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二十二碳六烯酸通过活化T细胞核因子1调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化 被引量：1
1
作者 谢其非 陈蕊 +7 位作者 卢毅 严金川 刘朔 李梅 宋娟 邵晨 王中群 刘培晶 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期148-153,共6页
目的探讨二十二碳六烯酸（DHA）调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC）表型转化的分子机制。方法采用组织贴块法培养大鼠PASMC。将PASMC分为常氧组、低氧组（1%O2、94%N2、5%CO2，低氧刺激12 h）、低氧（1%O2、94%N2、5%CO2）＋... 目的探讨二十二碳六烯酸（DHA）调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC）表型转化的分子机制。方法采用组织贴块法培养大鼠PASMC。将PASMC分为常氧组、低氧组（1%O2、94%N2、5%CO2，低氧刺激12 h）、低氧（1%O2、94%N2、5%CO2）＋DHA（10 μmol/L）组（给予DHA处理后低氧孵育12 h），低氧（1%O2、94%N2、5%CO2）＋DHA（10 μmol/L）＋过表达NFATc1组（细胞转染过表达NFATc1载体24 h，然后再给予DHA及低氧刺激12 h）及低氧（1%O2、94%N2、5%CO2）＋DHA（10 μmol/L）＋敲低NFATc1组（细胞转染NFATc1小干扰RNA 24 h，然后再给予DHA及低氧刺激12 h）。使用三气培养箱制造低氧环境加以干预。分别采用实时定量PCR和Western blot法检测各组细胞的NFATc1mRNA和蛋白表达水平，分别采用免疫荧光染色、Western blot和实时定量PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平，采用实时定量PCR法检测平滑肌肌动蛋白相关蛋白22（SM22）mRNA表达水平，采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EDU）法检测PASMC增殖情况。 结果低氧刺激12 h，低氧组大鼠PASMC NFATc1的mRNA及蛋白表达水平均明显高于常氧组（P均〈0.05），而低氧＋DHA组则均明显低于低氧组（P〈0.05）。转染NFATc1过表达病毒及小干扰RNA 24 h后，低氧刺激大鼠PASMC 12 h，低氧组大鼠PASMC α-SMA阳性的细胞数、α-SMA蛋白及mRNA以及SM22 mRNA表达水平均明显低于常氧组（P均〈0.05），低氧＋DHA组则高于低氧组（P〈0.05），低氧＋DHA＋过表达NFATc1组则明显低于低氧＋DHA组（P〈0.05），而低氧＋DHA＋敲低NFATc1组又明显高于低氧＋DHA＋过表达NFATc1组（P〈0.05）。低氧组大鼠PASMC增殖率明显高于常氧组（P〈0.05），低氧＋DHA组则明显低于低氧组（P〈0.05），低氧＋DHA＋过表达NFATc1组则明显高于低氧＋DHA组（P〈0.05），而低氧＋DHA＋敲低NFATc1组又明显低于低氧＋DHA＋过表达NFATc1组� 展开更多
关键词 肺动脉 肌细胞 平滑肌 二十二碳六烯酸类
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