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雷公藤内生真菌的分离鉴定及活性研究 被引量：5
1
作者 谢少朵 陈向东 +5 位作者 汪辉 魏洪璇 潘云 纪乃琪 栗飞红 汪伟宸 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期413-419,共7页
【背景】雷公藤是一种传统中药,具有多种药理活性和较高的应用价值。但由于产量少、提取过程复杂而限制了其在临床上的应用。植物内生真菌的次级代谢产物能够产生相似的药理活性,有望解决植物资源匮乏的难题,成为新药筛选的潜在资源。... 【背景】雷公藤是一种传统中药,具有多种药理活性和较高的应用价值。但由于产量少、提取过程复杂而限制了其在临床上的应用。植物内生真菌的次级代谢产物能够产生相似的药理活性,有望解决植物资源匮乏的难题,成为新药筛选的潜在资源。【目的】从卫矛科植物雷公藤中分离内生真菌,对其产物的体外抗菌活性及抗肿瘤活性进行测定,并利用活性菌株对雷公藤粗提物进行转化,以达到增效减毒的作用。【方法】采用组织块法从雷公藤茎中分离内生真菌;打孔法测定发酵产物对金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的抑菌活性;MTT(噻唑蓝)比色法测定发酵产物及转化产物的抗肿瘤活性;ITS(Internal transcribed spacer)序列测序分析确定活性菌株的种属。【结果】从雷公藤茎中分离得到43株内生真菌,其中5株对金黄色葡萄球菌有抑菌作用,LGT7几乎与1μg/mL青霉素钠的作用效果相当;6株对MCF-7、SKOV3细胞有抗肿瘤活性,LGT7、LGT41对肿瘤细胞生长抑制率达90%以上;4株对雷公藤粗提物具有转化活性。活性菌株分别被鉴定为拟茎点霉和腐皮壳属。【结论】雷公藤内生真菌具有抗菌抗肿瘤作用,并可以通过转化产生增效减毒作用。 展开更多
关键词 雷公藤 内生真菌 抗菌 抗肿瘤 转化
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丁香酚等植物提取物对变形链球菌及生物被膜的药效学研究 被引量：3
2
作者 范璐 陈向东 +3 位作者 汪辉 魏洪璇 潘云 谢少朵 《药物生物技术》 CAS 2016年第3期222-225,共4页
本文通过研究丁香酚（Eugenol）与黄芩（Scutellaria baicalensiz）、葡萄籽（Grape seeds）、五倍子（Chinesegall）、柠檬（Lemon）的提取物对变形链球菌（Streptococcus mutans）及其生物被膜的药效，旨在从中筛选出具有防龋潜能的... 本文通过研究丁香酚（Eugenol）与黄芩（Scutellaria baicalensiz）、葡萄籽（Grape seeds）、五倍子（Chinesegall）、柠檬（Lemon）的提取物对变形链球菌（Streptococcus mutans）及其生物被膜的药效，旨在从中筛选出具有防龋潜能的提取物。采用微量肉汤法测定5种天然药物的最低抑菌浓度（Minimal inhibitory concentration，MIC）、最低杀菌浓度（Minimal bactericidal concentration，MBC）、最低抑制生物被膜浓度（Minimal biofilm inhibitory concentration，MBIC）；微量稀释棋盘法测定任两种提取物联合使用时的分级抑菌浓度指数（Fractional inhibitory concentration indexes，FICI）；构建生物被膜体外模型，测得提取物对生物被膜生成量的影响；计算各提取物作用生物被膜后被膜内的存活菌数量，并绘制杀菌曲线。丁香酚／柠檬的MBIC／MIC为1～2，在5种提取物中较小；丁香酚、五倍子及柠檬提取物在抑制生物被膜生成方面的效果明显优于黄芩和葡萄籽提取物；杀菌曲线显示柠檬、丁香酚杀菌效果较好，且二者具有一定的协同作用，可以将二者联合使用防龋。 展开更多
关键词 防龋 植物提取物 变形链球菌 协同 生物被膜 杀菌曲线
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多尼培南对铜绿假单胞菌生物被膜形成和群体感应系统的影响 被引量：3
3
作者 陈向东 王素霞 +3 位作者 汪辉 魏洪璇 谢少朵 潘云 《药学与临床研究》 2016年第3期193-197,共5页
目的:探究新型碳青霉烯类抗生素多尼培南(doripenem,DOR)对临床分离铜绿假单胞菌生物被膜形成的抑制作用,及对其群体感应系统相关基因Las R、Rhl R、Pqs A、Pqs E、Pqs R表达量的影响。方法:用结晶紫染色法测定30株临床分离铜绿假单胞... 目的:探究新型碳青霉烯类抗生素多尼培南(doripenem,DOR)对临床分离铜绿假单胞菌生物被膜形成的抑制作用,及对其群体感应系统相关基因Las R、Rhl R、Pqs A、Pqs E、Pqs R表达量的影响。方法:用结晶紫染色法测定30株临床分离铜绿假单胞菌形成生物被膜能力和多尼培南对生物被膜形成的抑制作用;微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最低抑制生物被膜浓度(minimal biofilm inhibitory concentration,MBIC);活菌计数法绘制多尼培南对生物被膜内细菌的杀菌曲线;采用实时定量荧光PCR(real-time PCR)法测定多尼培南对群体感应(quorum-sensing,QS)系统相关基因表达量的影响。结果 :30株铜绿假单胞菌中的29株(97%)形成生物被膜;多尼培南具有较强的抗铜绿假单胞菌浮游菌和生物被膜抑制活性,MICR为0.5~1μg·m L-1,MBICR为1~4μg·m L-1;显著下调Las R、Rhl R、Pqs A、Pqs E、Pqs R的表达量。结论:临床分离铜绿假单胞菌具有高生物被膜形成率,多尼培南对铜绿假单胞菌生物被膜具有抑制作用,可能与其下调QS系统相关基因有关。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 生物被膜 多尼培南 群体感应系统
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哈茨木霉的分离纯化、鉴定及发酵液活性的初步研究 被引量：3
4
作者 魏洪璇 陈向东 +3 位作者 汪辉 谢少朵 纪乃琪 范璐 《药物生物技术》 CAS 2017年第3期206-210,共5页
从松树根中分离木霉菌并测定其发酵液抗菌和抗肿瘤活性。利用PDA培养基对松树根部真菌进行分离培养和纯化,采用菌落显微形态观察和ITS序列分析鉴定。采用平板打孔法测定哈茨木霉发酵液对大肠杆菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853、... 从松树根中分离木霉菌并测定其发酵液抗菌和抗肿瘤活性。利用PDA培养基对松树根部真菌进行分离培养和纯化,采用菌落显微形态观察和ITS序列分析鉴定。采用平板打孔法测定哈茨木霉发酵液对大肠杆菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853、金黄色葡萄球菌ATCC 25923、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA、耐甲氧西林表皮葡萄球菌MRSE、耐药铜绿假单胞菌、耐药鲍曼不动杆菌、耐药白色念珠菌和耐药光滑念珠菌的抑菌圈直径并分析其抗菌活性。利用MTT比色法,体外测定12.5%,25%,50%和100%哈茨木霉发酵液对MCF-7和SKOV-3细胞增殖的抑制作用。结果表明,从松树根部分离纯化出一株木霉菌,并分析鉴定为哈茨木霉菌。哈茨木霉发酵液对临床标准菌株和耐药菌均有一定程度的抗菌活性,其中对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和MRSE抑菌作用较大,抑菌圈直径均达20 mm以上。哈茨木霉发酵液对MCF-7和SKOV-3细胞的抑制率最高为91.25%,91.87%,并且随着哈茨木霉菌发酵液浓度的增大,其对MCF-7和SKOV-3细胞的抑制率均增大,说明发酵液对MCF-7和SKOV-3细胞生长的抑制作用具有量效关系。哈茨木霉发酵液具有广谱抗菌活性和抗肿瘤活性,为从哈茨木霉次级代谢产物中分离与开发新型抗菌药物和抗癌药物提供一定参考价值。 展开更多
关键词 哈茨木霉 分离 纯化 鉴定 抗菌 抗肿瘤
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多尼培南抗铜绿假单胞菌生物被膜的体外活性研究 被引量：3
5
作者 王素霞 陈向东 +3 位作者 汪辉 谢少朵 魏洪璇 潘云 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期466-472,共7页
目的探究新型碳青霉烯类抗生素多尼培南(doripenem,DOR)抗临床铜绿假单胞菌生物被膜的活性并进一步探究亚抑菌浓度多尼培南抑制生物被膜的作用机制。方法采用微孔板法建立临床铜绿假单胞菌生物被膜体外模型。微量肉汤稀释法测定多尼培... 目的探究新型碳青霉烯类抗生素多尼培南(doripenem,DOR)抗临床铜绿假单胞菌生物被膜的活性并进一步探究亚抑菌浓度多尼培南抑制生物被膜的作用机制。方法采用微孔板法建立临床铜绿假单胞菌生物被膜体外模型。微量肉汤稀释法测定多尼培南对铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最低抑制生物被膜浓度(minimal biofi lm inhibitory concentration,MBIC)。结晶紫染色法测定生物被膜的形成和黏附,活菌计数法测定生物被膜内菌数。平板分析法测定运动性,微生物碳氢吸附能力(microbial adhesion to hydrocarbons,MATH)测定评估细胞疏水性。结果多尼培南具有较强的抗铜绿假单胞菌浮游菌和生物被膜菌活性,MIC50为0.5μg/m L,MBIC50为2μg/m L。明显抑制生物被膜的形成和减少已形成生物被膜的量,降低铜绿假单胞菌的运动性和疏水性。结论多尼培南能有效抑制铜绿假单胞菌生物被膜,有望用于相关感染的治疗。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 生物被膜 多尼培南
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