梨火疫病菌活菌快速定量检测方法的建立 被引量：14

1

作者 袁英哲 韩剑 +4 位作者 王岩 罗明 包慧芳 张春竹 黄伟 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1425-1433,共9页

【目的】将叠氮溴化丙啶(PMA)与实时荧光定量PCR技术(qPCR)相结合,建立一种快速检测梨火疫病菌活菌的方法,为病害的检疫和早期诊断,开展病原学、流行规律研究及制定科学防控措施严防病害入侵提供技术支持。【方法】以梨火疫病菌(Erwinia... 【目的】将叠氮溴化丙啶(PMA)与实时荧光定量PCR技术(qPCR)相结合,建立一种快速检测梨火疫病菌活菌的方法,为病害的检疫和早期诊断,开展病原学、流行规律研究及制定科学防控措施严防病害入侵提供技术支持。【方法】以梨火疫病菌(Erwinia amylovora)质粒pEA29设计特异性引物EaP29F1/EaP29R1,通过优化PMA的质量浓度和曝光时间,确定区分梨火疫病菌死活菌的PMA预处理最优反应条件,再以活菌DNA为模板进行qPCR的特异性扩增。设置不同比例死活菌混合体系,验证PMA-qPCR反应的可靠性。【结果】当梨火疫病菌浓度为1×10^8 CFU·mL^-1、PMA浓度为25μmol·L^-1、曝光时间为10 min时,能完全抑制死菌的扩增,仅以活菌体DNA为靶标进行选择性扩增。当活菌比例为10%~100%时(浓度为6.0×10^7~6.0×10^8 CFU·mL^-1),PMA-qPCR测得的活菌数与理论活菌数值均在同一个数量级,二者存在良好的线性关系(R^2=0.9928)。灵敏度检测结果表明,6.0×10^3~6.0×10^8 CFU·mL^-1范围内,梨火疫病菌活菌数与Ct值线性相关(R^2=0.9947),检测灵敏度下限为6×10^3 CFU·mL^-1(12 CFU/qPCR反应)。用建立的PMAqPCR方法检测人工接种发病的香梨、苹果、杜梨枝条,PMA-qPCR能准确检测其中的活菌,结果与菌落计数结果相符。【结论】本研究建立的PMA-qPCR检测方法能定量检测梨火疫病菌病活菌数量,具有灵敏、准确和高效的优点,避免了常规qPCR检测死菌导致的“假阳性”。 展开更多

关键词 梨火疫病菌 叠氮溴化丙啶(PMA) 实时荧光定量PCR(qPCR) 活菌

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甜瓜种子中黄瓜花叶病毒和小西葫芦黄花叶病毒的RT-LAMP可视化检测方法 被引量：6

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作者 袁英哲 罗明 +1 位作者 韩剑 潘亚南 《中国农学通报》 2020年第20期107-113,共7页

本研究旨在针对甜瓜种子中携带的黄瓜花叶病毒(CMV)和小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV),建立可视化环介导等温扩增检测方法。根据CMV和ZYMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列,分别设计并筛选出2套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,通过对反应体系中主... 本研究旨在针对甜瓜种子中携带的黄瓜花叶病毒(CMV)和小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV),建立可视化环介导等温扩增检测方法。根据CMV和ZYMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列,分别设计并筛选出2套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,通过对反应体系中主要影响因素的优化,建立适用于快速检测CMV和ZYMV的RT-LAMP检测方法。对优化后的2种LAMP检测方法进行特异性和灵敏度验证。结果表明,建立的2种LAMP检测方法分别能够特异性地检测出CMV和ZYMV,检测灵敏度较常规RT-PCR分别高出10倍和100倍,并且可通过肉眼观察直接对反应结果进行判定。该方法的建立为基层及现场快速检测甜瓜种子的带毒情况提供了新方法。 展开更多

关键词 甜瓜种子 黄瓜花叶病毒 小西葫芦黄花叶病毒 反转录环介导等温扩增 可视化检测

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论《杀死一只知更鸟》中儿童视角的叙事策略 被引量：3

3

作者 袁英哲 《佳木斯教育学院学报》 2013年第7期118-119,共2页

美国著名女性小说家哈珀.李因其唯一的一部长篇小说《杀死一只知更鸟》而闻名于世,这部小说自出版以来便深受国内外读者的喜爱。该小说运用第一人称叙述手法,从小女孩斯各特的视角出发,讲述了发生在二十世纪三十年代美国南方小镇上的一... 美国著名女性小说家哈珀.李因其唯一的一部长篇小说《杀死一只知更鸟》而闻名于世,这部小说自出版以来便深受国内外读者的喜爱。该小说运用第一人称叙述手法,从小女孩斯各特的视角出发,讲述了发生在二十世纪三十年代美国南方小镇上的一桩冤案。本文通过研究小说中的儿童视角,试图证明这种独特的叙事手法正是作者匠心独运的表达方式,也是小说打动人心的重要原因之一,从而帮助读者更好地理解作者的良苦用心。 展开更多

关键词 哈珀·李 《杀死一只知更鸟》 儿童视角

原文传递

重塑价值理性,回归教育本源——对世界大学排名的解构与理性思考

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作者 田达睿 雷振东 +2 位作者 叶飞 李宏鹏 袁英哲 《大学教育》 2024年第9期131-134,140,共5页

为揭示当前流行的世界大学排名的本质,文章从大学综合水平“分值化”的合理性、大学排名评价指标体系的科学性、大学排名评价过程的公平性等问题入手,通过对QS、THE、U.S.News、ARWU四个主流世界大学排行榜及评价体系的解析,理性思考高... 为揭示当前流行的世界大学排名的本质,文章从大学综合水平“分值化”的合理性、大学排名评价指标体系的科学性、大学排名评价过程的公平性等问题入手,通过对QS、THE、U.S.News、ARWU四个主流世界大学排行榜及评价体系的解析,理性思考高校排名的问题。有关调查结果表明,在政治化、商业化等因素影响下,世界大学排名在合理性、科学性、公平性等方面存在一定问题,过度推崇和迷信大学排名的高校极易被误导。我国高校应专注于自身特色与实际情况,实现多元化发展。大学评价的意义与价值并非“排名”,评价应从技术理性重回价值理性和教育本源,从而促进我国高等教育的良好发展。 展开更多

关键词 世界大学排名 评价指标体系 高等教育

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论《小夜曲》中的“陌生化”叙事效果 被引量：2

5

作者 袁英哲 《哈尔滨师范大学社会科学学报》 2013年第3期124-126,共3页

石黑一雄是当代著名的日裔英籍小说家,《小夜曲》是其于2009年推出的短篇小说故事集:《小夜曲:音乐与黄昏五故事集》的主要作品之一。石黑一雄擅长从对平凡事物的叙述中营造出"陌生化"的效果,使那些读来简单的文字,散发出令... 石黑一雄是当代著名的日裔英籍小说家,《小夜曲》是其于2009年推出的短篇小说故事集:《小夜曲:音乐与黄昏五故事集》的主要作品之一。石黑一雄擅长从对平凡事物的叙述中营造出"陌生化"的效果,使那些读来简单的文字,散发出令人欲罢不能的吸引力。文章以"陌生化"理论为研究方法,对《小夜曲》中的"陌生化"叙事效果进行阐释。文章认为,《小夜曲》中的"陌生化"叙事手法主要体现在三个方面:情节的解码延迟、传神的细节描写、叙事视角的转换。通过分析《小夜曲》中"陌生化"的叙事效果,从而为理解石黑一雄作品提供有益的参考。 展开更多

关键词 石黑一雄 《小夜曲》 “陌生化” 叙事效果

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试比较《圣女贞德》与《新花木兰》中的英雄女性形象 被引量：1

6

作者 袁英哲 《兰州教育学院学报》 2014年第7期18-20,共3页

在历史的长河里,有许多"巾帼不让须眉"的女性英雄,贞德与花木兰便是其中的经典人物,她们同样是拯救祖国于危难的巾帼女英雄,贞德与花木兰之间有着太多的相同点与不同点,从她们身上,我们不仅看到了不论是东方还是西方的女性,... 在历史的长河里,有许多"巾帼不让须眉"的女性英雄,贞德与花木兰便是其中的经典人物,她们同样是拯救祖国于危难的巾帼女英雄,贞德与花木兰之间有着太多的相同点与不同点,从她们身上,我们不仅看到了不论是东方还是西方的女性,她们都为争取与男性平等地位而做出了努力与抗争,更看到了中西方政治、文化、宗教对其命运产生的巨大影响。本文选取英国戏剧家萧伯纳的历史名剧《圣女贞德》中的贞德与中国艺术家言慧珠改编的《新花木兰》中的花木兰为研究对象,通过比较她们之间的相同点与不同点,分析中西社会、文化、宗教对她们女性形象的影响,进而引发对女性问题的再思考。 展开更多

关键词 贞德 花木兰 英雄女性形象

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萧伯纳与百年中国戏剧的发展

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作者 袁英哲 《开封教育学院学报》 2014年第6期35-37,共3页

作为曾获得1925年诺贝尔文学奖的杰出爱尔兰戏剧家乔治·萧伯纳不仅将英国戏剧从浮夸的浪漫主义文学中拯救了出来,而且对中国戏剧的改革和发展也起到了至关重要的作用。笔者以萧伯纳与百年中国戏剧的发展为研究主题,通过分析萧伯纳... 作为曾获得1925年诺贝尔文学奖的杰出爱尔兰戏剧家乔治·萧伯纳不仅将英国戏剧从浮夸的浪漫主义文学中拯救了出来,而且对中国戏剧的改革和发展也起到了至关重要的作用。笔者以萧伯纳与百年中国戏剧的发展为研究主题,通过分析萧伯纳戏剧在中国的传播及影响,探索萧伯纳对百年来中国戏剧的发展变化所做出的贡献,证明他的"易卜生主义"其实一直都存在于中国戏剧的发展之中。 展开更多

关键词 萧伯纳 中国戏剧 戏剧发展 “易卜生主义”

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《夏洛克是我的名字》中的身份焦虑与伦理混乱 被引量：1

8

作者 袁英哲 田俊武 《外语研究》 CSSCI 北大核心 2022年第2期106-111,共6页

作为书写当代英国犹太群体生存困境的行家里手,雅各布森在其改编的新作《夏洛克是我的名字》中刻画了犹太人在多元文化冲击下的身份焦虑和伦理混乱。通过引入文学伦理学批评,本文着力考察书中斯特鲁洛维奇和夏洛克面临的认同困惑与身份... 作为书写当代英国犹太群体生存困境的行家里手,雅各布森在其改编的新作《夏洛克是我的名字》中刻画了犹太人在多元文化冲击下的身份焦虑和伦理混乱。通过引入文学伦理学批评,本文着力考察书中斯特鲁洛维奇和夏洛克面临的认同困惑与身份焦虑,并在此基础上深入分析他们陷入身份危机与伦理混乱的真正缘由,探讨其在族裔与公民、自我与他者、传统与现代等对立冲突中做出的伦理思考和伦理选择,揭示雅各布森在喜剧帘幕之下精心编制的伦理之帷。 展开更多

关键词 霍华德·雅各布森 《夏洛克是我的名字》 犹太人 身份危机 伦理混乱

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南阳地区养蜂月历

9

作者 袁英哲 杜成才 《中国蜂业》 2007年第2期20-21,共2页

4月份，“清明”至“谷雨”，气温持续升高，温度高达25℃以上。上、下旬蜂群迅速壮大，扩巢加继箱，蜂量增至高峰。上旬全场蜂群保温物减装结束。正常年份，4月上旬开始取油菜蜜，一般群产可达25～30公斤。适时取蜜产浆，力争双丰收。... 4月份，“清明”至“谷雨”，气温持续升高，温度高达25℃以上。上、下旬蜂群迅速壮大，扩巢加继箱，蜂量增至高峰。上旬全场蜂群保温物减装结束。正常年份，4月上旬开始取油菜蜜，一般群产可达25～30公斤。适时取蜜产浆，力争双丰收。油菜取蜜中、后期，泡桐开花泌蜜，一般群产可达10～15公斤。到刺槐零星开花时，训练蜜蜂1～2晚，使其及时采集。刺槐开始流蜜，及时放王，蜜蜂兴奋，利于提高产量。4月下旬至5月上旬，刺槐花期短而流蜜涌，要采取措施，力争使刺槐蜜达到高产，一般群产可达20～25公斤。4月上旬及时育王，4月下旬刺槐花期处女王交尾成功，及时更换劣王。可概括为： 展开更多

关键词 南阳地区 刺槐花期 月历 养蜂 开花泌蜜 油菜蜜 刺槐蜜 处女王

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春繁防春衰

10

作者 王金亭 袁英哲 《中国蜂业》 2021年第4期16-17,共2页

春繁是一年养蜂的关键,搞好春繁,为全年养蜂生产打下良好基础。倘若春繁期间蜂群繁殖不起来,造成春衰,会导致蜂群难以复壮,不能上继箱,严重影响上半年收成,辛勤劳动得不到好收益。笔者见过很多养蜂者,尤其是初学养蜂者,因养蜂技术不过... 春繁是一年养蜂的关键,搞好春繁,为全年养蜂生产打下良好基础。倘若春繁期间蜂群繁殖不起来,造成春衰,会导致蜂群难以复壮,不能上继箱,严重影响上半年收成,辛勤劳动得不到好收益。笔者见过很多养蜂者,尤其是初学养蜂者,因养蜂技术不过硬耽误了春繁时机,蜜蜂越养越少,只投入没回报,对养蜂失去信心。造成春衰的原因主要有两个:一是没抓好秋繁;二是不按春繁的规律要求办。下面具体谈一下造成春衰原因及预防措施。 展开更多

关键词 养蜂者 蜂群繁殖 养蜂技术 养蜂生产 春衰 继箱 春繁 秋繁

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南阳地区如何秋繁

11

作者 王金亭 袁英哲 朱保均 《中国蜂业》 2009年第9期18-19,共2页

笔者通过多年的养蜂实践，总结出南阳地区培育健康、强壮的越冬蜂的经验，现介绍如下：

关键词 南阳地区 秋繁 越冬蜂 养蜂

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春繁之我见

12

作者 王金亭 袁英哲 朱保均 《中国蜂业》 2011年第3期11-11,共1页

春繁是一年的开始，尤为重要。抓好春繁，夺取油菜花期好收成，为下一个花期奠定良好的蜂群基础。下面谈谈对春繁的浅薄认识，仅供参考。

关键词 春繁 油菜花期 收成 蜂群

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南阳地区养蜂月历

13

作者 袁英哲 杜成才 《中国蜂业》 2007年第1期23-23,共1页

南阳地区蜜粉源植物繁多，主要蜜源植物有油菜、刺槐、芝麻、棉花、泡桐和臭椿等，辅助蜜源植物有柳、杏、桃、梨、梅、柿、枣、国槐、香椿、花卉、瓜类、豆类和多种杂草等。该地区四季分明，各地小气候差异较大，夏季最高气温38℃～39... 南阳地区蜜粉源植物繁多，主要蜜源植物有油菜、刺槐、芝麻、棉花、泡桐和臭椿等，辅助蜜源植物有柳、杏、桃、梨、梅、柿、枣、国槐、香椿、花卉、瓜类、豆类和多种杂草等。该地区四季分明，各地小气候差异较大，夏季最高气温38℃～39℃，冬季最低气温-8℃-12℃。土地肥沃，水利条件优越，对蜜粉源植物的生长极其有利。随着农业产业结构调整，植树造林绿化面积覆盖率迅速提高，为养蜂事业的稳产高产奠定了坚实的基础，具有得天独厚的养蜂条件。现将南阳地区全年养蜂要事概括如下，供蜂友们参考。 展开更多

关键词 南阳地区 养蜂 农业产业结构调整 蜜粉源植物 月历 蜜源植物 气候差异 最高气温

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关于延长越冬蜂寿命的方法

14

作者 王金亭 袁英哲 《中国蜂业》 2018年第9期38-38,共1页

在春繁期间越冬蜂承载着第一代蜂子的哺育和采集第一个蜜源油菜花期的双重任务。利用越冬蜂采集春季第一个油菜花期，一个老蜂可顶三个幼蜂的采集，可以多摇蜜，丰收有保证，越冬蜂寿命相对延长，下面谈一下具体做法。

关键词 越冬蜂 寿命 油菜花期 采集 第一代 春繁期 蜜源 幼蜂

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一年两换王常年蜂群壮

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作者 王金亭 袁英哲 +1 位作者 朱宝均 陈子让 《中国蜂业》 2013年第1期22-22,共1页

经过多年的摸索和实践，小转地放蜂采用一年两次换王的方法，保证蜂群常年强壮，产量高，能有效控制螨害。现将一年两换王的方法介绍如下：

关键词 换王 蜂群 转地放蜂 产量高 螨害

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再谈盗蜂

16

作者 王金亭 袁英哲 寇花增 《中国蜂业》 2017年第6期30-30,共1页

盗蜂是养蜂员既害怕又难解决的大事，一旦蜂群出现盗蜂，若不及时制止会造成蜂群垮掉，若不及时制止全场起盗，整场蜂乱如麻，短期内便全场覆没，造成不可挽回的重大损失。下边谈一谈盗蜂发生的原因及解决办法。

关键词 盗蜂 蜂群 养蜂

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怎样防治白垩病

17

作者 王金亭 袁英哲 寇华增 《中国蜂业》 2016年第1期34-34,共1页

白垩病,又称＂石灰子病＂,是蜂群中一种真菌性传染疾病。白垩病对蜜蜂春繁非常不利,蜂群难以复壮,并且持续时间长。笔者曾是白垩病的受害者,在治病过程中虚心请教过养蜂能手,总结出一些经验和教训,至今蜂群再未发生过白垩病危害。一、... 白垩病,又称＂石灰子病＂,是蜂群中一种真菌性传染疾病。白垩病对蜜蜂春繁非常不利,蜂群难以复壮,并且持续时间长。笔者曾是白垩病的受害者,在治病过程中虚心请教过养蜂能手,总结出一些经验和教训,至今蜂群再未发生过白垩病危害。一、传播途径蜜蜂白垩病主要通过接触传播。不抗病蜂群与患病群蜜蜂在外界采花过程中相互接触传染疾病,也有购买带病菌花粉被感染上白垩病的,平时在蜂场乱用病脾扩巢是白垩病的主要途径。 展开更多

关键词 白垩病 传染疾病 蜜脾 虚心请教 采花 蜂脾 接触传播 持续时间 巢框 继箱

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