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重组环状胸腺五肽结构类似物Cyclo-(Cys-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-)的制备、鉴定和活性检测 被引量：2
1
作者 余榕捷 高媛 +4 位作者 林剑 谢秋玲 谭毅力 洪岸 周天鸿 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期652-658,共7页
为了实现蛋白内含肽(Intein)介导的重组环状胸腺五肽结构类似物[cyclo-(Cys-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-),cTP]的高效制备,设计并合成编码6个氨基酸的cTP基因,克隆到表达载体pTWIN1,重组表达质粒pTW-cTp转化E.coliER2566构建工程菌,IPTG诱导... 为了实现蛋白内含肽(Intein)介导的重组环状胸腺五肽结构类似物[cyclo-(Cys-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-),cTP]的高效制备,设计并合成编码6个氨基酸的cTP基因,克隆到表达载体pTWIN1,重组表达质粒pTW-cTp转化E.coliER2566构建工程菌,IPTG诱导由几丁质结合域纯化标签(chitinbindingdomain,CBD)、2个蛋白内含肽和目的多肽组成的“多元”融合蛋白(CBD-intein1-cTP-intein2-CBD)的高效表达.几丁质柱亲合层析纯化融合蛋白后,改变pH值和温度诱导intein1C端切割,硫醇MESNA诱导intein2N端切割,释放N端为Cys,C端为硫酯的重组cTP线性前体,通过非保护多肽硫酯环合法实现环肽生成.激光飞行质谱结果显示,纯化产物的分子量为764·4,与环肽的理论值相符.免疫活性检测结果显示,环肽cTP较线性多肽TP-5具有更显著的促进巨噬细胞吞噬能力的活性(P<0·01)和促进B细胞抗体生成的活性(P<0·01). 展开更多
关键词 重组环肽 蛋白内含肽 非保护多肽硫酯环合
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VPAC2在CHO细胞的表达及鉴定 被引量：1
2
作者 余榕捷 高媛 +4 位作者 戴云 谭毅力 曾志宏 周天鸿 洪岸 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期996-1001,共6页
PAC2是垂体腺苷酸环化酶激活多肽(Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP)和血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)的共同受体,介导多种重要生物学功能。为获得稳定特异表达VPAC2的中国仓鼠卵巢(Chinese... PAC2是垂体腺苷酸环化酶激活多肽(Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP)和血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)的共同受体,介导多种重要生物学功能。为获得稳定特异表达VPAC2的中国仓鼠卵巢(Chinesehamsterovary,CHO)细胞,将pcDNA-VPAC2表达载体转染CHO细胞,G418筛选转染阳性克隆,PACAP38标准品诱导阳性克隆细胞的胞内cAMP生成,筛选出对PACAP38最为敏感的阳性单克隆细胞株(VPAC2-CHO),运用RT-PCR、Westernblot和免疫荧光法检测VPAC2受体表达情况,利用VPAC2受体特异激动剂通过竞争性结合试验和促进胞内第二信使cAMP生成的活性检测实验证实,VPAC2-CHO特异表达有功能的VPAC2。Scatchard作图分析显示VPAC2-CHO的VPAC2受体密度为(1.1±0.2)pmol/mg膜蛋白,PACAP38与VPAC2的解离常数Kd值为(0.55±0.10)nmol/L。特异表达VPAC2受体细胞系的构建为深入研究该受体理化性质、生物学功能以及筛选、开发VPAC2受体新型特异激动剂和拮抗剂等研究奠定了基础。 展开更多
关键词 VPAC2 中国仓鼠卵巢细胞 表达
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石柱县动物防疫行政执法的问题与对策
3
作者 谭顺祥 谭毅力 《畜牧市场》 2005年第8期81-82,共2页
动物防疫越来越被各级政府重视,但农村法律意识差,畜牧部门执法监督难度大,本文针对基层动物防疫监督执法存在的问题进行了分析,并提出了应对措施,旨在寻求基层动物防疫监督执法的策略,加强动物防疫执法,减少动物疫病,提高养殖效益,确... 动物防疫越来越被各级政府重视,但农村法律意识差,畜牧部门执法监督难度大,本文针对基层动物防疫监督执法存在的问题进行了分析,并提出了应对措施,旨在寻求基层动物防疫监督执法的策略,加强动物防疫执法,减少动物疫病,提高养殖效益,确保畜产品卫生质量安全。 展开更多
关键词 问题与对策 行政执法 石柱县 动物防疫执法 监督执法 法律意识 执法监督 应对措施 动物疫病 养殖效益 质量安全 畜产品 基层
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半胱胺对肉鸡生产性能的影响研究
4
作者 谭毅力 谭顺祥 《畜牧市场》 2005年第8期107-109,共3页
半胱胺的主要成分是动物机体内天然存在的一种生理活性物质,是辅酶A的组成成分.辅酶A是动物体内碳水化合物、脂肪和氨基酸代谢中许多乙酰化反应的重要辅酶,在细胞内的反应中起重要作用.同时加速新陈代谢,提高动物免疫力,促进动物生长.... 半胱胺的主要成分是动物机体内天然存在的一种生理活性物质,是辅酶A的组成成分.辅酶A是动物体内碳水化合物、脂肪和氨基酸代谢中许多乙酰化反应的重要辅酶,在细胞内的反应中起重要作用.同时加速新陈代谢,提高动物免疫力,促进动物生长.爱维灵和吉力宝的主要成分是半胱胺. 展开更多
关键词 肉鸡生产性能 半胱胺 生理活性物质 主要成分 碳水化合物 乙酰化反应 氨基酸代谢 动物免疫力 组成成分 动物体内 新陈代谢 同时加速 动物生长 辅酶A 细胞内 添加剂 脂肪
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动物检疫申报制度辨析
5
作者 刘茂文 陈家杰 +1 位作者 叶庆安 谭毅力 《畜牧市场》 2008年第6期41-43,共3页
本文对动物检疫申报制度的由来、分类、特点、重要性及意义进行了分析,提出了动物检疫申报制度的内容以及实施过程中可能存在的误区和应对办法,以期对有效开展动物检疫工作有所帮助。
关键词 行政许可 动物检疫 动物检疫申报制度 动物报检点
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