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乙草胺对土壤微生物数量和酶活性的影响 被引量：16
1
作者 荆瑞勇 王丽艳 +3 位作者 王彦杰 谭焕波 穆贵强 王伟东 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1302-1305,共4页
采用室内瓶培养试验,研究了乙草胺施用对土壤微生物数量及酶活性的影响。结果表明:乙草胺施用初期对土壤细菌和放线菌数量有明显刺激作用,但施用30d时高施用量处理(30mg·kg-1)呈明显抑制作用,之后各处理放线菌恢复到对照水平,而对... 采用室内瓶培养试验,研究了乙草胺施用对土壤微生物数量及酶活性的影响。结果表明:乙草胺施用初期对土壤细菌和放线菌数量有明显刺激作用,但施用30d时高施用量处理(30mg·kg-1)呈明显抑制作用,之后各处理放线菌恢复到对照水平,而对细菌的抑制作用一直持续到60d;乙草胺对土壤真菌数量呈"抑制-恢复-刺激"的作用趋势。乙草胺施用初期对土壤脱氢酶产生一定刺激作用,45d后高施用量处理呈明显抑制作用,一直持续到60d;土壤过氧化氢酶对乙草胺不敏感,而转化酶和脲酶对乙草胺施入初期较敏感;低施用量处理对转化酶有抑制作用,高施用量处理对转化酶有刺激作用,各处理对脲酶都有抑制作用。 展开更多
关键词 乙草胺 土壤微生物 土壤酶活性
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乙草胺对土壤微生物数量及土壤呼吸的影响 被引量：12
2
作者 荆瑞勇 王丽艳 +1 位作者 谭焕波 穆贵强 《土壤通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期298-301,共4页
通过室内瓶培养试验,研究了不同浓度(0.3、3、30μgkg-1干土)乙草胺对土壤呼吸、土壤细菌、放线菌和真菌数量的影响,结果表明乙草胺在培养初期促进土壤呼吸强度,之后土壤呼吸强度恢复到对照水平,甚至有降低的趋势;对细菌数量有先增长后... 通过室内瓶培养试验,研究了不同浓度(0.3、3、30μgkg-1干土)乙草胺对土壤呼吸、土壤细菌、放线菌和真菌数量的影响,结果表明乙草胺在培养初期促进土壤呼吸强度,之后土壤呼吸强度恢复到对照水平,甚至有降低的趋势;对细菌数量有先增长后抑制的趋势;对放线菌数量具有促进-抑制-恢复的趋势;对土壤真菌数量具有先抑制-恢复-促进的趋势。其研究结果为合理施用乙草胺提供理论依据。 展开更多
关键词 乙草胺 土壤呼吸 土壤微生物
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旱半夏组织培养条件的优化研究 被引量：4
3
作者 王丽艳 荆瑞勇 +2 位作者 谭焕波 唐敏 殷奎德 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1795-1796,共2页
目的优化旱半夏的组织培养条件。方法以旱半夏小块茎为外植体进行组织培养。结果与结论使用卡拉胶代替琼脂固化，取得了良好的效果；旱半夏继代增殖最适培养基为：MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．5mg／L，增殖系数达到6．5，平均苗高达2．5c... 目的优化旱半夏的组织培养条件。方法以旱半夏小块茎为外植体进行组织培养。结果与结论使用卡拉胶代替琼脂固化，取得了良好的效果；旱半夏继代增殖最适培养基为：MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．5mg／L，增殖系数达到6．5，平均苗高达2．5cm；生根最适培养基为：1／2MS＋NAA0．1mg／L，生根数4—5条，生根率达到100％。 展开更多
关键词 旱半夏 组织培养 卡拉胶
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L-谷氨酸氧化酶与CBD的融合表达及其在微晶纤维素上固定化分析 被引量：5
4
作者 宋辉 张文宇 +4 位作者 王鹏举 谭焕波 苏文成 赵树欣 邹培建 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1348-1361,共14页
酶的固定化作为一种重要的技术,已在生物催化领域得到了广泛的应用。现将来源于普拉特链霉菌3304(Streptomyces platensis NTU3304)产生的胞外L-谷氨酸氧化酶(L-glutamate oxidase,Gox)基因gox融合到来源于粪碱纤维单胞菌Cellulomonas f... 酶的固定化作为一种重要的技术,已在生物催化领域得到了广泛的应用。现将来源于普拉特链霉菌3304(Streptomyces platensis NTU3304)产生的胞外L-谷氨酸氧化酶(L-glutamate oxidase,Gox)基因gox融合到来源于粪碱纤维单胞菌Cellulomonas fimi的纤维素结合域(CBDcex)的基因上,构建表达载体p ETM10-Gox-CBD,并在大肠杆菌中表达。通过蛋白纯化获得融合蛋白,并命名为Gox-CBD。利用CBD对微晶纤维素特异性吸附的特性将其固定在微晶纤维素上,并对固定化酶的制备条件、结合量、酶学性质及其微晶纤维素结合稳定性等进行了研究。在4℃条件下结合约1 h,融合蛋白Gox-CBD结合在纤维素上的结合量即可达到9.0 mg/g。通过对重组型、融合表达游离的以及固定化在微晶纤维素上的谷氨酸氧化酶的酶学性质进行比较发现,固定化酶的比酶活有所降低;但固定化酶的热稳定性相对于游离酶有了很大的提高,在60℃孵育30 min后还保留有约70%的活性,而游离的重组Gox在相同条件下几乎完全失去活性。当固定化结合蛋白在p H<10或者盐浓度>5 mmol/L的Na Cl条件下可以牢固结合。并且可以通过一步纯化方法固定化融合蛋白Gox-CBD于微晶纤维素上。因此,L-谷氨酸氧化酶与纤维素结合域融合表达的研究为蛋白的纯化及酶的固定化提供了一种新策略。 展开更多
关键词 L-谷氨酸氧化酶 纤维素结合域 固定化
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芥菜愈伤组织诱导及再生植株的分化 被引量：2
5
作者 王丽艳 荆瑞勇 +2 位作者 冯哲 谭焕波 唐敏 《农业科技通讯》 2008年第1期55-56,共2页
为加快芥菜品种选育的进程。以芥菜种子为外植体进行芥菜愈伤组织诱导及再生植株的分化培养试验。结果表明,诱导芥菜愈伤组织最适培养基为:MS+NAA0.1mg/L+6-BA3mg/L,诱导出的愈伤组织数量最多,质量也最好;最适愈伤组织分化培养基为:MS+N... 为加快芥菜品种选育的进程。以芥菜种子为外植体进行芥菜愈伤组织诱导及再生植株的分化培养试验。结果表明,诱导芥菜愈伤组织最适培养基为:MS+NAA0.1mg/L+6-BA3mg/L,诱导出的愈伤组织数量最多,质量也最好;最适愈伤组织分化培养基为:MS+NAA0.1mg/L+6-BA1mg/L,分化率达到100%,平均分化苗数为3.5株。 展开更多
关键词 芥菜 愈伤组织 分化
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菌丝霉素MP1106融合蛋白的复性及纯化方法 被引量：1
6
作者 王鹏举 谭焕波 +2 位作者 苏文成 张文宇 邹培建 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期94-100,共7页
旨在建立高效、快捷的菌丝霉素衍生物MP1106大肠杆菌表达系统。通过基因融合的方式构建生物表面活性剂-菌丝霉素衍生物(DAMP_4-MP1106)融合蛋白表达载体,在大肠杆菌中进行表达;并对目的蛋白MP1106进行分离纯化和分子内二硫键鉴定。结果... 旨在建立高效、快捷的菌丝霉素衍生物MP1106大肠杆菌表达系统。通过基因融合的方式构建生物表面活性剂-菌丝霉素衍生物(DAMP_4-MP1106)融合蛋白表达载体,在大肠杆菌中进行表达;并对目的蛋白MP1106进行分离纯化和分子内二硫键鉴定。结果显示,融合蛋白DAMP_4-MP1106在大肠杆菌中以包涵体的形式成功表达,表达产物在变性条件下经Ni^(2+)-NTA亲和层析纯化;经检测分析,摇瓶中DAMP_4-MP1106的发酵产量为118 mg/L,纯度为94.7%;采用96孔板筛选并建立复性方法,获得水溶性融合蛋白DAMP_4-MP1106;并经TEV蛋白酶酶切以及二次Ni^(2+)-NTA亲和层析纯化,可获得纯度为99%的抗菌肽MP1106 18mg/L,回收率达到了38.4%。通过简捷方法快速鉴定分子内的二硫键,初步证实了抗菌肽MP1106完成了分子内结构正确折叠。建立了高效快捷的菌丝霉素大肠杆菌表达系统。 展开更多
关键词 抗菌肽 菌丝霉素 蛋白融合 复性 蛋白纯化
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去泛素酶复合体Ubp3/Bre5的制备及与Cdc48作用（英文）
7
作者 苏文成 吕操 +8 位作者 时丽丽 景晓飞 盖园明 张洁 谭焕波 王鹏举 夏立新 邹培建 秦刚 《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期58-67,共10页
泛素化是一种存在于真核细胞中与生理功能密切相关的蛋白修饰,泛素化与去泛素化处于动态调节过程中.Ubp3是与人USP10同源的酵母去泛素化酶,结合辅引子Bre5在细胞内发挥广泛作用.为研究该复合体的工作机制,制备重组蛋白复合体,在大肠杆... 泛素化是一种存在于真核细胞中与生理功能密切相关的蛋白修饰,泛素化与去泛素化处于动态调节过程中.Ubp3是与人USP10同源的酵母去泛素化酶,结合辅引子Bre5在细胞内发挥广泛作用.为研究该复合体的工作机制,制备重组蛋白复合体,在大肠杆菌中成功表达并纯化重组Ubp3与Bre5单体及Ubp3/Bre5复合体,首次成功大规模制备重组Ubp3/Bre5复合体.通过一系列pulldown实验,检验Ubp3/Bre5与AAA家族中泛素选择性ATP酶Cdc48的相互作用模式,结果发现,Ubp3及Bre5无法单独与Cdc48结合,但Ubp3/Bre5复合体可以有效与Cdc48相互作用.提出了Ubp3/Bre5-Cdc48相互作用的新模式,制备了高质量重组Ubp3/Bre5复合体.该研究为通过生化及结构生物学进行分子机制探索奠定了基础. 展开更多
关键词 结合蛋白质 Ubp3去泛素化酶 结合辅因子Bre5 ATP酶Cdc48 去泛素化复合体 与谷光苷肽巯基转移酶沉淀试验 直接相互作用
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肽类或蛋白质类药物体内稳定性控制策略 被引量：6
8
作者 谭焕波 邹培建 秦刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1634-1639,共6页
肽类或蛋白质类药物具有生物活性和特异性较高、可溶性强、低毒性等优点,现已成为药物研发的热点领域;然而,肽类或蛋白质类药物由于消化系统和血液中蛋白酶的快速降解以及体内肾脏的快速清除,体内半衰期一般较短,严重限制了药效作用的... 肽类或蛋白质类药物具有生物活性和特异性较高、可溶性强、低毒性等优点,现已成为药物研发的热点领域;然而,肽类或蛋白质类药物由于消化系统和血液中蛋白酶的快速降解以及体内肾脏的快速清除,体内半衰期一般较短,严重限制了药效作用的发挥。为了延长肽类或蛋白质类药物的体内半衰期,改善其药代动力学和药效学特征,各药物研发机构已进行大量研究,并成功开发多种化学修饰或基因工程改造方法。该文将主要从提高对酶的稳定性、增大流体力学体积和FcRn介导的pH依赖的再生等方面探讨延长肽类或蛋白质类药物半衰期的策略,并对成功的药物研发实例进行归纳汇总。 展开更多
关键词 肽类和蛋白质类药物 半衰期 延长 对酶稳定性 流体力学体积 FCRN
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纳豆激酶基因的克隆表达以及活性分析 被引量：3
9
作者 谭焕波 张国俊 +1 位作者 徐明恺 张惠文 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第18期195-198,共4页
应用PCR的方法从分泌纳豆激酶的枯草杆菌基因组DNA中扩增得到全长为1056bp的前导肽+成熟肽纳豆激酶原基因(pro-NK),并构建了纳豆激酶的重组表达载体pET-28a-pro-NK;转化E.coliBL21(DE3)后,在IPTG的诱导下实现了纳豆激酶的高效表达,经SDS... 应用PCR的方法从分泌纳豆激酶的枯草杆菌基因组DNA中扩增得到全长为1056bp的前导肽+成熟肽纳豆激酶原基因(pro-NK),并构建了纳豆激酶的重组表达载体pET-28a-pro-NK;转化E.coliBL21(DE3)后,在IPTG的诱导下实现了纳豆激酶的高效表达,经SDS-PAGE显示在28ku处有一特异带;表达产物经Ni2+亲和层析纯化后,纤维平板法测得的纳豆激酶的比活力为34245.1IU/mg;纯蛋白经透析和冷冻干燥处理后,纳豆激酶的比活力为16271.5IU/mg;在此基础上,对冻干保护剂的添加进行优化,最佳保护效果为甘露醇与纳豆激酶质量比为1:2,可比不加保护剂时比活力提高了30.9%。这可为基因工程方法生产纳豆激酶纯品,稳定其活性便于贮运,并将其开发成为临床药物提供技术参考。 展开更多
关键词 纳豆激酶 克隆表达 活性分析 冷冻干燥
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氯嘧磺隆与尿素对土壤微生物生物量碳、氮及无机氮的影响 被引量：1
10
作者 谭焕波 李新宇 +2 位作者 张惠文 李旭 徐明恺 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期2219-2224,共6页
通过室内培养试验,研究了不同浓度氯嘧磺隆(20、200、2000μg.kg-1土)单一施用及与尿素(120mg.kg-1土)配合施用情况下,土壤微生物生物量碳、氮和土壤铵态氮、硝态氮随时间的动态变化规律.结果表明:各浓度氯嘧磺隆单独处理在整个培养期(6... 通过室内培养试验,研究了不同浓度氯嘧磺隆(20、200、2000μg.kg-1土)单一施用及与尿素(120mg.kg-1土)配合施用情况下,土壤微生物生物量碳、氮和土壤铵态氮、硝态氮随时间的动态变化规律.结果表明:各浓度氯嘧磺隆单独处理在整个培养期(60d)中对微生物生物量碳、氮均有抑制作用,且浓度越高,后期抑制作用越强;各浓度氯嘧磺隆处理在培养前期对硝态氮、铵态氮没有明显影响,中期(15d)能显著提高土壤中铵态氮的含量,后期(30d后)显著提高了土壤中硝态氮的含量.尿素单独施用及与氯嘧磺隆配施均能在短时间内增加微生物生物量碳、氮,但随后配施处理的促进作用减弱;尿素单独和配施均能持久增加土壤中铵态氮、硝态氮含量. 展开更多
关键词 氯嘧磺隆 尿素 微生物生物量碳 微生物生物量氮 无机氮
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