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不同引物鉴定同一杂交水稻种子样品纯度结果的差异及其原因分析 被引量:10
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作者 朱国奇 陈静萍 +2 位作者 薛丹 庆才 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2015年第3期81-84,共4页
在对冈优158、Ⅱ优808、五优308及天丰优316的杂交种子样品进行室内纯度鉴定时,发现不同SSR引物鉴定的纯度结果存在明显差异。为了探讨其原因,将这4个组合的种子样品在海南进行田间种植鉴定,并按单株进行了分子与田间表型的对比分析。... 在对冈优158、Ⅱ优808、五优308及天丰优316的杂交种子样品进行室内纯度鉴定时,发现不同SSR引物鉴定的纯度结果存在明显差异。为了探讨其原因,将这4个组合的种子样品在海南进行田间种植鉴定,并按单株进行了分子与田间表型的对比分析。结果表明,冈优158、Ⅱ优808、五优308和天丰优316分别用引物RM208、RM264、RM242和RM164鉴定种子纯度时,只能鉴定出不育系(母本)杂株,室内分子鉴定纯度均高于相应的田间纯度;而分别用引物RM341、RM297、RM21、RM110鉴定时,不仅能鉴定出不育系(母本)杂株,还能鉴定出串粉株,室内分子鉴定纯度与田间鉴定纯度相当。因此,室内纯度鉴定应采用多对引物进行检测,以增加识别串粉株的几率。 展开更多
关键词 杂交水稻 SSR引物 种子纯度鉴定 纯度差异
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不同温度和时间热加工处理对核桃油品质的影响 被引量:9
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作者 朱冉 周杰 +2 位作者 李爽 荣瑞芬 《保鲜与加工》 CAS 北大核心 2015年第5期47-51,56,共6页
为探究不同温度和时间热加工处理对核桃油品质的影响,模拟生活与生产实践中核桃油常见热加工条件,以20℃室温存放核桃油为对照,对冷榨核桃油分别进行60、90、120、150、180、210℃条件下5 min和10 min热处理,测定不同温度处理组核桃油... 为探究不同温度和时间热加工处理对核桃油品质的影响,模拟生活与生产实践中核桃油常见热加工条件,以20℃室温存放核桃油为对照,对冷榨核桃油分别进行60、90、120、150、180、210℃条件下5 min和10 min热处理,测定不同温度处理组核桃油的过氧化值(POV)、茴香胺值(An V)、全过氧化值、脂肪酸(油酸、亚油酸和亚麻酸含量)和VE含量,分析不同热加工处理对核桃油氧化稳定性及不饱和脂肪酸稳定性的影响。结果表明,核桃油的过氧化值随加热温度的升高而升高,150℃达到最大值,180℃热处理后下降;茴香胺值随加热温度升高和时间延长呈上升趋势;油酸含量随加热温度升高逐渐下降,但210℃热处理组含量降幅较小;在60-120℃温度范围内,随温度升高亚油酸和亚麻酸含量降低,但在150℃以上,亚油酸和亚麻酸含量出现升高现象,并随温度的进一步升高表现出降低趋势;低于150℃热处理对生育酚含量影响不大,而高于180℃的加热则导致生育酚含量下降,时间越长,生育酚含量下降越多。因此,建议核桃油热加工处理温度不超过150℃,并尽量缩短加热时间,以保持核桃油的良好品质。 展开更多
关键词 核桃油 热加工 温度 时间 营养品质 氧化
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杂交水稻混播机械化制种技术研究进展 被引量:7
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作者 夏玉梅 唐宁 +5 位作者 卜小兰 胡远艺 余木兰 淡俊豪 曹孟良 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2020年第2期1-5,共5页
制种程序复杂、种子成本偏高是制约杂交水稻进一步发展的重要因素.混播机械化制种是杂交水稻制种技术发展的主要方向之一.系统回顾了国内外杂交水稻机械化制种技术的最新研究进展,并介绍和阐述了一种利用雌性不育的杂交水稻机械化制种... 制种程序复杂、种子成本偏高是制约杂交水稻进一步发展的重要因素.混播机械化制种是杂交水稻制种技术发展的主要方向之一.系统回顾了国内外杂交水稻机械化制种技术的最新研究进展,并介绍和阐述了一种利用雌性不育的杂交水稻机械化制种新技术. 展开更多
关键词 杂交水稻 机械化制种 混播 混收 雌性不育
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胚自主发生基因BBM1在水稻无融合生殖中的应用研究
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作者 王耀 夏玉梅 +4 位作者 淡俊豪 唐宁 田钧友 曹孟良 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2024年第1期27-34,共8页
固定F1代杂种优势是杂交水稻育种的战略目标和发展方向,而利用无融合生殖是固定杂种优势最有可能的途径。本研究利用组成型启动子Ubiq驱动胚自主发生基因BBM1,通过流式细胞倍性检测及基因芯片分析,发现T1代株系中出现单倍体植株;随后将... 固定F1代杂种优势是杂交水稻育种的战略目标和发展方向,而利用无融合生殖是固定杂种优势最有可能的途径。本研究利用组成型启动子Ubiq驱动胚自主发生基因BBM1,通过流式细胞倍性检测及基因芯片分析,发现T1代株系中出现单倍体植株;随后将卵细胞特异启动子AtDD45驱动BBM1基因表达盒,构建到PAIR1、REC8和OSD1(MiMe)基因编辑载体,获得了克隆种子,其诱导率高达95.24%。本研究为水稻无融合生殖技术体系的应用提供了参考。 展开更多
关键词 水稻 杂种优势固定 BBM1基因 无融合生殖 克隆种子 诱导率
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二倍体杂交稻及其同源四倍突变体生物学特性比较分析 被引量:1
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作者 夏玉梅 胡远艺 +5 位作者 淡俊豪 唐宁 王耀 田钧友 曹孟良 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2023年第2期19-24,共6页
染色体倍性增加可拓宽基因组遗传变异的范围和增加优良基因重组的机遇,是丰富种质资源遗传多样性的有效途径之一。作者前期通过农杆菌介导遗传转化杂交稻组合滇昆优8号(DY2),发现了不含外源转基因成分的同源四倍体突变株DY4。对DY2和DY... 染色体倍性增加可拓宽基因组遗传变异的范围和增加优良基因重组的机遇,是丰富种质资源遗传多样性的有效途径之一。作者前期通过农杆菌介导遗传转化杂交稻组合滇昆优8号(DY2),发现了不含外源转基因成分的同源四倍体突变株DY4。对DY2和DY4的形态特征、雌雄育性发育、花粉母细胞减数分裂过程中的染色体行为、自交后代的遗传行为等生物学特性进行了比较分析。结果表明,相对于DY2,DY4的种子体积明显增大,但分蘖数和结实率明显降低,生育期延长;DY4在第2次减数分裂时期小孢子发育出现异常,导致花粉部分败育,但其可育度仍保持在70%左右;DY4的胚囊发育多为异常,这可能是导致DY4结实率低的主要原因;DY4有4套染色体组,其遗传和分离更复杂,其不同座位的杂合状态可维持更多世代。本研究为杂交稻多倍体育种以及四倍体水稻的杂种优势利用提供一定的理论参考。 展开更多
关键词 杂交水稻 四倍体 花粉母细胞 减数分裂 基因型
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Taq DNA聚合酶的制备和纯化 被引量:1
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作者 庆才 +1 位作者 刘之熙 朱克永 《湖南农业科学》 2013年第7期10-11,15,共3页
Taq DNA聚合酶是分子生物学研究中最常用的热稳定DNA聚合酶之一。试验利用含Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化大肠杆菌E.coli菌株,用异丙基硫代-β-D-乳糖苷(IPTG)诱导表达耐热Taq DNA聚合酶;采用热变性沉淀杂蛋白,SDS-聚丙烯酰胺... Taq DNA聚合酶是分子生物学研究中最常用的热稳定DNA聚合酶之一。试验利用含Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化大肠杆菌E.coli菌株,用异丙基硫代-β-D-乳糖苷(IPTG)诱导表达耐热Taq DNA聚合酶;采用热变性沉淀杂蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测纯度,Bio-Rex 70柱层析纯化蛋白,PCR反应检测Taq DNA聚合酶的浓度和活性。结果表明:分离纯化制备的Taq DNA聚合酶,其纯度、酶活性和酶特异性均达到市售的Taq DNA聚合酶水平。 展开更多
关键词 TAQ DNA聚合酶 Bio-Rex70柱层析 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PCR
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植物转基因删除技术研究进展 被引量:1
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作者 淡俊豪 夏玉梅 +5 位作者 余木兰 唐宁 卜小兰 齐绍武 曹孟良 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第12期4005-4013,共9页
植物转基因删除系统是以删除外源基因、选择标记基因、报告基因等为基础发展起来的分子育种技术,因其独特的技术特点,迅速在分子育种上得到了广泛的应用和发展。本研究介绍了5种基因删除技术,包括位点特异重组系统(FLP/FRT重组系统,Cre/... 植物转基因删除系统是以删除外源基因、选择标记基因、报告基因等为基础发展起来的分子育种技术,因其独特的技术特点,迅速在分子育种上得到了广泛的应用和发展。本研究介绍了5种基因删除技术,包括位点特异重组系统(FLP/FRT重组系统,Cre/loxP重组系统,R/RS重组系统)、共转化系统、转座子系统、染色体内同源重组4种传统的基因删除技术,以及由CRISPR/Cas9基因编辑系统介导的基因删除技术;并分析了这5种基因删除技术的基本原理、自身的优缺点及目前的实际应用研究现状。本研究挖掘了这些技术作为基因删除以外的应用潜力,探讨了它们各自作为基因开关的应用前景。 展开更多
关键词 基因删除 位点特异重组 CRISPR/Cas9 基因开关 分子育种
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利用双荧光报告基因可视化鉴定胚特异启动子的功能
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作者 卜小兰 夏玉梅 +4 位作者 余木兰 淡俊豪 唐宁 曹孟良 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2022年第11期3587-3594,共8页
胚特异启动子对于外源基因在种子中特异表达、改良水稻品质有重要理论和实际意义。为高效鉴定水稻胚特异启动子功能和表达情况,本实验筛选了三个胚特异启动子OsESP1、pEMB1和Ole18,分别连接到含红色荧光蛋白(RFP)报告基因的载体pLJ02上... 胚特异启动子对于外源基因在种子中特异表达、改良水稻品质有重要理论和实际意义。为高效鉴定水稻胚特异启动子功能和表达情况,本实验筛选了三个胚特异启动子OsESP1、pEMB1和Ole18,分别连接到含红色荧光蛋白(RFP)报告基因的载体pLJ02上构建双荧光表达载体。利用基因枪介导的瞬时表达结合农杆菌介导的稳定表达,通过荧光观察,鉴定三个胚特异启动子的特异表达模式。结果表明:GFP/RFP双荧光载体是一个可以用于可视化筛选组织特异启动子的高效表达载体;相较于成熟胚,幼胚更适宜用于胚特异表达启动子的瞬时表达验证,为研究组织特异性启动子驱动外源基因在水稻中表达及水稻品种遗传改良拓展新思路。 展开更多
关键词 胚特异启动子 基因克隆 基因枪 双荧光报告基因
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Analysis on the Different Results of Seed Purity Identification for the Same Hybrid Rice Variety Using Different SSR Primers
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作者 庆才 朱国奇 +2 位作者 陈静萍 薛丹 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2015年第12期2670-2671,2698,共3页
Different results of seed purity identification for Gangyou 158, Ⅱ You 808, Wuyou 308 and Tianfengyou 316 were obtained using different SSR primers in our early work. To find out the reasons, the four hybrid combinat... Different results of seed purity identification for Gangyou 158, Ⅱ You 808, Wuyou 308 and Tianfengyou 316 were obtained using different SSR primers in our early work. To find out the reasons, the four hybrid combinations were grown in field to identify their purity according to their phenotypic traits. Then, the results of field identification were compared with that of laboratory tests using different SSR primers. The comparison revealed that only sterile lines (female parent) were distin- guished from true hybrids using the primers RM208, RM264, RM242 and RM164 for the purity identification of Gangyou 158, II You 808, Wuyou 308 and Tianfengyou 316, so the results were higher than that of field identification. In contrast, the primers RM341, RM297, RM21 and RM110 were able to distinguish not only the sterile plants but also the cross-pollinated ones from the true hybrids of Gangyou 158,Ⅱ You 808, Wuyou 308 and Tianfengyou 316, and the results of purity identifi- cation using them were close that of field identification, in summary, several pairs of primers should be used for the purity identification of rice hybrids to distinguish all the off-type plants and thus improve the accuracy. 展开更多
关键词 Hybrid rice SSR primers Seed purity Different results
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水稻穗萌机制及调控的研究进展
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作者 余木兰 唐宁 +5 位作者 夏玉梅 卜小兰 淡俊豪 石跃斌 曹孟良 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2020年第5期1-6,共6页
穗萌给水稻生产带来了严重危害,在杂交水稻制种时是导致种子劣变的主要因素。分析总结了种子含水量和温度、水解酶类和内源激素等影响水稻穗萌的生理生化机制,概述了与水稻穗萌密切相关的OsVP1基因、GA20氧化酶以及QTL等方面的水稻穗萌... 穗萌给水稻生产带来了严重危害,在杂交水稻制种时是导致种子劣变的主要因素。分析总结了种子含水量和温度、水解酶类和内源激素等影响水稻穗萌的生理生化机制,概述了与水稻穗萌密切相关的OsVP1基因、GA20氧化酶以及QTL等方面的水稻穗萌的分子机制,同时,总结了通过栽培、化学药剂以及生物技术途径防止穗萌的措施,以期为今后的研究及农业生产中对穗萌的防控提供参考。 展开更多
关键词 水稻 种子 穗萌 机制 防控
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Amy32B启动子在水稻中的表达分析
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作者 余木兰 唐宁 +5 位作者 夏玉梅 卜小兰 淡俊豪 石跃斌 曹孟良 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2020年第4期69-74,共6页
根据已报道的在大麦糊粉层特异表达的α-淀粉酶基因Amy32B,利用序列合成技术将Amy32B启动子与红色荧光蛋白基因RFP融合在一起,构建植物表达载体,并由农杆菌介导法导入水稻品种明恢86中,对转基因水稻植株中的红色荧光蛋白RFP活性进行检... 根据已报道的在大麦糊粉层特异表达的α-淀粉酶基因Amy32B,利用序列合成技术将Amy32B启动子与红色荧光蛋白基因RFP融合在一起,构建植物表达载体,并由农杆菌介导法导入水稻品种明恢86中,对转基因水稻植株中的红色荧光蛋白RFP活性进行检测。结果表明,Amy32B启动子在水稻中同样具有活性,在糊粉层背部特异表达,在整个植株中也有微弱本底表达。这表明Amy32B启动子为外源基因在转基因水稻糊粉层中高表达提供了新的工具,也为研究基因工程改良水稻提供了新的参考。 展开更多
关键词 水稻 转基因 Amy32B 启动子 糊粉层 表达
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