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苦参碱通过调控β-catenin信号通路抑制肝癌细胞干性 被引量：26
1
作者 戴美琴 蔡茁 +4 位作者 陈娜娜 李金州 温嘉泳 谭丽转 郭丹 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1239-1245,共7页
目的探讨苦参碱对人肝癌HepG2和Huh7细胞增殖活性、细胞干性、β-catenin转录活性以及AKT/GSK3β/β-catenin信号通路的影响。方法应用MTT法检测细胞增殖活性,平板克隆形成实验检测0 g/mL、200 g/mL、400μg/mL、800μg/mL苦参碱对人肝... 目的探讨苦参碱对人肝癌HepG2和Huh7细胞增殖活性、细胞干性、β-catenin转录活性以及AKT/GSK3β/β-catenin信号通路的影响。方法应用MTT法检测细胞增殖活性,平板克隆形成实验检测0 g/mL、200 g/mL、400μg/mL、800μg/mL苦参碱对人肝癌HepG2和Huh7细胞的克隆形成能力,荧光定量PCR分析0 g/mL、200 g/mL、400μg/mL、800μg/mL苦参碱对人肝癌HepG2和Huh7细胞干性基因CD90、EpCAM(上皮细胞粘附分子)和CD133 mRNA的表达水平,双荧光素酶报告基因检测0 g/mL、200 g/mL、400μg/mL、800μg/mL苦参碱对人肝癌HepG2和Huh7细胞内β-catenin转录活性,Western blotting检测0 g/mL、400μg/mL、800μg/mL苦参碱对人肝癌HepG2和Huh7细胞内AKT(蛋白激酶B)、GSK-3β和β-catenin及其相应磷酸化蛋白的表达水平。结果MTT实验结果显示,苦参碱呈时间-浓度依赖性地抑制肝癌HepG2和Huh7细胞的增殖,处理24、48、72 h对HepG2细胞的半数抑制浓度依次为2369、1565、909.1μg/mL,对Huh7细胞的半数抑制浓度依次为1355、781.8、612.8μg/mL。苦参碱浓度依赖性地抑制肝癌细胞的克隆形成能力,400μg/mL、800μg/mL苦参碱能够显著抑制HepG2细胞的克隆形成能力(P<0.01,P<0.001),200 g/mL、400μg/mL、800μg/mL苦参碱能够显著抑制Huh7细胞的克隆形成能力(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。苦参碱能够显著肝癌细胞内CD90、EpCAM和CD133等干细胞标志物mRNA的表达,其中400μg/mL、800μg/mL苦参碱能够显著抑制HepG2细胞中CD90(P<0.01,P<0.001)、EpCAM(P<0.05,P<0.01)和CD133(P<0.01,P<0.01)mRNA的表达,400μg/mL、800μg/mL苦参碱能够显著抑制Huh7细胞中CD90(P<0.01,P<0.01)、EpCAM(P<0.05,P<0.01)和CD133(P<0.01,P<0.01)mRNA的表达。同时400μg/mL、800μg/mL苦参碱显著抑制HepG2细胞(P<0.001,P<0.001)和Huh7细胞(P<0.01,P<0.001)内β-catenin的转录活性。研究结果显示400μg/mL、800μg/mL苦参碱能够显著降低HepG2和Huh7细胞内β-catenin和磷酸化的AKT和GSK-3β蛋白水平,增加β-catenin� 展开更多
关键词 苦参碱 肝细胞癌 肿瘤干性 Β-CATENIN
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