期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到8篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
重组酶聚合酶恒温扩增结合乳胶微球试纸条快速检测金黄色葡萄球菌 被引量：10
1
作者 高建欣 藏雨轩 +2 位作者 杜欣军 李萍 王硕 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第1期168-172,共5页
通过建立一种将重组酶聚合酶恒温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与乳胶微球试纸条(latex microsphere test strips,LMTS)相结合的方法,快速检测金黄色葡萄球菌。根据金黄色葡萄球菌保守区序列(nuc)设计特异性引物,经RP... 通过建立一种将重组酶聚合酶恒温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与乳胶微球试纸条(latex microsphere test strips,LMTS)相结合的方法,快速检测金黄色葡萄球菌。根据金黄色葡萄球菌保守区序列(nuc)设计特异性引物,经RPA扩增后用LMTS检测,确定RPA-LMTS检测金黄色葡萄球菌的灵敏度和特异性。灵敏度结果显示RPA-LMTS检测限为500 fg DNA和1.2×101 CFU/mL纯菌液;特异性结果表明与沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌、产气肠杆菌和单增李斯特菌无交叉反应,特异性良好;用食物样品评估RPA-LMTS检测效果,结果显示经过增菌3小时后,RPA-LMTS可检测1.2×100 CFU/mL(g)的金黄色葡萄球菌。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 重组酶聚合酶等温扩增 乳胶微球试纸条 快速检测
下载PDF
TMEM16A钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞的表达及其电生理特性研究 被引量：6
2
作者 郝峰 白雪松 +6 位作者 鞠晓红 方芳 藏雨轩 朱杭飞 向国艳 张雲乔 袁忠海 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1633-1639,共7页
目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效... 目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效率和表达效果,杀稻瘟菌素(blasticidin)进行抗生素筛选,获取稳定表达TMEM16A的FRT细胞株。RT-PCR和免疫荧光检测TMEM16A于FRT细胞的表达情况;倒置荧光显微镜下观察TMEM16A在FRT细胞中的表达和定位;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFPH148Q/I152L检测TMEM16A钙激活氯离子通道的功能。结果:BamHⅠ和XbaⅠ双酶切的琼脂糖凝胶电泳和测序结果表明目的基因TMEM16A成功克隆到真核表达载体pUB6/V5中;RT-PCR和免疫荧光实验结果表明经杀稻瘟菌素筛选后的FRT细胞在mRNA和蛋白水平表达TMEM16A,倒置显微镜下观察结果表明TMEM16A在FRT细胞膜上有表达;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFP-H148Q/I152L证实稳定表达于FRT细胞的TMEM16A具有经典的钙激活氯离子通道特性。结论:FRT细胞可高效表达TMEM16A。TMEM16A是钙激活氯离子通道的分子基础。 展开更多
关键词 跨膜蛋白16A 钙激活氯离子通道 膜片钳术 Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞
下载PDF
YFP-H148Q/I152L在FRT细胞中的表达及其对碘离子敏感特性的研究 被引量：5
3
作者 郑锴 朱杭飞 +7 位作者 王长文 郭素红 李正祎 藏雨轩 张雲乔 郑岩 方芳 郝峰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期11-13,I0001,共4页
为探讨YFP-H148Q/I152L在FRT细胞中的表达及其对碘离子的敏感性,应用点突变试剂盒将真核表达载体YFP特异编码序列第148位氨基酸H突变为Q,第152位氨基酸I突变为L,脂质体介导将YFP-H148Q/I152L转染入稳定表达Ano2的FRT细胞中,应用荧光淬... 为探讨YFP-H148Q/I152L在FRT细胞中的表达及其对碘离子的敏感性,应用点突变试剂盒将真核表达载体YFP特异编码序列第148位氨基酸H突变为Q,第152位氨基酸I突变为L,脂质体介导将YFP-H148Q/I152L转染入稳定表达Ano2的FRT细胞中,应用荧光淬灭动力学试验检测YFP-H148Q/I152对其碘离子的敏感性。测序结果证实,成功将YFP突变为YFP-H148Q/I152L,且荧光淬灭动力学试验表明,表达YFP-H148Q/I152L的FRT细胞在加入激活剂和碘离子后,相对荧光强度显著下降。表明成功构建YFP-H148Q/I152L真核表达载体,并证实表达于FRT胞浆中的YFPH148Q/I152L具有对碘离子敏感的特性。 展开更多
关键词 YFP-H148Q/I152L FRT细胞 相对荧光强度
下载PDF
增强型绿色荧光蛋白融合对Ano1钙激活Cl-通道生理特性的影响 被引量：5
4
作者 郑锴 许会静 +6 位作者 藏雨轩 侯毅鞠 张丽 杨海鸥 朱洁 方芳 郝峰 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期623-628,共6页
本研究旨在探讨融合在Ano1钙激活Cl^-通道(anoctamin1)C末端的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)对Ano1生理特性的影响。分别构建融合和未融合EGFP的Ano1真核表达载体,通过脂质体介导分别将这两类真核表达载体转染至Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮(F... 本研究旨在探讨融合在Ano1钙激活Cl^-通道(anoctamin1)C末端的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)对Ano1生理特性的影响。分别构建融合和未融合EGFP的Ano1真核表达载体,通过脂质体介导分别将这两类真核表达载体转染至Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞,倒置荧光显微镜下观察融合和未融合EGFP的Ano1在FRT细胞中的表达与定位;荧光淬灭动力学检测Ano1转运I^-的能力。结果显示,融合和未融合EGFP的Ano1均表达于FRT细胞膜上,且均能被Ca^(2+)激活,融合和未融合EGFP的Ano1转运I^-的能力无明显差异。以上结果提示,Ano1和EGFP-Ano1具有相似的生理特性。 展开更多
关键词 融合蛋白 增强型绿色荧光蛋白 Ano1 生理特性 钙激活Cl^-通道
原文传递
重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的构建及其在FRT细胞中的表达和定位 被引量：3
5
作者 李凤娥 郝峰 +4 位作者 藏雨轩 马睿泽 孔繁利 刘磊 李艳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期273-277,428,共5页
目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-4提供实验依据。方法:应用RT-PCR方法获得a... 目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-4提供实验依据。方法:应用RT-PCR方法获得aquaporin-4编码区基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N1。经酶切和测序鉴定证实为aquaporin-4后,Lipofectamine 2000脂质体转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体至FRT细胞中,倒置荧光显微镜下观察aquaporin-4在FRT细胞中的表达和分布,并应用Western blotting法检测aquaporin-4蛋白的表达。同时检测转入FRT细胞内钙黄绿素的相对荧光强度以判断FRT细胞水通透性的状况。结果:EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切和测序重组载体结果证实目的基因aquaporin-4成功克隆到真核表达载体pEGFP-N1中。荧光显微镜下观察融合EGFP的aquaporin-4主要在FRT细胞膜上表达;Western blotting结果证实脂质体转染重组载体的FRT细胞表达aquaporin-4。转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的FRT细胞水通透性显著高于未转染的FRT细胞,其水通透性是未转染FRT细胞的1.65倍。结论:成功构建aquaporin-4真核表达载体,证实其可在FRT细胞中表达,并具有明显的膜蛋白特性和良好水通透性。 展开更多
关键词 AQUAPORIN-4 转染 FRT细胞 载体
下载PDF
混合式教学在生物化学与分子生物学教学中的研究与实践
6
作者 李自青 任美艳 +1 位作者 藏雨轩 邢雁霞 《山西大同大学学报（自然科学版）》 2024年第5期91-94,共4页
目的基于线上线下混合式一流课程的建设,将教师线下讲授和学生线上自主学习有机结合,培养学生良好的学习习惯,提高学习效率和课堂教学质量。方法依托超星尔雅平台生物化学与分子生物学在线课程,构建了生物化学与分子生物学混合式教学模... 目的基于线上线下混合式一流课程的建设,将教师线下讲授和学生线上自主学习有机结合,培养学生良好的学习习惯,提高学习效率和课堂教学质量。方法依托超星尔雅平台生物化学与分子生物学在线课程,构建了生物化学与分子生物学混合式教学模式,以山西大同大学医学院临床医学专业2022级本科生320人为研究对象,临床1~4班160人作为实验组进行混合式教学,5~8班160人作为对照组实施传统教学,开展课程教学评价。结果实验组和对照组期末总评成绩(总分100分)得分:实验组为80.5±2.2分,对照组为75.4±2.8分,差异具有统计学意义(P=0.023)。期末卷面成绩得分(总分100分):实验组为77.2±1.8分,对照组为72.2±2.1分,差异显著(P=0.012)。实验报告成绩得分(总分100分):实验组为92.3±1.6分,对照组为88.4±2.4分,有明显差异(P=0.018)。问卷调查结果显示,混合式教学法学生学习主动性(P<0.01)、课堂互动(P<0.01)方面与传统教学相比有明显优势;在学生的学习兴趣(P=0.024)、学习效果(P=0.025)方面比传统教学有明显提升。结论混合式教学很好地激发了学生的学习兴趣,促进了学生自主学习能力的培养,有效提高了课堂教学质量。 展开更多
关键词 在线课程 混合式教学 生物化学与分子生物学
下载PDF
限制性内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切条件的优化 被引量：2
7
作者 朱杭飞 姜晓明 +4 位作者 藏雨轩 张雲乔 向国艳 张中新 郝峰 《吉林医药学院学报》 2014年第4期250-253,共4页
目的探讨KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。方法 KpnⅠ和EcoRⅠ不同的酶切体系,酶切含有上述两种限制性内切酶酶切位点的载体pEGFP-Ano2,DNA琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果,以获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。结果 50μL酶切体系,KpnⅠ... 目的探讨KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。方法 KpnⅠ和EcoRⅠ不同的酶切体系,酶切含有上述两种限制性内切酶酶切位点的载体pEGFP-Ano2,DNA琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果,以获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。结果 50μL酶切体系,KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的适宜条件:首先在1×L缓冲液情况下,应用1μL KpnⅠ酶切1μg质粒1 h,再加入1×H缓冲液和0.01%BSA,应用1μL EcoRⅠ继续酶切1 h。结论获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切质粒的适宜条件,为今后应用KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切实验提供科学的参考依据。 展开更多
关键词 KpnⅠ EcoRⅠ 双酶切 优化 DNA琼脂糖凝胶电泳
下载PDF
Ano2是钙激活氯离子通道的分子基础
8
作者 藏雨轩 方芳 +4 位作者 朱杭飞 向国艳 张雲乔 李瑷彤 郝峰 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第11期1477-1481,共5页
目的探讨Ano2是否为钙激活氯离子通道的分子基础。方法用RT-PCR技术扩增Ano2编码基因,将Ano2连接到真核表达载体p EGFP-N3;通过脂质体介导将Ano2转染至FRT细胞,抗生素筛选获得稳定表达Ano2的细胞系;倒置荧光显微镜下观察Ano2在FRT细胞... 目的探讨Ano2是否为钙激活氯离子通道的分子基础。方法用RT-PCR技术扩增Ano2编码基因,将Ano2连接到真核表达载体p EGFP-N3;通过脂质体介导将Ano2转染至FRT细胞,抗生素筛选获得稳定表达Ano2的细胞系;倒置荧光显微镜下观察Ano2在FRT细胞中的表达和分布,Western blot检测Ano2的表达;全细胞膜片钳技术研究Ano2的电生理学特性。结果成功构建p EGFP-Ano2真核表达载体;Ano2表达在FRT细胞膜上;Ano2电流呈Ca2+、时间和电压依赖性,电流和电压关系呈外向整流。结论 Ano2是钙激活氯离子通道的分子基础。 展开更多
关键词 Ano2 FRT细胞 转染 钙激活氯离子通道
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部