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人类新基因RMND5A的克隆及功能研究 被引量:4
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作者 唐文岘 黎冠 +5 位作者 邓云 婺州 李永青 王跃群 朱传柄 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2008年第1期85-89,共5页
克隆了一个新的人类Lish/CTLH结构域基因,经国际基因命名委员会批准命名为RMND5A.该基因位于染色体2p11.2,长3 239 bp,编码391个氨基酸,其结构域从N端起依次为LisH、CTLH与CRA.RT-PCR分析表明该基因在人类早期胚胎的多个组织中有表达,... 克隆了一个新的人类Lish/CTLH结构域基因,经国际基因命名委员会批准命名为RMND5A.该基因位于染色体2p11.2,长3 239 bp,编码391个氨基酸,其结构域从N端起依次为LisH、CTLH与CRA.RT-PCR分析表明该基因在人类早期胚胎的多个组织中有表达,在心脏、肝和肾中的表达水平较强.对该基因的蛋白进行了表达并制备了多克隆抗体.荧光素酶活性测定分析表明,在COS7细胞中过表达蛋白可以使MAPK信号途径的两个下游转录因子ELK-1和AP-1的转录活性显著下降,表明RMND5A通过MAPK信号途径参与了对细胞生命活动的调控过程. 展开更多
关键词 RMND5A 克隆 表达 MAPK
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P转位子诱变的果蝇心脏发育基因的突变(Ⅰ)——第2染色体基因突变 被引量:4
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作者 李敏 婺州 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 1997年第4期66-69,94,共5页
果蝇和脊椎动物的心脏早期发育具有平行的基因控制机理,果蝇是替代人体心脏进行基因功能研究的理想模式.利用P转位子作为诱变工具,诱发果蝇第二染色体基因突变,筛选与心脏发育有关的基因.初步结果表明,有3个第二染色体隐性致死... 果蝇和脊椎动物的心脏早期发育具有平行的基因控制机理,果蝇是替代人体心脏进行基因功能研究的理想模式.利用P转位子作为诱变工具,诱发果蝇第二染色体基因突变,筛选与心脏发育有关的基因.初步结果表明,有3个第二染色体隐性致死突变基因在心脏组织有lacZ表达,并且观察到有心脏前体细胞的突变表型.这预示在这3个致死系中,P转位子可能插入到与心脏发育有关的基因中或这些基因的附近. 展开更多
关键词 发育 基因 染色体 P转位子 基因突变 心脏病
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KLHL31促进C2C12细胞的肌原分化 被引量:2
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作者 梁洁 刘仕杰 +8 位作者 宋怀婷 邓云 莫小阳 万永奇 李永青 婺州 江志钢 吴秀山 王跃群 《激光生物学报》 CAS CSCD 2010年第4期466-468,442,共4页
人类KLHL31基因是本实验室已克隆的基因,其蛋白质含有保守的BTB和串连重复的Kelch结构域,已有报道表明其在人类成体骨骼肌和心肌组织中特异表达。RT-PCR分析表明在C2C12细胞肌原分化过程中过表达KLHL31能够提高肌原分化标志基因MyoD与My... 人类KLHL31基因是本实验室已克隆的基因,其蛋白质含有保守的BTB和串连重复的Kelch结构域,已有报道表明其在人类成体骨骼肌和心肌组织中特异表达。RT-PCR分析表明在C2C12细胞肌原分化过程中过表达KLHL31能够提高肌原分化标志基因MyoD与Myogenin的转录水平;荧光报告系统分析发现过表达KLHL31能够增强肌原分化相关基因MCK启动子的活性,表明KLHL31能够促进C2C12细胞的肌原分化。 展开更多
关键词 KLHL31 C2C12细胞 MYOD MYOGENIN 肌原分化
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人类新基因Bzw2的克隆、抗体制备及表达分析 被引量:1
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作者 姚力群 李志 +3 位作者 江志钢 万永奇 吴秀山 婺州 《激光生物学报》 CAS CSCD 2011年第6期798-801,共4页
Bzw2(basic leucine zipper and W2 domains 2)基因是人类心脏发育候选基因,它由bzip结构域和W2结构域构成。为了研究该基因在心脏发育过程中的作用,利用生物信息学信息克隆了人类Bzw2基因全长,将所得的片段插入到原核表达载体pGEXT-4T-... Bzw2(basic leucine zipper and W2 domains 2)基因是人类心脏发育候选基因,它由bzip结构域和W2结构域构成。为了研究该基因在心脏发育过程中的作用,利用生物信息学信息克隆了人类Bzw2基因全长,将所得的片段插入到原核表达载体pGEXT-4T-1载体中,利用BL21菌株表达该重组质粒,经过IPTG诱导,得到GST-Bzw2融合蛋白,蛋白经纯化分离后免疫新西兰大白兔,并用Western blotting检测抗体效价。利用抗体进行了心脏,肌肉,脑组织表达检测,结果显示,Bzw2在心脏,肌肉,脑组织中高表达。 展开更多
关键词 Bzw2 原核表达 多克隆抗体
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人类新基因RHBDL8的研究初报 被引量:1
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作者 朱传炳 朱莹 +4 位作者 曾伟奇 王跃群 李永青 婺州 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2004年第3期79-82,共4页
运用计算机克隆的方法获得了一个新的人同源基因,经国际基因命名委员会批准命名为Rhomboid,veinlet like8(RHBDL8).该基因位于7号染色体q11.23区域,mRNA全长约1.8kb,3'末端含有ATAAA的加尾信号,编码一段长434个氨基酸的蛋白质.该蛋... 运用计算机克隆的方法获得了一个新的人同源基因,经国际基因命名委员会批准命名为Rhomboid,veinlet like8(RHBDL8).该基因位于7号染色体q11.23区域,mRNA全长约1.8kb,3'末端含有ATAAA的加尾信号,编码一段长434个氨基酸的蛋白质.该蛋白质含有一个rhomboid保守区,且高度相似于一个未有研究的小鼠蛋白.其表达在胚胎期(23周)主要集中在大脑、心脏、骨骼肌,而在成体,除脑部依然有大量表达外,上述的其他部位表达量均大大降低.这种在发育过程中的表达变化提示我们该基因可能在这些器官的发育中起到了一定的调控作用. 展开更多
关键词 新基因 表达量 et-l 心脏 脑部 小鼠 量表 计算机克隆 同源基因 成体
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中国常染色体显性遗传骨胳石化症(II型)家系突变基因筛查研究初报
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作者 朱传炳 李芳 +5 位作者 吴嵩龄 李永青 王跃群 婺州 邓云 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2006年第2期104-105,共2页
为寻找骨胳石化症II的致病基因,从一患该病的家系成员收集血液,制备基因组DNA.应用PCR(聚合链式反应)技术和直接测序分析ClCN7的24个外显子,寻找基因变异.结果表明,除一些内含子中存在个别多态性外,所有成员均未检测到ClCN7基因突变,提... 为寻找骨胳石化症II的致病基因,从一患该病的家系成员收集血液,制备基因组DNA.应用PCR(聚合链式反应)技术和直接测序分析ClCN7的24个外显子,寻找基因变异.结果表明,除一些内含子中存在个别多态性外,所有成员均未检测到ClCN7基因突变,提示该基因不是本病常见的致病基因,在这个家系中ADOII可能归因于其他基因的突变. 展开更多
关键词 骨胳石化症 ClCN7 突变分析 多态性
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建立果蝇心脏发育候选基因CG3295的基因敲除系
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作者 夏琼 邓云 +7 位作者 邓志伟 廖丹 戴悦 万永奇 莫小阳 李永清 王跃群 婺州 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2009年第3期74-77,共4页
果蝇CG3295基因是哺乳动物基因RMND5在果蝇中的同源物,其功能未知.利用P转座子敲除技术进行果蝇CG3295基因的敲除研究,将果蝇14234系的P转座子与Δ2-3系中的转座酶基因组合到同一个体,使P转座子在体内敲掉目的基因.从后代挑选不含P转座... 果蝇CG3295基因是哺乳动物基因RMND5在果蝇中的同源物,其功能未知.利用P转座子敲除技术进行果蝇CG3295基因的敲除研究,将果蝇14234系的P转座子与Δ2-3系中的转座酶基因组合到同一个体,使P转座子在体内敲掉目的基因.从后代挑选不含P转座子和转座酶基因的500头雄蝇分别与缺失了CG3295基因的测交系交配,从后代筛选获得20个CG3295基因敲除候选系.进一步利用Hand-GFP系使候选系的心脏表达绿色荧光蛋白,在荧光显微镜下根据候选系是否表现心脏突变表型鉴定敲除系,最后获得了12个表现心脏突变表型的CG3295基因敲除系. 展开更多
关键词 果蝇 P转座子基因敲除 CG3295基因敲除系
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