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Fc段受体结合蛋白(SPA-SPG)基因克隆表达及其在IgG纯化中的应用 被引量：6
1
作者 孟照辉 林兵 +1 位作者 谢月辉 张克勤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期146-149,共4页
利用生物信息学 ,遴选编码SPA及SPG蛋白的基因 ,进行密码子优化 ,将目的基因分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链 ,采用一步升温后T4DNA连接酶连接的方法 ,合成了编码SPA及SPG蛋白的融合基因 .将其克隆到pSK质粒进行扩增 ,经测序、修正... 利用生物信息学 ,遴选编码SPA及SPG蛋白的基因 ,进行密码子优化 ,将目的基因分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链 ,采用一步升温后T4DNA连接酶连接的方法 ,合成了编码SPA及SPG蛋白的融合基因 .将其克隆到pSK质粒进行扩增 ,经测序、修正后再克隆到表达载体 ,高效表达了带His6的融合蛋白———蛋白AG .将蛋白AG共价结合到表面带羧基的磁粒上 ,形成蛋白AG磁粒复合物 ,用此复合物可在 1h内从大鼠、小鼠、人、猕猴、马、羊及猪等常用实验动物血清中纯化IgG . 展开更多
关键词 Fc段受体结合蛋白 SPA-SPG 融合基因合成 蛋白AG磁粒 IGG 纯化 受体结合蛋白 基因克隆 基因表达
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人体癌胚抗原相关细胞黏附分子1的结构与功能 被引量：3
2
作者 叶秋芳 孟照辉 谢月辉 《医学综述》 2012年第12期1851-1854,共4页
人癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAMl)是广泛表达于中性粒细胞、巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞及淋巴细胞表面的Ⅰ型跨膜糖蛋白,属癌胚抗原家族免疫球蛋白超家族分子,胞膜外区有Ig样结构域,CEACAM1-L型具有两个免疫受体酪氨酸抑制性基... 人癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAMl)是广泛表达于中性粒细胞、巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞及淋巴细胞表面的Ⅰ型跨膜糖蛋白,属癌胚抗原家族免疫球蛋白超家族分子,胞膜外区有Ig样结构域,CEACAM1-L型具有两个免疫受体酪氨酸抑制性基序,其生物学功能包括免疫调节、促进血管形成、调节血管重构、参与细胞凋亡调控、促进腺体管腔形成及调控胰岛素的清除,同时CEACAM1也是致病微生物的黏着受体。 展开更多
关键词 癌胚抗原相关细胞黏附分子1 免疫调节 肿瘤转移 血栓形成
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厚朴酚共晶抑菌活性研究
3
作者 曾金石 陈晓锋 +2 位作者 廖龙凤 谢月辉 朱丽康 《中国药业》 CAS 2024年第24期51-54,共4页
目的进一步提高厚朴酚(MAG)的抑菌活性。方法应用研磨法分别制备厚朴酚-L-脯氨酸(MAG-PRO)和厚朴酚-甜菜碱(MAG-BET)共晶,采用粉末X-射线衍射(PXRD)法、热失重分析(TG)法、差示扫描量热(DSC)法、傅里叶红外光谱(FT-IR)法鉴定共晶;对共... 目的进一步提高厚朴酚(MAG)的抑菌活性。方法应用研磨法分别制备厚朴酚-L-脯氨酸(MAG-PRO)和厚朴酚-甜菜碱(MAG-BET)共晶,采用粉末X-射线衍射(PXRD)法、热失重分析(TG)法、差示扫描量热(DSC)法、傅里叶红外光谱(FT-IR)法鉴定共晶;对共晶粉末样品进行PXRD表征以观察其稳定性;采用高效液相色谱法测定MAG及其2种共晶在10 mL水、pH 2.0盐酸缓冲液、pH 4.5和6.8磷酸盐缓冲液4种溶出介质中的平衡溶解度;采用微量肉汤稀释法检测MAG及其2种共晶不同质量浓度(50,100,200μg/mL)下对大肠埃希菌的抑菌活性。结果4种鉴定方法确定了共晶形成;PXRD表征结果显示样品未发生晶型改变,稳定性较好;MAG及其2种共晶在4种溶出介质中的平衡溶解度存在显著差异,且均在pH 6.8条件下最高,pH 4.5条件下最低。菌悬液在不同MAG质量浓度下,共晶的抑菌率均高于MAG,且质量浓度为200μg/mL时,MAG及其共晶均表现出抑菌作用(抑菌率>50%)。结论MAG-PRO和MAG-BET的抑菌活性较单体更高。该结论可为MAG进一步的药用研发提供参考。 展开更多
关键词 厚朴酚 L-脯氨酸 甜菜碱 共晶 鉴定 稳定性 平衡溶解度 抑菌活性
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果蝇吡咯啉-5-羧酸还原酶的表达、纯化及理化特点 被引量：2
4
作者 冯昌增 谢月辉 +1 位作者 曹毅 孟照辉 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期27-34,共8页
吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CRs)是普遍存在于原核和真核生物中的一种重要管家蛋白,其主要的功能是催化吡咯啉-5-羧酸(P5C)转化为脯氨酸,同时将NAD(P)H氧化为NAD(P)+。为揭示果蝇P5CR的聚合形式、酶学性质及晶体结构,提取了果蝇的总RNA,通... 吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CRs)是普遍存在于原核和真核生物中的一种重要管家蛋白,其主要的功能是催化吡咯啉-5-羧酸(P5C)转化为脯氨酸,同时将NAD(P)H氧化为NAD(P)+。为揭示果蝇P5CR的聚合形式、酶学性质及晶体结构,提取了果蝇的总RNA,通过逆转录获得了cDNA,进而通过PCR获得了编码果蝇P5CR的cDNA片段;将此片段连接到pET-28a(+)载体上,在大肠杆菌(Escherichia coli)中得到了高效表达,依次经过硫酸铵分级沉淀、亲和层析及凝胶过滤层析得到了适合晶体生长的高纯度蛋白;通过EGS交联实验和凝胶过滤层析检测了P5CR在溶液中的聚合形式;应用分光光度法测定了果蝇P5CR的酶活性参数;采用悬滴气相扩散法筛选了P5CR的结晶条件并进行了优化。实验结果:(1)纯化后的蛋白样品经SDS-PAGE检测,结果显示,凝胶上已基本观察不到杂蛋白质条带,说明目的蛋白质纯度较高;(2)果蝇P5CR在溶液中的基本存在形式是十聚体,在此基础上可形成更大的聚合形式;(3)果蝇P5CR参与抗癌药物硫代脯氨酸的代谢,在该逆向反应中最适pH为高碱性,该酶在45℃的半衰期约15分钟;(4)筛选得到了果蝇P5CR的初步结晶条件(0.2mol/L Ammonium phosphate dibasic,20%PEG3350 pH 8.0)。 展开更多
关键词 还原酶 果蝇 SDS-PAGE检测 羧酸 吡咯 理化特点 纯化 凝胶过滤层析
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基质金属蛋白酶7在心血管疾病中的研究进展 被引量：1
5
作者 闻江雄 孟照辉 谢月辉 《医学综述》 2012年第12期1785-1787,共3页
基质金属蛋白酶7(MMP-7)又称基质溶解素,属含锌的内肽酶家族,参与多种生理过程,如血管重构、纤维蛋白溶酶原的代谢、呼吸道炎症及重构、排卵及组织修复等。病理状态下表达过量的MMP-7参与腹主动脉瘤、动脉粥样硬化、肿瘤、肺气肿、风湿... 基质金属蛋白酶7(MMP-7)又称基质溶解素,属含锌的内肽酶家族,参与多种生理过程,如血管重构、纤维蛋白溶酶原的代谢、呼吸道炎症及重构、排卵及组织修复等。病理状态下表达过量的MMP-7参与腹主动脉瘤、动脉粥样硬化、肿瘤、肺气肿、风湿性关节炎、肝及肺纤维化等疾病的发生与发展。现就MMP-7在心血管疾病中的作用、机制及临床意义予以综述。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶7 斑块破裂 高血压 心肌重构
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利用生物信息学数据及工具合成表达链霉亲和素基因 被引量：1
6
作者 谢月辉 余睿 +2 位作者 班韶 赵冲 孟照辉 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期171-175,共5页
目的:人工合成表达链霉亲和素基因,制备链霉亲和素磁珠复合物用于核酸分离。方法:利用NCB I、BCM等提供的生物信息及软件工具,将链霉亲和素蛋白的基因进行密码子优化,并分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链,采用化学和酶促合成相结合的... 目的:人工合成表达链霉亲和素基因,制备链霉亲和素磁珠复合物用于核酸分离。方法:利用NCB I、BCM等提供的生物信息及软件工具,将链霉亲和素蛋白的基因进行密码子优化,并分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链,采用化学和酶促合成相结合的方法合成编码链霉亲和素蛋白基因。将纯化的链霉亲和素通过偶联剂与带羧基的磁粒共价结合,用于快速纯化生物素化的DNA。结果:用化学与酶促相结合一步法合成链霉亲和素全基因序列,用较短寡聚核苷酸链及较低的引物浓度合成该基因突变率很低,链霉亲和素在大肠杆菌中得到高效表达。用硅酸包衣的磁性微球对磁场反应良好且无磁记忆性,用碳二亚胺可实现活性羧基磁性微球与链霉亲和素两者的交联,反应条件温和。结论:制备的链霉亲和素磁珠复合物可用于生物素化的PCR产物纯化。 展开更多
关键词 生物信息学 基因合成 链霉亲和素 链霉亲和素磁珠
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生物信息网络资源在医学院校计算机教学中的应用探讨
7
作者 谢月辉 孟照辉 《环球市场信息导报（理论）》 2011年第12期37-38,共2页
在计算机教学中引入生物信息学网络资源应用的教学，既弥补了生物信息学教学的欠缺，又充实了大学计算机基础教学。通过教师设置主题、教学模拟及演示讲解具体操作流程，在机房进行实验教学，并结合学生的自主学习，达到教学目的，以适... 在计算机教学中引入生物信息学网络资源应用的教学，既弥补了生物信息学教学的欠缺，又充实了大学计算机基础教学。通过教师设置主题、教学模拟及演示讲解具体操作流程，在机房进行实验教学，并结合学生的自主学习，达到教学目的，以适应现代医学新型人才的培养及医学教育现代化的要求，推动医学教育的发展。 展开更多
关键词 生物信息学 网络资源 计算机教学 改革 自主学习
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某院2020年——2021年临床常见病原菌的检出情况及其耐药性分析
8
作者 温晓静 廖龙凤 +3 位作者 谢月辉 刘让万 朱丽康 陈发鸿 《抗感染药学》 2023年第4期437-440,共4页
目的:分析临床常见病原菌的检出情况及其耐药特点,探究其对临床抗菌药物用药的指导价值。方法:选取2020年—2021年赣县区人民医院收治的2 562例住院患者病例资料,统计患者抗菌药物的使用情况、同期临床送检标本的病原菌培养与药敏试验结... 目的:分析临床常见病原菌的检出情况及其耐药特点,探究其对临床抗菌药物用药的指导价值。方法:选取2020年—2021年赣县区人民医院收治的2 562例住院患者病例资料,统计患者抗菌药物的使用情况、同期临床送检标本的病原菌培养与药敏试验结果,分析常见致病菌的耐药情况。结果:2 562例住院患者中,使用抗菌药物治疗患者1 485例,其使用率为57.96%;使用抗菌药物的患者各标本中培养、分离出1 874株病原菌,其中大肠埃希菌618株(占32.98%)、铜绿假单胞菌393株(占20.97%)、肺炎克雷伯菌299株(占15.96%)、金黄色葡萄球菌185株(占9.87%)和鲍曼不动杆菌131株(占6.99%);药敏结果显示,大肠埃希菌对复方磺胺甲噁唑、环丙沙星的耐药率均>50.00%,而对阿米卡星的耐药率则<5.00%;肺炎克雷伯菌对复方磺胺甲噁唑的耐药率>40.00%,对阿米卡星的耐药率<3.00%,二者对亚胺培南的敏感率均高达100.00%;铜绿假单胞菌对头孢曲松、复方磺胺甲噁唑的耐药率均>85.00%,对甲磺酸左氧氟沙星的耐药率<5.00%;金黄色葡萄球菌对苄青霉素钾的耐药率>90.00%,对利奈唑胺、奎奴司汀的敏感率均达100.00%。结论:医院抗菌药物使用频率较高,临床应根据常见致病菌的耐药特点制定用药方案,并加强对抗菌药物的监管,以减缓耐药菌株的增长速度并确保临床治疗的有效性。 展开更多
关键词 住院患者 病原菌分布 耐药特点
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替格瑞洛或硫酸氢氯吡格雷在非ST段抬高型急性冠状动脉综合征抗血小板治疗中的效果对比
9
作者 黎俊晖 廖振琦 +1 位作者 谢月辉 刘克强 《现代诊断与治疗》 CAS 2023年第7期998-1000,共3页
目的分析替格瑞洛和硫酸氢氯吡格雷在非ST段抬高型急性冠状动脉综合征(Non-ST Elevated Acute Coronary Syndromes,NSTE-ACS)抗血小板治疗中的效果差异。方法选取2019年4月至2021年4月于我院接受经皮冠状动脉介入术(Percutaneous corona... 目的分析替格瑞洛和硫酸氢氯吡格雷在非ST段抬高型急性冠状动脉综合征(Non-ST Elevated Acute Coronary Syndromes,NSTE-ACS)抗血小板治疗中的效果差异。方法选取2019年4月至2021年4月于我院接受经皮冠状动脉介入术(Percutaneous coronary intervention,PCI)治疗的82例NSTE-ACS患者。根据治疗药物不同分为观察组和对照组各41例。观察组给予替格瑞洛治疗,对照组给予硫酸氢氯吡格雷治疗。比较两组血小板聚集率、血清心肌酶谱指标、主要不良心血管事件(Major Adverse Cardiovascular Events,MACE)发生率及不良反应发生率。结果治疗3个月、治疗6个月、治疗12个月观察组血小板聚集率均明显低于对照组(P<0.05)。治疗7 d,观察组cTnT、CK-MB指标水平均明显低于对照组(P<0.05)。治疗12个月内,观察组MACE总发生率为4.88%,明显低于对照组的19.51%(P<0.05)。治疗6个月内,两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论替格瑞洛治疗NSTE-ACS比较,在抑制血小板聚集、减轻心肌损伤及降低MACE发生风险方面效果显著,值得推广。 展开更多
关键词 替格瑞洛 硫酸氢氯吡格雷 非ST段抬高型 急性冠状动脉综合征 血小板
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蛋白质折叠、动力学以及蛋白质-配体结合的物理化学基础 被引量：4
10
作者 李慧敏 谢月辉 +1 位作者 刘次全 柳树群 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2014年第5期433-449,共17页
蛋白质是生物体的重要组成部分并参与细胞内几乎所有的生物学过程.随着越来越多物种基因组序列的测定,准确理解基因产物的功能并探索蛋白质功能多样性的原因,已经成为当前的研究热点.为了研究蛋白质的功能,已有大量蛋白质的静态三维结... 蛋白质是生物体的重要组成部分并参与细胞内几乎所有的生物学过程.随着越来越多物种基因组序列的测定,准确理解基因产物的功能并探索蛋白质功能多样性的原因,已经成为当前的研究热点.为了研究蛋白质的功能,已有大量蛋白质的静态三维结构被测定.但是,蛋白功能最终受其动力学行为所控制,这包括折叠过程、构象波动、分子运动以及蛋白质-配体相互作用等.基于自由能图谱理论,本文深入讨论了蛋白质动力学的底层物理化学机制,并回答了以下问题:蛋白质为什么能够折叠、以及如何折叠成其天然三维结构?为什么蛋白质的动力学特征是固有的?其动力学行为如何控制蛋白质的功能?讨论结果将有助于后基因组时代生命科学研究中蛋白质结构-功能关系的理解. 展开更多
关键词 自由能图谱 熵-焓 非互补性 粗糙性 驱动力 热力学 能力学
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