期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到7篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
shRNA干扰己糖激酶Ⅱ基因表达对人淋巴瘤细胞恶性生物学行为的影响 被引量：5
1
作者 许壁榆 邵霞 +3 位作者 张义炜 蔡佳翌 陈芳源 王婷 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期313-323,432,共12页
目的 :观察shR NA干扰己糖激酶(hexokinase,HK)Ⅱ基因表达对人淋巴瘤Raji和SU-DHL-4细胞代谢、增殖、凋亡及耐药的影响,初步评价HKⅡ基因靶向治疗在淋巴瘤中的潜在应用前景。方法 :构建慢病毒介导的shRNA靶向干扰HKⅡ基因表达的淋巴瘤... 目的 :观察shR NA干扰己糖激酶(hexokinase,HK)Ⅱ基因表达对人淋巴瘤Raji和SU-DHL-4细胞代谢、增殖、凋亡及耐药的影响,初步评价HKⅡ基因靶向治疗在淋巴瘤中的潜在应用前景。方法 :构建慢病毒介导的shRNA靶向干扰HKⅡ基因表达的淋巴瘤细胞株Raji和SU-DHL-4(HKⅡshRNA转染组),同时设置阴性shRNA转染对照组。采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测细胞中HKⅡmRNA和蛋白的表达水平。锥虫蓝拒染法检测细胞存活数并绘制生长曲线;CCK-8法检测多柔比星(doxorubicin,DOX)对淋巴瘤细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)。FCM法分析细胞周期分布及细胞凋亡。蛋白质印迹法检测细胞中凋亡相关蛋白caspase-3及其剪切体、Bcl-2和Bcl-6的表达;分别应用乳酸和葡萄糖检测试剂盒检测细胞培养上清液中乳酸和葡萄糖的浓度。结果 :与空质粒转染对照组细胞相比,HKⅡshRNA转染组细胞中HKⅡmRNA及蛋白的表达水平均明显降低(P值均<0.05)。shRNA干扰HKⅡ基因表达能抑制2种淋巴瘤细胞的增殖活性(P值均<0.01),并使细胞周期阻滞在G0/G1期(P值均<0.05),同时促进细胞凋亡(P值均<0.01)。与对照组细胞相比,HKⅡ基因沉默可降低DOX对2种淋巴瘤细胞的IC50值(P值均<0.05),抑制细胞中葡萄糖消耗(P值均<0.05),减少乳酸生成(P值均<0.01)。与对照组细胞相比,HKⅡshRNA转染后2种淋巴瘤细胞中Bcl-2蛋白的表达水平明显降低(P值均<0.05),而caspase-3剪切体表达水平明显升高(P值均<0.05);加入DOX作用后,2种淋巴瘤细胞的Bcl-2表达水平无明显差异(P值均>0.05),但HKⅡshRNA转染组细胞中caspase-3前体蛋白表达水平明显降低(P值均<0.01),而caspase-3剪切体表达水平升高更加明显(P值均<0.05)。结论 :shRNA干扰HKⅡ基因表达可抑制淋巴瘤细胞增殖,促进细胞凋亡,纠正细胞糖酵解代谢表型,提高细胞对化疗药物DOX的敏感性。提示HKⅡ基因可 展开更多
关键词 淋巴瘤 非霍奇金 己糖激酶Ⅱ 细胞凋亡 抗药性 肿瘤 糖酵解
原文传递
硼替佐米联合有氧氧化抑制剂寡霉素靶向Burkitt淋巴瘤细胞Raji的杀伤作用及机制 被引量：4
2
作者 邵霞 蔡佳翌 +3 位作者 许壁榆 钟济华 陈芳源 王婷 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期127-139,共13页
目的 :研究硼替佐米(bortezomib,BTZ)联合寡霉素(oligomycin,OM)对Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖及凋亡的影响,并探讨可能的作用机制。方法:采用不同浓度的BTZ(0、5、10、15、20、25和30 nmol/L)单药或联合OM(0.05μg/m L)作用于Raji细胞,C... 目的 :研究硼替佐米(bortezomib,BTZ)联合寡霉素(oligomycin,OM)对Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖及凋亡的影响,并探讨可能的作用机制。方法:采用不同浓度的BTZ(0、5、10、15、20、25和30 nmol/L)单药或联合OM(0.05μg/m L)作用于Raji细胞,CCK-8法检测对细胞增殖抑制率的影响;实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测原癌基因C-myc、缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)及其靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和葡萄糖转运体1(glucose transporter 1,GLUT1)m RNA及蛋白的表达,以及代谢途径中关键酶己糖激酶Ⅱ(hexokinaseⅡ,HKⅡ)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDHA)和琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDHA)m RNA及蛋白表达水平的变化;葡萄糖检测试剂盒[己糖激酶(hexokinase,HK)法]和乳酸检测试剂盒分别检测Raji细胞培养液中葡萄糖和乳酸浓度的改变;FCM法检测细胞周期分布及细胞凋亡的改变。结果 :不同浓度的BTZ单药作用于Raji细胞后,可明显抑制Raji细胞的增殖且呈剂量依赖性(P值均<0.01)。BTZ(5、10、15和20 nmol/L)联合OM对Raji细胞的增殖抑制率显著高于BTZ单药组(P值均<0.01)。BTZ单药作用于Raji细胞后,可不同程度抑制细胞中C-myc、HIF-1α、VEGF、GLUT1、HKⅡ、LDHA及SDHA m RNA及蛋白的表达;联合OM处理Raji细胞后,代谢相关基因m RNA及蛋白的表达水平进一步下调(P值均<0.05)。联合用药组抑制葡萄糖消耗及糖酵解代谢产物乳酸生成的能力明显高于BTZ单药组(P值均<0.05)。BTZ单药组能明显促进Raji细胞的凋亡且呈剂量依赖性,BTZ浓度为25 nmol/L时,Raji细胞主要被阻滞于G2/M期;而联合用药组能进一步提高细胞的凋亡率,BTZ浓度为5和15 nmol/L时,Raji细胞主要被阻滞于G0/G1期。结论 :BTZ可抑制Raji细胞的糖酵解通路,联合OM可协同增强这一抑制作用,这种协同机制可能与2种药物联用后,可同时抑制糖酵解及有氧氧化� 展开更多
关键词 淋巴瘤 非霍奇金 硼替佐米 寡霉素类 糖酵解 有氧氧化
原文传递
新德里金属-β-内酰胺酶的原核表达及其多克隆抗体的制备 被引量：1
3
作者 赵祖国 喻云梅 +8 位作者 刘炜 许壁榆 张腊喜 刘仿 杨银梅 王凯 周小棉 徐军发 丁元林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第12期1663-1666,1670,共5页
目的原核表达新德里金属-β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase-1,NDM-1),并制备其多克隆抗体。方法以临床分离的产NDM-1的臭鼻克雷伯杆菌为模板,PCR扩增NDM-1基因,克隆入pET-28a载体,构建重组原核表达质粒pET-28a-NDM-1,转化E.c... 目的原核表达新德里金属-β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase-1,NDM-1),并制备其多克隆抗体。方法以临床分离的产NDM-1的臭鼻克雷伯杆菌为模板,PCR扩增NDM-1基因,克隆入pET-28a载体,构建重组原核表达质粒pET-28a-NDM-1,转化E.coli BL21(DE3)pLyss,IPTG诱导表达重组蛋白。表达的重组蛋白经硫酸铵沉淀、离子交换层析、Ni亲和层析及分子筛层析纯化后,免疫日本大耳白兔,制备NDM-1多克隆抗体。抗体经硫酸铵沉淀和SPA-Sepharose亲和层析纯化后,Western blot鉴定其特异性。结果重组表达质粒pET-28a-NDM-1经PCR及测序鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为28 000,诱导表达的重组菌破菌上清存在较强的β-内酰胺酶活性,表明NDM-1蛋白为可溶性形式表达;最终纯化获得的NDM-1蛋白纯度高于95%;制备的NDM-1多克隆抗体能与诱导表达的重组菌胞外蛋白特异性结合。结论成功原核表达了NDM-1,并制备了其多克隆抗体,为NDM-1的快速检测提供了新的思路。 展开更多
关键词 新德里金属-β-内酰胺酶 原核细胞 基因表达 多克隆抗体
原文传递
缺氧诱导因子-1在淋巴瘤的研究进展 被引量：1
4
作者 许壁榆 王婷 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2015年第5期432-435,共4页
肿瘤细胞增殖需要大量耗氧，缺氧是许多肿瘤组织的重要特征。缺氧诱导因子（HIF）-1是人肿瘤和哺乳动物在缺氧条件下广泛存在的一种核转录因子，可激活多种与肿瘤生长相关的靶基因，参与调节细胞增殖和凋亡、能量代谢、血管生成、侵袭... 肿瘤细胞增殖需要大量耗氧，缺氧是许多肿瘤组织的重要特征。缺氧诱导因子（HIF）-1是人肿瘤和哺乳动物在缺氧条件下广泛存在的一种核转录因子，可激活多种与肿瘤生长相关的靶基因，参与调节细胞增殖和凋亡、能量代谢、血管生成、侵袭转移及放疗和化疗耐受等过程。笔者拟就HIF-1的基本生物学特征及其在淋巴瘤的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子-1 淋巴瘤
原文传递
纳米场效应晶体管生物传感器在肿瘤早期检测中的应用
5
作者 尹长青 许壁榆 +2 位作者 罗振钊 熊阿莉 郑超 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2019年第4期586-591,共6页
肿瘤的早期检测对于肿瘤的早期发现、诊断及治疗具有重要意义。基于硅纳米线、石墨烯、二硫化钼的纳米场效应晶体管生物传感器,由于灵敏度高和特异性好、分析速度快、免标记、廉价、能够微型化和一体化等优点,能够检测肿瘤相关标志物微... 肿瘤的早期检测对于肿瘤的早期发现、诊断及治疗具有重要意义。基于硅纳米线、石墨烯、二硫化钼的纳米场效应晶体管生物传感器,由于灵敏度高和特异性好、分析速度快、免标记、廉价、能够微型化和一体化等优点,能够检测肿瘤相关标志物微RNA和蛋白质等,在肿瘤的早期检测中可以发挥重要作用。 展开更多
关键词 纳米场效应晶体管 生物传感器 肿瘤 早期检测
原文传递
血清外泌体vWF含量及活性对弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后的影响 被引量：2
6
作者 叶芬 张淑贤 +6 位作者 菅成莲 孙娴婷 许壁榆 肖菲 黄洪晖 侯健 王婷 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期371-382,共12页
目的:探讨血清外泌体中血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)含量及活性与弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large b-cell lymphoma,DLBCL)患者预后的相关性。方法:应用商品化试剂盒(from serum)分离DLBCL患者血清外泌体,蛋白质印迹... 目的:探讨血清外泌体中血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)含量及活性与弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large b-cell lymphoma,DLBCL)患者预后的相关性。方法:应用商品化试剂盒(from serum)分离DLBCL患者血清外泌体,蛋白质印迹法检测外泌体标志蛋白CD63、CD9和肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,TSG101)的表达水平,透射电子显微镜下观察外泌体的形态和大小,纳米粒径分析仪Zetasizer检测外泌体的粒径分布。应用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清及血清外泌体中vWF的表达量,免疫比浊法检测外泌体中vWF的活性,免疫组织化学检测不同分期患者组织标本中vWF蛋白的表达水平。采用Kaplan-Meier法分析患者血清外泌体vWF含量及活性对总生存期(overall survival,OS)及无进展生存期(progression-free survival,PFS)的影响。绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线并计算曲线下面积(area under the curve,AUC)分析血清外泌体vWF含量及活性对患者预后的预测价值。结果:蛋白质印迹法结果显示,提取的血清外泌体表达外泌体标志蛋白CD63、CD9和TSG101,而不表达细胞蛋白Calnexin;透射电子显微镜结果显示,外泌体呈典型的茶托样结构;Zetasizer粒径分析结果显示,外泌体粒径为30~150 nm。DLBCL患者的分期越晚,血清vWF含量越高(P=0.0163);血清外泌体中vWF含量及活性与患者的分期、国际预后指数(international prognostic index,IPI)评分及预后均相关;分期晚(Ⅲ+Ⅳ期)和IPI评分高(3~5),DLBCL患者的血清外泌体vWF含量越高(P=0.0008和P=0.0049),活性也越大(P=0.0176和P=0.0069)。生存分析显示,血清外泌体vWF含量及活性越大,DLBCL患者的OS率(P=0.0038和P<0.0001)及PFS率(P=0.0387和P=0.0076)越低。ROC曲线分析提示,外泌体vWF含量及活性对DLBCL患者OS(AUC=0.7739和AUC=0.7318)及PFS(AUC=0.9231和AUC=0.8200)的预测价值大,甚至优于IPI评分( 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 外泌体 血管性血友病因子 预后
原文传递
淋巴瘤细胞来源性的外泌体对人淋巴瘤细胞恶性生物学行为的影响
7
作者 张淑贤 许壁榆 +6 位作者 菅成莲 叶芬 肖菲 韩晓凤 黄洪晖 侯健 王婷 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期427-438,共12页
目的:观察淋巴瘤细胞来源的外泌体对淋巴瘤细胞株增殖、耐药、迁移及侵袭能力的影响。方法:诱导建立对多柔比星(doxorubicin,DOX)耐药的弥漫大B细胞淋巴瘤Su-DHL-4/DOX细胞及Burkitt淋巴瘤Raji/DOX细胞。应用商品化试剂盒Total Exosome ... 目的:观察淋巴瘤细胞来源的外泌体对淋巴瘤细胞株增殖、耐药、迁移及侵袭能力的影响。方法:诱导建立对多柔比星(doxorubicin,DOX)耐药的弥漫大B细胞淋巴瘤Su-DHL-4/DOX细胞及Burkitt淋巴瘤Raji/DOX细胞。应用商品化试剂盒Total Exosome Isolation(from cell culture media)从亲本Su-DHL-4和Raji细胞以及耐药Su-DHL-4/DOX和Raji/DOX细胞的培养上清液中分离提取外泌体(分别命名为Su-EXO、Raji-EXO、Su/DOX-EXO及Raji/DOX-EXO)。用透射电子显微镜观察提取获得的外泌体的形态及大小,采用蛋白质印迹法检测外泌体表面标志蛋白凋亡相关基因-2(apoptosis-linked gene-2,ALG-2)相互作用蛋白X(ALG-2 interacting protein-X,ALIX)和肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,TSG101)的表达,以及纳米颗粒跟踪分析仪Zetaview检测外泌体粒径。将不同浓度的外泌体(Su-EXO和Raji-EXO)与其亲本Su-DHL-4和Raji细胞共培养后,应用锥虫蓝拒染法绘制细胞增殖曲线;不同浓度的Su-EXO、Raji-EXO以及Su/DOX-EXO(40μg/mL)和Raji/DOX-EXO(40μg/mL)与亲本Su-DHL-4和Raji细胞共培养后,CCK-8法检测DOX对淋巴瘤细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50),Transwell小室法检测淋巴瘤细胞的迁移和侵袭能力。结果:成功建立对DOX耐药的Su-DHL-4/DOX和Raji/DOX细胞株。透射电子显微镜下观察结果显示,分离获得的外泌体呈典型的茶托样、双层膜囊泡结构,且大小均一。蛋白质印迹法结果显示,分离获得的外泌体上有外泌体标志蛋白ALIX及TSG101的表达;Zetaview粒径分析结果显示,所提取的外泌体粒径均在30~150 nm之内。Su-DHL-4和Raji细胞与其各自来源的外泌体Su-EXO和Raji-EXO共培养后,细胞增殖能力均显著增强(P值均<0.01)。Su-DHL-4细胞与其DOX耐药Su-DHL-4/DOX细胞株来源的外泌体Su/DOX-EXO共培养后,Su-DHL-4细胞对的DOX敏感性显著降低(P<0.01)。Su-EXO和Raji-EXO能显著增强淋巴瘤细胞株Su-DHL-4与Raji细� 展开更多
关键词 淋巴瘤 外泌体 细胞增殖 抗药性 肿瘤 细胞运动
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部