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利用大肠杆菌表达系统制备抗VEGF螺旋-环-螺旋多肽及其纯化的研究
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作者 庹有朋 王刚 +5 位作者 叶正茂 藤井郁雄 万玉军 罗丽娟 李楠臻 岳晓敏 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期224-229,共6页
VEGF (血管内皮生长因子)是一种诱导肿瘤血管形成的作用最强、特异性最高的血管生长因子。本实验利用抗VEGF螺旋-环-螺旋多肽的基因M49,通过PCR技术扩增获得目的基因,构建原核表达pET-32a(+),转入大肠杆菌(Escherichia coli) BL21进行表... VEGF (血管内皮生长因子)是一种诱导肿瘤血管形成的作用最强、特异性最高的血管生长因子。本实验利用抗VEGF螺旋-环-螺旋多肽的基因M49,通过PCR技术扩增获得目的基因,构建原核表达pET-32a(+),转入大肠杆菌(Escherichia coli) BL21进行表达,并对目的蛋白进行诱导表达及纯化。结果表明PCR扩增得到186 bp基因片段,诱导表达后得到一个约为22 kD融合蛋白,并进一步使用SUMO蛋白酶切除标签,得到约3.5 kD目的蛋白,通过小鼠(Mus musculus)给药实验验证了目的蛋白的功能性。这将为下一步VEGF螺旋-环-螺旋多肽靶向药的研制提供了必要的条件。 展开更多
关键词 抗VEGF多肽 大肠杆菌表达系统 多肽纯化
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