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RAPD扩增中商品酶体系对扩增产物的影响 被引量:6
1
作者 何礼 袁水 +4 位作者 莫邦辉 姚光贵 林宏辉 陈放 郭骁才 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2002年第3期308-313,共6页
随机选用了 10条RAPD引物 ,采用 3种商品TaqDNA聚合酶体系 ,以 5个不同物种的动植物总DNA为模板 ,进行RAPD扩增 .实验发现 ,在对同一模板、采用同一引物进行的RAPD扩增中 ,仅仅因为使用了不同的商品TaqDNA聚合酶 ,获得的扩增产物差别极... 随机选用了 10条RAPD引物 ,采用 3种商品TaqDNA聚合酶体系 ,以 5个不同物种的动植物总DNA为模板 ,进行RAPD扩增 .实验发现 ,在对同一模板、采用同一引物进行的RAPD扩增中 ,仅仅因为使用了不同的商品TaqDNA聚合酶 ,获得的扩增产物差别极大 ;不同商品来源的PCR反应缓冲体系 ,对扩增产物也有一定影响 ,但相对较小 .这说明 ,不同的商品酶体系对RAPD扩增产物影响很大 .因此 ,影响RAPD扩增产物稳定性的一个关键因素是商品TaqDNA聚合酶本身 ;研究中前后一致地使用同一商品TaqDNA聚合酶体系 ,是成功进行RAPD分析的基础 .图 3参 展开更多
关键词 RAPD扩增 商品酶体系 扩增产物
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两栖动物酒精标本DNA模板的快速提取 被引量:2
2
作者 莫邦辉 袁水 +2 位作者 郑渝池 郭骁才 曾晓茂 《四川动物》 CSCD 2003年第2期66-68,共3页
本文以中国角蟾属 4个种的蝌蚪酒精固定标本为材料 ,取尾部肌肉组织 0 1g,滤纸吸干组织块表面的酒精 ,在研钵中用剪刀剪碎 ,液氮研磨成粉 (必要时可加少量石英砂 ) ,转入 1 5ml离心管 ,加入 1 0ml提取缓冲液( 0 5 %SDS ,10mmol/LTris ... 本文以中国角蟾属 4个种的蝌蚪酒精固定标本为材料 ,取尾部肌肉组织 0 1g,滤纸吸干组织块表面的酒精 ,在研钵中用剪刀剪碎 ,液氮研磨成粉 (必要时可加少量石英砂 ) ,转入 1 5ml离心管 ,加入 1 0ml提取缓冲液( 0 5 %SDS ,10mmol/LTris HCl,10 0mmol/LEDTA ,pH 8 0 ) ,37℃温浴h ,5 0 0 0r/min离心 10min ,取上清转入另一 1 5ml离心管 ,氯仿 /异戊醇 ( 2 4:1)抽提两次 ,上清液加 2倍体积预冷 ( - 2 0℃ )的无水乙醇沉淀DNA ,12 0 0 0r/min离心 3min ,无菌条件下风干后 ,5 0 μlTE溶解 ,4℃保存备用。以通用引物PCR扩增 12SrRNA和 16SrRNA基因部分片段并测序。本文不采用蛋白酶K提取酒精保存标本的DNA模板 ,全部流程只需 3个小时 ,可同时提取数十个乃至数百个标本 ,并且所提取的DNA模板适合短片段PCR扩增。 展开更多
关键词 两栖动物 酒精标本 DNA模板 快速提取 测序
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耐酸性α-淀粉酶高产菌株发酵条件优化 被引量:1
3
作者 胡欣洁 袁水 胡承 《中国酿造》 CAS 北大核心 2007年第1期28-31,共4页
对耐酸性α-淀粉酶高产菌株ASA-UD86进行发酵条件优化,研究发现该菌株适宜的发酵工艺条件为培养基以麦麸为主要原料,加入豆饼粉补充氮源,麦麸:豆饼粉为1:0.5,料水比为1:1.2,培养温度为30℃,发酵时间60h ̄72h,初始pH值自然。
关键词 耐酸性α℃-淀粉酶 发酵条件 优化
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一种改进的齿突蟾动物肌肉线粒体DNA提取方法 被引量:3
4
作者 莫邦辉 袁水 +2 位作者 郑渝池 郭骁才 曾晓茂 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2004年第2期249-250,共2页
以1号冷冻保存(-20℃)的齿突蟾标本为材料,建立一种动物肌肉线粒体DNA的快捷提取方法.取10 g冷冻保存的肌肉组织,在研钵中剪碎,液氮研磨成粉;然后加SE缓冲液混匀,转入10 mL离心管静置10 min;上清液转入2 mL的Eppendorf管,1 000×g离... 以1号冷冻保存(-20℃)的齿突蟾标本为材料,建立一种动物肌肉线粒体DNA的快捷提取方法.取10 g冷冻保存的肌肉组织,在研钵中剪碎,液氮研磨成粉;然后加SE缓冲液混匀,转入10 mL离心管静置10 min;上清液转入2 mL的Eppendorf管,1 000×g离心10 min,取上清液,再12 000×g离心15 min,沉淀即为线粒体;最后用SDS碱裂解法分离得到mtDNA. 展开更多
关键词 齿突蟾 动物肌肉 线粒体DNA 提取方法 MTDNA
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不同培养条件对马铃薯试管薯的影响 被引量:1
5
作者 帅正彬 郭江洪 +3 位作者 杨斌 袁水 张军 陈征昊 《长江蔬菜》 2002年第C00期102-103,共2页
试验比较了不同培养条件对川芋56试管薯诱导的影响。结果表明,液体培养基的试管薯诱导率显著高于“固体+液体”培养基,但液体培养操作繁锁,易折断试管苗,造成污染。弱光和黑暗条件下,川芋56试管薯诱导率和平均薯重没有显著性差异,弱光... 试验比较了不同培养条件对川芋56试管薯诱导的影响。结果表明,液体培养基的试管薯诱导率显著高于“固体+液体”培养基,但液体培养操作繁锁,易折断试管苗,造成污染。弱光和黑暗条件下,川芋56试管薯诱导率和平均薯重没有显著性差异,弱光条件培养的试管薯当时发芽率极显著地高于黑暗培养的,黑暗条件下诱导的试管薯适于贮藏。通过7种培养基对试管薯形成的影响调查,再次证明BA不是诱导试管薯的必备物质,虽然7种培养基成分含量各不相同,诱薯率PS6显著地高于PS4,其它几种培养基之间诱薯率均差异不显著。大规模生产宜选择PS5(MS大量元素100ml/L+MS微量元素10ml/L+EDTA-Fe10ml/L+VB10.4mg/L+VB60.5mg/L+烟酸0.5mg/L+食用蔗糖80g/L),组成最简单,不含BA,成本最低。 展开更多
关键词 培养条件 马铃薯 试管薯 诱导培养
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