吗啡预处理对H9c2心肌细胞缺氧/复氧时microRNA表达的影响 被引量：10

1

作者 韩正怡 何淑芳 +3 位作者 程洁 许士进 杨婉 张野 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1552-1557,共6页

目的探讨吗啡预处理(morphine preconditioning,MPC)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)时microRNA(miRNA)表达的影响,为明确其机制提供参考。方法培养H9c2心肌细胞,随机分为3组(n=4):1正常对照组(CON):H9c2心肌细胞置... 目的探讨吗啡预处理(morphine preconditioning,MPC)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)时microRNA(miRNA)表达的影响,为明确其机制提供参考。方法培养H9c2心肌细胞,随机分为3组(n=4):1正常对照组(CON):H9c2心肌细胞置于DMEM/F12细胞培养液常规培养;2缺氧/复氧组(H/R):对心肌细胞行缺氧5h/复氧1h处理;3吗啡预处理组(MPC+H/R):在H/R前,应用1μmol·L^(-1)吗啡预处理10 min。处理结束后,采用CCK-8法检测细胞增殖、化学比色法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡、Western blot法检测细胞内Fas蛋白表达、荧光定量RT-PCR法检测细胞miRNA表达水平。结果与CON组比,H/R组细胞活力降低,LDH活性升高,细胞凋亡率增加,Fas蛋白水平升高(P<0.01);MPC可明显提高细胞活力,降低LDH活性,抑制细胞凋亡,降低Fas蛋白水平(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,与CON组相比,H/R组miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216和let-7e-5p表达明显下调,而MPC能明显地抑制H/R对这些miRNA表达的下调作用(P<0.01)。结论吗啡预处理减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤可能与调控miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216和let7e-5p等miRNA表达有关。 展开更多

关键词 吗啡预处理 H9C2心肌细胞 缺氧/复氧 凋亡 FAS 微小RNA

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缺氧预处理诱导大鼠心肌细胞差异表达microRNA的芯片筛选与生物信息学分析 被引量：4

2

作者 何淑芳 朱海娟 +3 位作者 程洁 许士进 杨婉 张野 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期940-944,共5页

目的筛选缺氧预处理(hypoxia preconditioning,HPC)诱导成年大鼠心肌细胞差异表达的microRNA(miRNA),并预测分析miRNA调控的靶基因与功能。方法体外分离培养成年大鼠心室肌细胞,分为对照组(CON)和缺氧预处理组(HPC),CON组细胞正常培养,... 目的筛选缺氧预处理(hypoxia preconditioning,HPC)诱导成年大鼠心肌细胞差异表达的microRNA(miRNA),并预测分析miRNA调控的靶基因与功能。方法体外分离培养成年大鼠心室肌细胞,分为对照组(CON)和缺氧预处理组(HPC),CON组细胞正常培养,HPC组细胞经历10 min缺氧和30 min再给氧,提取心肌细胞总RNA,行miRNA芯片筛选,qRT-PCR验证芯片结果。利用软件预测差异表达miRNA调控的靶基因,分析靶基因富集的基因功能(gene ontology,GO)和信号通路(pathway)。结果与CON组相比,HPC可诱导大鼠心肌细胞miRNA表达谱发生明显改变,共有12个miRNA上调,14个miRNA下调(P<0.01,FDR<0.05);选择其中荧光信号值>500的7个miRNA,用于生物信息学分析。qRT-PCR检测miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216水平,变化趋势与芯片结果一致。生物信息学分析显示差异表达miRNA所调控的靶基因功能明显富集于27个GO和6条信号通路。结论 HPC可诱导成年大鼠心肌细胞miRNA表达谱明显改变,这些差异表达miRNA可能通过调控靶基因参与HPC介导的心肌细胞保护作用。 展开更多

关键词 心肌细胞 成年大鼠 缺氧预处理 MICRORNA 芯片 生物信息学

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脊髓小胶质细胞在小鼠慢性心力衰竭后慢性疼痛中的作用

3

作者 张瑞 许士进 +1 位作者 何淑芳 张野 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1465-1469,共5页

目的评价脊髓小胶质细胞在小鼠慢性心力衰竭(CHF)后慢性疼痛中的作用。方法选择SPF级健康雄性C57BL/6小鼠18只,8~12周龄,体质量20~25 g,采用随机数字表法分为3组(n=6):假手术组(Sham组)、CHF组和CHF+小胶质细胞抑制剂PLX3397组(CHF+PLX... 目的评价脊髓小胶质细胞在小鼠慢性心力衰竭(CHF)后慢性疼痛中的作用。方法选择SPF级健康雄性C57BL/6小鼠18只,8~12周龄,体质量20~25 g,采用随机数字表法分为3组(n=6):假手术组(Sham组)、CHF组和CHF+小胶质细胞抑制剂PLX3397组(CHF+PLX组)。采用结扎左冠状动脉前降支的方法法制备小鼠CHF模型。CHF+PLX组于造模前7 d至造模后28 d持续喂养含PLX3397的饲料。术后28 d时采用超声心动图评估小鼠心功能。分别于造模前1 d(T_(0))和造模后1、3、7、14、28 d(T_(1~5))时测定热缩足潜伏期(TWL)和机械缩足反应阈(MWT)。T_(5)时痛阈测定结束后,深麻醉下处死小鼠,取T_(2~6)和L_(4~6)脊髓组织,采用免疫荧光法检测脊髓背角小胶质细胞标志物Iba1的表达。结果与Sham组比较,CHF组小鼠左心室射血分数和左心室短轴缩短率降低,左心室舒张末期内径和左心室收缩末期内径升高,T_(4~5)时TWL缩短,MWT降低,脊髓背角Iba1表达上调(P<0.05);与CHF组比较,CHF+PLX组小鼠左心室射血分数和心室短轴缩短率升高,左心室舒张末期内径和左心室收缩末期内径降低,T_(2~5)时TWL延长,MWT升高,脊髓背角Iba1表达下调(P<0.05)。结论小鼠CHF后慢性疼痛可能与脊髓小胶质细胞活化有关。 展开更多

关键词 心力衰竭 疼痛 小神经胶质细胞 脊髓

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p38MAPK信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用：离体实验 被引量：3

4

作者 杨婉 金世云 +2 位作者 许士进 张野 何淑芳 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期673-677,共5页

目的。探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法成年雄性SD大鼠，体重200～230g，6～7周龄，尾静脉注射盐酸多柔比星2mg／kg，1次，周，连续6周，制备大鼠慢性心力... 目的。探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法成年雄性SD大鼠，体重200～230g，6～7周龄，尾静脉注射盐酸多柔比星2mg／kg，1次，周，连续6周，制备大鼠慢性心力衰竭模型。第8周末取成功制备慢性心力衰竭模型的大鼠30只，采用随机数字表法分为5组（n=6）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I／R组）、吗啡预处理组（MPC组）、p38MAPK抑制剂SB203580＋吗啡预处理组（SBM组）和SB203580对照组（SB组）。采用Langendorff离体心脏灌注及结扎左冠状动脉前降支30min，再灌注120min制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。MPC组平衡后灌注含1μmol／L吗啡的K-H液5min，间隔5min，共3个循环，随后制备心肌缺血再灌注损伤模型。SBM组于吗啡预处理前10min灌注含5Ixmol／LSB203580的K-H液至缺血5min，共45min；SB组不实施吗啡预处理，仅于缺血前40min至缺血5min持续灌注含5μmol／LSB203580的K—H液。于心脏稳定灌注15min、再灌注5和10min时收集冠脉流出液，采用化学比色法检测LDH活性。再灌注10min时Sham组、I／R组和MPC组采用Western blot法检测心肌磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）的表达水平；再灌注120min时，测量缺血危险区体积（AAR）、左心室与右心室总体积（LV＋RV）、梗死区体积（IS）及IS／AAR比值。结果与Sham组比较，其余各组再灌注时冠脉流出液LDH活性升高，IS和IS／AAR比值增大，I／R组和MPC组心肌p-p38MAPK表达上调（P〈0．05）；与I／R组比较，MPC组再灌注时冠脉流出液LDH活性降低，心肌p-p38MAPK表达上调，IS和IS／AAR比值减小（P〈0．05），SBM组和SB组冠脉流出液LDH活性、IS和IS／AAR比值差异无统计学意义（P〉0．05）；与MPC组比较，SBM组再灌注时冠脉流出液LDH活性升高，IS和IS／AAR比值增大（P〈0．05）。结论吗啡预处理� 展开更多

关键词 P38丝裂原活化蛋白激酶类 心力衰竭 心肌再灌注损伤 吗啡 缺血预处理

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鞘内吗啡预处理对心肌缺血再灌注大鼠脊髓背角SG区神经元兴奋性的影响 被引量：3

5

作者 黄成 何淑芳 +2 位作者 许士进 窦梦云 张野 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期771-775,共5页

目的探讨鞘内吗啡预处理对心肌缺血再灌注大鼠脊髓背角胶状质区（SG区）神经元兴奋性的影响。方法鞘内置管成功的成年雄性SD大鼠36只，体重200～300g，采用随机数字表法分为3组（n=12）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）和鞘... 目的探讨鞘内吗啡预处理对心肌缺血再灌注大鼠脊髓背角胶状质区（SG区）神经元兴奋性的影响。方法鞘内置管成功的成年雄性SD大鼠36只，体重200～300g，采用随机数字表法分为3组（n=12）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）和鞘内吗啡预处理组（ITMP组）。采用结扎冠状动脉左前降支30min、再灌注120min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型。ITMP组于缺血前30min鞘内输注吗啡3μg／kg（10μl）5min，停止5min，重复3次；I／R组给予等容量生理盐水。随机取6只大鼠，再灌注10min时处死，急性分离T2-6脊髓，制作脊髓切片，采用全细胞膜片钳技术测定脊髓背角SG区神经元静息电位、动作电位阈值（APT）、动作电位峰值（APP）、动作电位时程，记录步阶电流40、60、80、100pA诱发的动作电位个数；随机取6只大鼠，再灌注120min时处死，取心肌组织，确定梗死区体积（IS）与缺血危险区体积（ARR），计算IS／ARR比率；Westernblot法检测T2-6脊髓背角c-fos表达水平。结果与S组比较，I／R组IS／AAR比率升高，脊髓背角c—fos表达上调，SG区神经元动作电位个数明显增加，APT降低，APP升高（P〈0．05）；与I／R组比较，ITMP组IS／AAR比率降低，脊髓背角c—fos表达下调，SG区神经元动作电位个数减少，APT升高，APP降低（P〈0．05）。结论鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制与降低脊髓背角SG区神经元兴奋性，减轻伤害性刺激反应有关。 展开更多

关键词 吗啡 缺血预处理 注射 脊髓 胶状质 心肌再灌注损伤

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微小RNA-133b-5p在缺氧复氧诱发大鼠心肌细胞凋亡中的作用 被引量：3

6

作者 韩正怡 何淑芳 +3 位作者 朱海娟 程洁 许士进 张野 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期740-743,共4页

目的 探讨微小RNA-133b-Sp（miR-133b-5p）在缺氧复氧诱发大鼠心肌细胞凋亡中的作用.方法 大鼠H9c2胚胎心肌细胞在含10％胎牛血清DMEM/F12培养基中培养、传代.将细胞接种于96孔和6孔细胞培养板,采用随机数宁表法分为4组（n=64）：空白... 目的 探讨微小RNA-133b-Sp（miR-133b-5p）在缺氧复氧诱发大鼠心肌细胞凋亡中的作用.方法 大鼠H9c2胚胎心肌细胞在含10％胎牛血清DMEM/F12培养基中培养、传代.将细胞接种于96孔和6孔细胞培养板,采用随机数宁表法分为4组（n=64）：空白对照组（C组）正常培养24 h;缺氧复氧组（H/R）置于缺氧小室,通入95％N2-5％CO2,37℃培养箱中缺氧5h后,用含10％胎牛血清的DMEM/F12复氧1 h;miR-133b-5p模拟物＋缺氧复氧组（M＋H/R组）和阴性转染＋缺氧复氧组（NC＋H/R）分别用miR-133b-5p模拟物（终浓度为30 nmol/L）或miR-133b-5p模拟物错义链（终浓度为30 nmol/L）孵育24 h后制备缺氧复氧损伤模型.各组处理结束后,采用实时荧光定量PCR法检测miR-133b-5p的表达水平,采用CCK-8法测定细胞活力;采用微量酶标法测定培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的活性;采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 与C组比较,H/R组、M＋H/R组和NC＋H/R组心肌细胞活力降低,培养液LDH活性升高,细胞凋亡率升高,H/R组和NC＋H/R组miR-133b-5p表达下调,M＋H/R组miR-133b-5p表达上调（P＜0.05）;与H/R组比较,M＋H/R组心肌细胞活力升高,培养液LDH活性降低,细胞凋亡率降低,miR-133b-5p表达上调（P＜0.05）,NC＋H/R组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 大鼠心肌细胞缺氧复氧可能通过下调miR-133b-5p表达,诱发细胞凋亡. 展开更多

关键词 微RNAS 肌细胞 心脏 细胞凋亡 心肌再灌注损伤

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多柔比星对心肌细胞的损伤作用及对microRNA的影响 被引量：2

7

作者 杨婉 金世云 +2 位作者 许士进 张野 何淑芳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第1期86-90,共5页

目的探讨多柔比星对原代乳鼠心肌细胞的损伤作用及其对微小RNA(miRNA)表达的影响。方法原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,随机分为6组:对照组,不同浓度多柔比星(0.125、0.25、0.5、1、2μmol/L)处理组。对照组细胞正常培养,处理组细胞使用终... 目的探讨多柔比星对原代乳鼠心肌细胞的损伤作用及其对微小RNA(miRNA)表达的影响。方法原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,随机分为6组:对照组,不同浓度多柔比星(0.125、0.25、0.5、1、2μmol/L)处理组。对照组细胞正常培养,处理组细胞使用终浓度分别为0.125、0.25、0.5、1、2μmol/L的多柔比星处理24 h。倒置显微镜下观察心肌细胞搏动频率,CCK-8法检测细胞活力,微板法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,荧光定量RT-PCR(qRTPCR)法检测心肌细胞miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-6216和miR-30e-5p表达水平。结果与对照组相比,多柔比星减慢心肌细胞搏动频率,降低细胞活力,升高LDH活性(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与对照组相比,多柔比星1μmol/L处理组心肌细胞miR-133b-5p、miR-6216和miR-30e-5p表达显著上调,miR-133a-5p表达显著下调。结论多柔比星对原代乳鼠心肌细胞具有损伤作用,其机制可能与调控miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-6216和miR-30e-5p等miRNA表达有关。 展开更多

关键词 多柔比星 心肌毒性 乳鼠心肌细胞 微小RNA

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鞘内吗啡预处理对心肌缺血再灌注大鼠背根神经节神经生长因子表达的影响 被引量：2

8

作者 许士进 何淑芳 +2 位作者 胡军 黄成 张野 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期666-669,共4页

目的探讨鞘内吗啡预处理对心肌缺血再灌注大鼠背根神经节神经生长因子（NGF）表达的影响。方法鞘内置管成功的健康成年雄性SD大鼠30只，体重250～350g，采用随机数字表法分为5组（n=6）：假手术组（S组）、心肌缺血再灌注组（I／R组）... 目的探讨鞘内吗啡预处理对心肌缺血再灌注大鼠背根神经节神经生长因子（NGF）表达的影响。方法鞘内置管成功的健康成年雄性SD大鼠30只，体重250～350g，采用随机数字表法分为5组（n=6）：假手术组（S组）、心肌缺血再灌注组（I／R组）、鞘内吗啡预处理组（ITMP组）、“受体阻断剂CTOP＋鞘内吗啡预处理组（CTOP＋ITMP组）和CTOP对照组（CTOP组）。ITMP组缺血再灌注前30min，经鞘内导管微量泵恒速输注吗啡3μg／kg（10μl）5min，间断5min，重复3次；CTOP＋ITMP组和CTOP组分别于吗啡预处理前10rain和缺血前40min鞘内注射1μg／μl CTOP 10μl。于再灌注120min时处死大鼠，取心肌组织，测定心肌梗死体积；取背根神经节，分别采用免疫组化法和Western blot法检测NGF的表达。结果与S组比较，I／R组心肌梗死体积增大，背根神经节NGF表达上调（P〈0．05）；与I／R组比较，ITMP组心肌梗死体积减小，背根神经节NGF表达下调（P〈0．05），CTOP组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；与ITMP组比较，CTOP＋ITMP组和CTOP组心肌梗死体积增大，背根神经节NGF表达上调（P〈0．05）。结论鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制与激活脊髓斗受体，抑制背根神经节NGF的表达，减轻伤害性刺激反应有关。 展开更多

关键词 吗啡 注射 脊髓 缺血预处理 神经生长因子 心肌再灌注损伤 神经节 脊

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特定药物激活受体介导PVN谷氨酸能神经元抑制对小鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响 被引量：1

9

作者 陈振星 何淑芳 +2 位作者 许士进 王斌 张野 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期47-53,共7页

目的探究通过化学遗传特定药物激活受体(designer receptors exclusively activated by designer drugs,DREADDs)抑制下丘脑室旁核(hypothalamic paraventricular nucleus,PVN)谷氨酸能神经元兴奋性对小鼠心肌缺血/再灌注损伤(ischemia ... 目的探究通过化学遗传特定药物激活受体(designer receptors exclusively activated by designer drugs,DREADDs)抑制下丘脑室旁核(hypothalamic paraventricular nucleus,PVN)谷氨酸能神经元兴奋性对小鼠心肌缺血/再灌注损伤(ischemia reperfusion,IR)的影响。方法建立小鼠PVN置管模型单笼饲养3 d后,PVN注射抑制病毒rAAV-CaMKⅡα-hM4D(Gi)-EGFP或对照病毒rAAV-CaMKⅡα-EGFP。病毒感染3周后,建立小鼠IR模型。通过术前1 h腹腔注射氯氮平-N氧化物,诱导PVN谷氨酸能神经元抑制。测定心肌梗死面积、血清cTnI浓度,监测小鼠心电图,检测心肌内ERK、cleaved caspase-3水平,观察PVN内EGFP、CaMKII和c-Fos表达。结果与Sham组相比,IR组IS/AAR增大,血清cTnI浓度升高,PVN内c-fos表达增加,心肌组织cleaved caspase-3表达增加,pERK水平降低。然而,hM4D(Gi)DREADD介导的PVN谷氨酸能神经元抑制可明显减少IS/AAR,降低cTnI浓度,抑制PVN内c-fos表达,并降低心肌cleaved caspase-3表达,升高pERK水平。结论通过化学遗传术DREADD抑制PVN谷氨酸能神经元兴奋性可减轻小鼠IR损伤。 展开更多

关键词 化学遗传 下丘脑室旁核 谷氨酸能神经元 心肌缺血/再灌注损伤 ERK 腺相关病毒

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利用定量加压充气球囊制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型 被引量：1

10

作者 许士进 何淑芳 +2 位作者 金世云 胡军 张野 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第8期1180-1183,共4页

雄性SD大鼠随机分为3组,每组20只:假手术组(SHAM组)、球囊缺血再灌注组(SI/R组)、经典缺血再灌注组(I/R组)。3组均在冠状动脉左前降支下穿线,SHAM组仅将未充气的球囊固定于穿线处;SI/R组固定球囊后,通过加压泵对球囊充气和放气建立缺血... 雄性SD大鼠随机分为3组,每组20只:假手术组(SHAM组)、球囊缺血再灌注组(SI/R组)、经典缺血再灌注组(I/R组)。3组均在冠状动脉左前降支下穿线,SHAM组仅将未充气的球囊固定于穿线处;SI/R组固定球囊后,通过加压泵对球囊充气和放气建立缺血再灌注损伤模型;I/R组采用传统的造模方法。记录血流动力学和心电图的特异性改变,再灌注2 h后取心脏进行TTC染色测心肌梗死面积。结果显示,SI/R和I/R组均可造成显著心肌缺血,两组死亡率和心肌梗死体积(IS/ARR)的差异无统计学意义。 展开更多

关键词 动物模型 心脏 缺血再灌注 充气 球囊

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吗啡预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧时miR-133b-5p与Fas表达的影响 被引量：1

11

作者 何淑芳 朱海娟 +4 位作者 程洁 许士进 韩正怡 杨婉 张野 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期747-750,共4页

目的 评价吗啡预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧时微小RNA-133b-5p（miR-133b-5p）与Fas表达的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠心室肌细胞,接种于24孔板或60 mm培养皿培养,采用随机数字表法分为3组（n=24）：对照组（C组）、缺氧复氧组（H/R... 目的 评价吗啡预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧时微小RNA-133b-5p（miR-133b-5p）与Fas表达的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠心室肌细胞,接种于24孔板或60 mm培养皿培养,采用随机数字表法分为3组（n=24）：对照组（C组）、缺氧复氧组（H/R组）和吗啡预处理组（MPC组）.C组细胞正常培养,H/R和MPC组细胞缺氧90 min后复氧,MPC组于缺氧前采用含lμmol/L吗啡的无血清DMEM培养10 min,再换为无吗啡培养液培养30 min.于复氧120 min时采用MTT法测定心肌细胞活力,检测培养液乳酸脱氢酶（LDH）活性,采用Hoechst 33234染色法检测心肌细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率;实时定量PCR法检测miR-133b-5p与Fas mRNA的表达,Western blot法检测Fas蛋白的表达.结果 与C组比较,H/R组心肌细胞活力降低,培养液LDH活性和细胞凋亡率升高,miR-133b-5p表达下调,Fas mRNA及蛋白表达上调（P＜0.05）;与H/R组比较,MPC组心肌细胞活力升高,培养液LDH活性和细胞凋亡率降低,miR-133b-5p表达上调,Fas mRNA及蛋白表达下调（P＜0.05）.结论 吗啡预处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的机制与上调miR-133b-5p表达,下调Fas表达有关. 展开更多

关键词 吗啡 缺血预处理 肌细胞 心脏 细胞低氧 氧 微RNAS 抗原 CD95

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PI3K和ERK信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用

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作者 金世云 何淑芳 +4 位作者 吴昊 朱海娟 许士进 张书杰 张野 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期470-473,共4页

目的 评价1-磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性成年SD大鼠,体重200～230 g,尾静脉注射盐酸多柔比星2 mg/kg,1次/周,连续6周,制备大... 目的 评价1-磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路在吗啡预处理减轻心力衰竭大鼠离体心脏缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性成年SD大鼠,体重200～230 g,尾静脉注射盐酸多柔比星2 mg/kg,1次/周,连续6周,制备大鼠慢性心力衰竭模型.第8周末将成功制备慢性心力衰竭模型的大鼠42只,采用随机数字表法分为7组（n=6）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、吗啡预处理组（MP组）、ERK抑制剂PD98059＋吗啡预处理组（PD＋ MP组）、PI3K抑制剂渥曼青霉素＋吗啡预处理组（WT＋ MP组）、PD98059组（PD组）和渥曼青霉素组（WT组）.采用Langendorff离体心脏灌注及结扎左冠状动脉前降支（LAD）法制备大鼠缺血再灌注损伤模型,缺血30min,再灌注120 min.S组只缝线,不结扎LAD,持续灌注K-H液195 min.I/R组先灌注K-H液45 min,再制备大鼠缺血再灌注损伤模型.MP组先灌注K-H液15 min,再灌注含1μmol/L吗啡的K-H液进行预处理,灌注5 min,再次灌注K-H液5min,共3个循环,然后制备心脏缺血再灌注损伤模型.PD＋ MP组和WT＋ MP组于吗啡预处理前10 min,分别用含ERK抑制剂PD98059（10 μmol/L）和PI3K抑制剂渥曼青霉素（100 nmol/L）的K-H液进行灌注,持续至缺血5 min.PD组和WT组于缺血前40 min持续至缺血5 min分别灌注含PD98059和渥曼青霉素的K-H液.各组分别于心脏稳定灌注15 min、再灌注5和10 min时,收集冠脉流出液,采用化学比色法检测LDH活性.再灌注120 rin时,取下大鼠心脏,测量缺血危险区体积（AAR）、梗死区体积（IS）及IS/AAR比值.结果 与S组比较,I/R组再灌注5和10min时LDH活性升高,IS和IS/AAR均增加（P＜0.05）,AAR差异无统计学意义（P＞0.05）;与I/R组比较,MP组再灌注5min时LDH活性降低,IS和IS/AAR减小（P＜0.05）,AAR差异无统计学意义,WT组和PD组LDH活性、IS、AAR和IS/AAR差异无统计学意义（P＞0.05）;与MP组比较,PD＋ 展开更多

关键词 1-磷脂酰肌醇3-激酶 细胞外信号调节MAP激酶类 吗啡 缺血预处理 心力衰竭 心肌再灌注损伤

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