期刊文献+
共找到3篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
干旱胁迫下忍冬全基因组DNA甲基化和转录组分析 被引量:2
1
作者 小涵 唐志强 +4 位作者 刘谦 李佳 刘振华 张永清 蒲高斌 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第16期5339-5349,共11页
目的分析干旱胁迫下忍冬Lonicerajaponica全基因组DNA甲基化水平变化、模式以及与基因表达的关系,为进一步探究忍冬响应干旱胁迫的分子机制奠定基础。方法采用全基因组重亚硫酸盐甲基化测序法(whole-genomebisulfite sequencing,WGBS),... 目的分析干旱胁迫下忍冬Lonicerajaponica全基因组DNA甲基化水平变化、模式以及与基因表达的关系,为进一步探究忍冬响应干旱胁迫的分子机制奠定基础。方法采用全基因组重亚硫酸盐甲基化测序法(whole-genomebisulfite sequencing,WGBS),测定干旱胁迫下忍冬全基因组DNA甲基化水平,并联合转录组测序结果对差异甲基化基因相关的差异表达基因进行分析。结果干旱胁迫下忍冬整体甲基化水平普遍上升;其中CG类型甲基化水平明显高于CHG或CHH甲基化类型;对不同干旱胁迫处理下的忍冬进行差异甲基化区域(differentially methylated regions,DMR)分析,发现1935、2158和1750个差异甲基化相关基因,基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析表明,显著富集的通路主要包括亚油酸代谢,氮代谢通路和次生代谢物的生物合成通路等。通过转录组测序技术,发现差异甲基化基因相关的差异表达基因主要富集于次生代谢产物合成相关通路,同时筛选出4个在干旱胁迫下基因表达量上升显著的忍冬MYB(LonicerajaponicaMYB,LjMYB)LjMYB转录因子。结论干旱胁迫下忍冬甲基化水平上升,推测DNA甲基化调控基因表达是干旱影响金银花有效成分生物合成的作用机制之一。 展开更多
关键词 忍冬 干旱胁迫 DNA甲基化 全基因组重亚硫酸盐甲基化测序 转录组测序
原文传递
忍冬U6启动子的克隆及功能验证 被引量:1
2
作者 小涵 李小丽 +5 位作者 唐志强 刘谦 李佳 刘振华 张永清 蒲高斌 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1187-1192,共6页
以忍冬基因组DNA为模板,克隆并筛选出具有较高转录活性的忍冬U6启动子。采用PCR方法,从忍冬基因组中克隆到4个LjU6启动子,长度分别为336、708、359、602 bp, PlantCARE分析发现4个启动子中均含有TATA框以及CAAT框等典型的启动子顺式元件... 以忍冬基因组DNA为模板,克隆并筛选出具有较高转录活性的忍冬U6启动子。采用PCR方法,从忍冬基因组中克隆到4个LjU6启动子,长度分别为336、708、359、602 bp, PlantCARE分析发现4个启动子中均含有TATA框以及CAAT框等典型的启动子顺式元件,且包含与光响应、胁迫响应等相关的调控元件;克隆产物经测序正确后,将LjU6启动子连接至携带β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因的pBI121载体,成功构建4个LjU6-pBI121融合表达载体,通过农杆菌瞬时转化法转化烟草叶片,并对叶片进行GUS组织化学染色,染色结果显示LjU61-F1转录活性最高,本研究初步筛选出转录活性较高的忍冬U6启动子,为忍冬CRISPR/Cas9基因组编辑技术的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 忍冬 U6启动子 瞬时表达 β-葡萄糖苷酸酶染色 基因编辑
原文传递
金银花U6启动子的克隆及转录活性分析 被引量:1
3
作者 唐志强 李小丽 +1 位作者 小涵 蒲高斌 《山东科学》 CAS 2022年第2期11-17,共7页
U6启动子是构建CRISPR/Cas9体系中驱动sgRNA转录的重要元件。利用聚合酶链式反应方法,从华金6号金银花中克隆到3种U6启动子,并分别构建5个不同长度的启动子驱动GUS的植物融合表达载体。以CaMV35S作为阳性对照实验,农杆菌作为阴性对照实... U6启动子是构建CRISPR/Cas9体系中驱动sgRNA转录的重要元件。利用聚合酶链式反应方法,从华金6号金银花中克隆到3种U6启动子,并分别构建5个不同长度的启动子驱动GUS的植物融合表达载体。以CaMV35S作为阳性对照实验,农杆菌作为阴性对照实验,采用农杆菌瞬时转化法对烟草原生质体进行转染,GUS染色后置于显微镜下观察原生质体的染色数量和效率。根据染色结果,成功筛选出Chr01 U6-F1这一高效转录的启动子,为后期开展金银花的基因编辑奠定了基础。 展开更多
关键词 金银花 U6启动子 克隆 基因编辑
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部