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植物防御反应中活性氧的产生和作用 被引量：27
1
作者 蔡以滢 陈珈 《植物学通报》 CSCD 1999年第2期107-112,共6页
活性氧在植物抗病性中起着重要的作用。本文将对其在防御反应中的产生和作用进行简要的论述。
关键词 活性氧 防御反应 NADPH 氧化酶 抗病性
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Phytophthora palmi分泌的10.6kD蛋白激发烟草的过敏反应 被引量：5
2
作者 张宏明 蔡以滢 陈珈 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第11期1183-1186,共4页
从疫霉菌PhytophthorapalmivoraButler的培养滤液中分离出分子量为10．6kD的不含糖基的耐热蛋白。这种10．6kD蛋白能诱导烟草（NicotianatabacumL．）叶片发生过敏性坏死反应。而疫霉菌另一种P．melonisKatsura的培养滤液中不含这种类... 从疫霉菌PhytophthorapalmivoraButler的培养滤液中分离出分子量为10．6kD的不含糖基的耐热蛋白。这种10．6kD蛋白能诱导烟草（NicotianatabacumL．）叶片发生过敏性坏死反应。而疫霉菌另一种P．melonisKatsura的培养滤液中不含这种类似蛋白，不能诱导烟草叶片发生过敏反应。利用共聚焦激光扫描显微镜，以荧光探剂FDA（fluoresceindiacetate）指示细胞活性，DCFDA（2’，7’－dichlorodihydrofluoresceindiacetate）指示H2Q2的生成，结果表明用该蛋白处理的烟草叶片的叶肉、表皮和保卫细胞，以及悬浮培养细胞在产生过敏性坏死反应之前，均有H2Q2的大量生成。推测这种10．6kD蛋白属于elicitin类激发子。 展开更多
关键词 ELICITIN 激发子 氧化突发 过敏反应 烟草
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TNF_α基因在鱼腥藻 71 2 0中的表达及其产物的亲和层析纯化 被引量：7
3
作者 施定基 叶欣 +7 位作者 钟晖 蔡以滢 邵宁 彭国宏 董晓军 王春梅 欧阳叶新 李振甲 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第1期46-50,共5页
用转入TNF_α基因并稳定表达了 4年多的丝状体蓝藻———鱼腥藻 712 0 (Anabaenasp .PCC 712 0 ) ,研究比较了在培养液中氮源 (NaNO3 )和碳源 (NaAc)对转基因藻生长和TNF_α基因的不同影响。氮源能稳定外源蛋白的表达 ,而碳源则影响细... 用转入TNF_α基因并稳定表达了 4年多的丝状体蓝藻———鱼腥藻 712 0 (Anabaenasp .PCC 712 0 ) ,研究比较了在培养液中氮源 (NaNO3 )和碳源 (NaAc)对转基因藻生长和TNF_α基因的不同影响。氮源能稳定外源蛋白的表达 ,而碳源则影响细胞壁的合成。通过比较几种不同的破碎细胞的方法 ,发现超声破碎得到的可溶性总蛋白含量和TNF_α含量均要比冻融法高出 1倍左右 ,经过细胞破碎、硫酸铵分级沉淀、常压离子交换液相层析后 ,除去杂蛋白及大量容易堵柱的糖类等物质 ,最后通过亲和柱层析 ,分离出了纯的目标蛋白———重组肿瘤坏死因子 (TNF_α)。经凝胶电泳鉴定为单一的谱带 ,分子量为 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子α 转基因蓝藻 鱼腥藻7120 亲和层析 表达 产物
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烟草-烟草花叶病毒互作中的质膜NADPH氧化酶 被引量：3
4
作者 蔡以滢 张宏明 陈珈 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第10期1094-1098,共5页
以NN烟草(NicotianatabacumL.)品种“SamsunNN”(与烟草花叶病毒(TMV)发生非亲和互作)和普通烟草(N.tabacumL.)“3002”品种(与TMV发生亲和互作)叶片为材料,采用差速离心法和两相法制备密闭的正向型质膜(PM)囊泡。用SOD敏感的依赖于NADP... 以NN烟草(NicotianatabacumL.)品种“SamsunNN”(与烟草花叶病毒(TMV)发生非亲和互作)和普通烟草(N.tabacumL.)“3002”品种(与TMV发生亲和互作)叶片为材料,采用差速离心法和两相法制备密闭的正向型质膜(PM)囊泡。用SOD敏感的依赖于NADPH的Cytc的还原表示质膜NADPH氧化酶产生超氧阴离子(O-·2)的活性。加入0.01%TritonX_100可使酶活性提高约80%,证明NADPH结合位点在质膜电子载体蛋白胞质结构域上,而O-·2在质膜外侧生成,在反应过程中发生了跨质膜的电子传递。质膜NADPH氧化酶的活性可部分地被哺乳动物NADPH氧化酶的专一性抑制剂DPI(diphenyleneiodonium)抑制,最大抑制达70%。受TMV侵染后,NN烟草NADPH氧化酶活性显著升高,而普通烟草的酶活性基本不变。 展开更多
关键词 NADPH 氧化酶 烟草 烟草花叶病毒 质膜
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烟草—TMV相互作用中质膜NADPH氧化酶的组装 被引量：4
5
作者 蔡以滢 唐慧 +1 位作者 张宏明 陈珈 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期600-600,共1页
比较 Ｎ Ｎ 烟草（与烟草花叶病毒（ Ｔ Ｍ Ｖ）发生非亲和相互作用）和普通烟草 ３００２ 品种（与 Ｔ Ｍ Ｖ 发生亲和相互作用）在烟草— Ｔ Ｍ Ｖ 的相互作用中质膜 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶的组装激活、产生活性氧的差异．用两相法... 比较 Ｎ Ｎ 烟草（与烟草花叶病毒（ Ｔ Ｍ Ｖ）发生非亲和相互作用）和普通烟草 ３００２ 品种（与 Ｔ Ｍ Ｖ 发生亲和相互作用）在烟草— Ｔ Ｍ Ｖ 的相互作用中质膜 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶的组装激活、产生活性氧的差异．用两相法制备密闭的正向型质膜（ Ｐ Ｍ）囊泡，以 Ｓ Ｏ Ｄ 敏感的 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 依赖的 Ｃｙｔ ｃ 的还原表示 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶的活性，用人类噬中性白细胞 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶亚基 ｐ４７ｐｈｏｘ 的抗体对烟草叶片蛋白进行免疫学检测．结果显示在两种烟草叶片胞质中均存在与 ｐ４７ｐｈｏｘ 亚基的抗体发生免疫交叉反应的相同分子量的蛋白，该蛋白在 Ｔ Ｍ Ｖ 侵染 Ｎ Ｎ 基因烟草后可向质膜发生转移，且伴随有氧化酶活性的升高．而对于普通烟草则无氧化酶膜组分和酶活性的明显变化．以上结果表明，烟草叶片质膜上存在与哺乳动物 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶相类似的氧化酶，它的组装和激活可能是烟草— Ｔ Ｍ Ｖ 非亲和相互作用早期活性氧的主要来源． 展开更多
关键词 NADPH氧化酶 超氧阴离子 烟草 TMV 质膜
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