA10-AS对肝癌细胞侵袭和迁... 研究表明,长非编码RNA HOXA10-AS发挥促癌基因的作用,调控肿瘤细胞的侵袭和迁移。然而,关于其在肝癌细胞侵袭和迁移中的作用及机制尚不明确。本研究旨在分析HOXA10-AS在肝细胞癌中的表达及其临床意义,研究HOXA10-AS对肝癌细胞侵袭和迁移作用的影响,并探讨HOXA10-AS促进肝癌细胞侵袭和迁移的作用机制。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测证明,HOXA10-AS在肝细胞癌组织中的表达明显高于人正常对照肝组织,且与病人的性别、年龄无关,而与肿瘤的大小、淋巴结转移及远端转移有关(P<0.05);同时HOXA10-AS在肝癌细胞株中的表达均高于正常肝细胞株。在肝癌细胞株HepG2和QGY7701中干扰HOXA10-AS后,Transwell侵袭和划痕结果显示,与对照组细胞相比,干扰HOXA10-AS组的细胞的侵袭和迁移能力明显降低(P<0.001);Western印迹结果显示,间质标志物波形蛋白(vimentin)(P<0.01)及N-钙黏着蛋白(N-cadherin)(P<0.05)的表达水平相对于对照组细胞明显降低,而上皮标志物E-钙黏着蛋白(E-cadherin)的表达水平明显增加(P<0.05);且干扰HOXA10-AS后,肝癌细胞中TGFβ1/Smads信号通路受到抑制。综上所述,HOXA10-AS参与了TGFβ1/Smads信号通路促进的上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT),进而促进肝癌细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 肝细胞癌 长非编码RNA HOXA10-AS 侵袭 迁移
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PPAPDC1A在体内外对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响 被引量：2
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作者 李娜 王志慧 +2 位作者 贺国洋 朱会芳 千新来 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第18期3289-3294,共6页
目的:通过构建稳定过表达和干扰PPAPDC1A的乳腺癌细胞株,探讨PPAPDC1A对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响。方法:利用CCK-8和Transwell实验检测PPAPDC1A稳定过表达和干扰后对乳腺癌细胞体外增殖和侵袭能力的影响。采用裸鼠皮下成... 目的:通过构建稳定过表达和干扰PPAPDC1A的乳腺癌细胞株,探讨PPAPDC1A对乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响。方法:利用CCK-8和Transwell实验检测PPAPDC1A稳定过表达和干扰后对乳腺癌细胞体外增殖和侵袭能力的影响。采用裸鼠皮下成瘤实验检测PPAPDC1A对乳腺癌细胞体内增殖和裸鼠致瘤性的作用。利用免疫组织化学染色法检测各组肿瘤组织中Ki-67的表达。通过裸鼠尾静脉注射实验检测PPAPDC1A对乳腺癌MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞体内转移能力的影响。结果:成功建立稳定过表达PPAPDC1A的乳腺癌MCF-7细胞株和稳定干扰PPAPDC1A的乳腺癌MDA-MB-231细胞株;CCK-8和Transwell实验结果显示,与MCF-7和MCF-7-Vector细胞株相比,MCF-7-PPAPDC1A细胞株的生长速度显著增快,穿膜细胞数量多(P<0.05);与此相反,MDA-MB-231-shPPAPDC1A组细胞的生长速度和穿膜细胞数明显少于MDA-MB-231-shNC和MDA-MB-231细胞株(P<0.05)。动物实验结果显示,与MCF-7-Vector组相比,MCF-7-PPAPDC1A组的肿瘤生长速度较快,肿瘤的体积较大,Ki-67的阳性率高,肺转移灶的数目增多(P<0.05);与此相反,与MDA-MB-231-shNC组相比MDA-MB-231-shPPAPDC1A组的肿瘤生长速度较慢,肿瘤的体积较小,Ki-67的阳性率低,肺转移灶的数目减少(P<0.05)。结论:PPAPDC1A对乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移有促进作用。 展开更多
关键词 PPAPDC1A 乳腺癌 增殖 侵袭 转移
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HPV16 E7蛋白阳性和阴性乳癌组织中P16蛋白与p16基因启动子区甲基化检测 被引量：3
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作者 李新娟 崔静 +11 位作者 朱慧芳 韩芳毅 杨慧林 王霞 冶亚平 李新强 马帅 张洁 贺国洋 赵杰 常海敏 千新来 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第4期729-731,共3页
目的:研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7蛋白阳性(E7+)和阴性(E7-)乳癌组织中P16蛋白表达与p16基因启动子区甲基化状态的关系,以揭示HPV16E7+乳癌组织中P16蛋白高表达的可能机制。方法:以经PCR筛选证实的HPV16DNA阳性的56例乳癌组织(经West... 目的:研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7蛋白阳性(E7+)和阴性(E7-)乳癌组织中P16蛋白表达与p16基因启动子区甲基化状态的关系,以揭示HPV16E7+乳癌组织中P16蛋白高表达的可能机制。方法:以经PCR筛选证实的HPV16DNA阳性的56例乳癌组织(经Westernblotting证实其中42例HPV16E7+,14例E7-)为研究对象。采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测癌组织中p16基因启动子区甲基化状态;采用Westernblotting方法测定P16蛋白。结果:42例HPV16E7+乳癌组织中,p16基因启动子区甲基化率为11.9%(5/42),P16蛋白阳性率85.7%(36/42),2者表达密切相关(rp=0.912,P<0.001)。14例HPV16E7-乳癌组织中,p16基因启动子区甲基化率为78.0%(11/14),P16蛋白阳性率21.4%(3/14),2者表达有较密切的关系(rp=0.779,P=0.043)。HPV16E7+乳癌组织中p16基因启动子区甲基化率低于HPV16E7-乳癌组织(χ2=17.405,P<0.01),P16蛋白阳性率高于HPV16E7-乳癌组织(χ2=20.525,P<0.01)。结论:HPV16E7蛋白可能通过降低p16基因的甲基化使P16蛋白表达水平升高,从而在乳癌的发生、发展过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16型 P16基因 启动子 甲基化 乳癌
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