术前血小板与淋巴细胞计数比值预测进展期胃癌腹膜转移 被引量：6

1

作者 庞文洋 陈文静 +2 位作者 朱冠保 胡畅远 蔡一奇 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2019年第10期828-832,共5页

目的研究进展期胃癌患者术前血小板与淋巴细胞计数比值(platelet-to-lyrnphocyte ratio,PLR)和中性粒细胞与淋巴细胞计数比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)在腹膜转移中的预测价值.方法回顾性分析2009年1月至2012年1月在温州医... 目的研究进展期胃癌患者术前血小板与淋巴细胞计数比值(platelet-to-lyrnphocyte ratio,PLR)和中性粒细胞与淋巴细胞计数比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)在腹膜转移中的预测价值.方法回顾性分析2009年1月至2012年1月在温州医科大学附属第一医院行手术治疗的701例经术后病理确诊的进展期胃癌患者的临床病理资料.结果单因素分析结果表明,进展期胃癌腹膜转移与肿瘤位置、肿瘤大小、浆膜浸润、分化程度、淋巴结转移及PLR均有关(均P<0.05).根据ROC曲线,PLR预测进展期胃癌腹膜转移的最佳阈值为132.43(灵敏度71.8%,特异度50.6%).高PLR组与低PLR组胃癌患者的肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移及浆膜浸润差异均有统计学意义(均P<0.05).Logistic多因素回归分析结果显示,进展期胃癌腹膜转移的独立危险因素有肿瘤大小(HR=1.150,P=0.014)、PLR(HR=2.205,P=0.003)及淋巴结转移(HR=3.113,P=0.010).结论术前PLR具有预测进展期胃癌腹膜转移的价值,并且是影响胃癌腹膜转移的独立危险因素. 展开更多

关键词 胃肿瘤 血小板 淋巴细胞 肿瘤转移

原文传递

人宫颈癌SiHa细胞荷瘤裸鼠模型的建立及鉴定 被引量：6

2

作者 侯柏龙 杜王琪 +5 位作者 熊一融 蔡一奇 宋易玲 林晓云 薛向阳 张丽芳 《温州医科大学学报》 CAS 2016年第2期92-96,共5页

目的:建立人宫颈癌SiHa细胞裸小鼠体表荷瘤模型,并对其成瘤特性进行分析和鉴定。方法:将5×10~6/mL、1×10~7/mL及5×10~7/mL 3个浓度的SiHa细胞悬液分别在3组裸小鼠背部右腋近上肢皮下接种,建立人宫颈癌裸小鼠体表荷瘤模型... 目的:建立人宫颈癌SiHa细胞裸小鼠体表荷瘤模型,并对其成瘤特性进行分析和鉴定。方法:将5×10~6/mL、1×10~7/mL及5×10~7/mL 3个浓度的SiHa细胞悬液分别在3组裸小鼠背部右腋近上肢皮下接种,建立人宫颈癌裸小鼠体表荷瘤模型,观察荷瘤裸鼠的成瘤率并测量肿瘤的大小,5周后取肿瘤组织经病理学方法观察其组织学特性,并采用PCR及免疫组织化学方法对肿瘤组织的HPV16E7 DNA表达进行检测。结果:3组裸小鼠接种SiHa细胞的成瘤率均为100%,5周后肿瘤大小分别达到(77.29±28.34)mm^3、(178.91±61.55)mm^3和(305.11±12.62)mm^3。3个浓度组间肿瘤体积大小差异有统计学意义(P<0.001)。病理学大体观察可见SiHa肿瘤的生长均以局部浸润为主;组织切片观察新生肿瘤细胞特点呈现体积大、核大深染及易见核分裂相的病理性特征;SiHa新生肿瘤组织经PCR检测证实了HPV16E7 DNA阳性,并经免疫组织化学检测证实了HPV16E7蛋白表达阳性。结论:成功建立了SiHa细胞荷瘤裸鼠模型,为人宫颈癌肿瘤靶向治疗及生物学特性研究提供了理想的动物模型。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 动物模型 BALB/c-nu裸小鼠 SIHA细胞

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MAGEA3基因表达对亚洲胃癌患者免疫微环境的影响

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作者 金劲激 蔡一奇 +2 位作者 杨佳欣 程骏 王鹏飞 《温州医科大学学报》 CAS 2023年第11期896-904,共9页

目的:通过对亚洲肿瘤研究组(ACRG)中的胃癌数据集进行生物信息学分析并收集临床胃癌患者血清进行验证,揭示MAGEA3基因对亚洲胃癌患者免疫微环境的影响。方法:从GEO下载GSE52254/ACRG数据集,根据MAGEA3基因表达值的中位数,将300例胃癌患... 目的:通过对亚洲肿瘤研究组(ACRG)中的胃癌数据集进行生物信息学分析并收集临床胃癌患者血清进行验证,揭示MAGEA3基因对亚洲胃癌患者免疫微环境的影响。方法:从GEO下载GSE52254/ACRG数据集,根据MAGEA3基因表达值的中位数,将300例胃癌患者分为MAGEA3高表达组和低表达组。然后应用ESTIMATE和CIBERSORT计算方法计算两组胃癌组织免疫和基质成分的数量以及22种浸润淋巴细胞的比例,通过比较两组间免疫微环境及免疫细胞浸润的差异,利用GSEA进一步分析相关通路的变化以确定MAGEA3对胃癌免疫微环境的影响。收集2022年1月至2022年4月在温州医科大学附属第一医院胃肠外科住院的86例胃癌患者血清,通过ELISA法检测血清中MAGEA3表达量,并使用流式细胞技术检测血清中不同淋巴细胞亚群的数量,分析MAGEA3蛋白与外周血淋巴细胞亚群的相关性。结果:ESTIMATE结果显示MAGEA3高表达组的免疫评分、基质评分均显著低于MAGEA3低表达组(P<0.001),并通过Spearman分析发现MAGEA3表达与免疫评分(r=-0.244,P<0.001)、基质评分(r=-0.266,P<0.001)呈负相关。GSEA分析进一步提示MAGEA3低表达组存在T细胞活化、增殖、巨噬细胞活化以及免疫细胞调节的相关通路富集。CIBERSORT结果提示在MAGEA3低表达组中,幼稚B细胞、浆细胞、CD8^(+)T细胞、γδT细胞、激活的NK细胞浸润更多,而巨噬细胞M0浸润更少。通过临床胃癌血清样本MAGEA3蛋白ELISA检测以及流式细胞检测血清中各淋巴细胞亚群发现,MAGEA3表达与CD8^(+)T细胞数量呈显著负相关(r=-0.310,P=0.004),结果与ACRG数据分析一致。结论:MAGEA3的表达水平可能通过影响胃癌免疫微环境的免疫细胞发挥作用,同时也提示了MAGEA3可能是胃癌免疫治疗的潜在靶点和生物标志物。 展开更多

关键词 MAGEA3 胃肿瘤 亚洲 肿瘤免疫 肿瘤微环境

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影像组学在胃肿瘤诊疗中的应用进展 被引量：4

4

作者 蔡一奇 施明明 +5 位作者 许利斌 陈孝冬 章巍腾 胡畅远 朱冠保 王鹏飞 《温州医科大学学报》 CAS 2020年第12期1025-1029,共5页

自2012年影像组学的概念被提出至今,该技术已在临床上得到广泛有效的应用。在此,我们采用文献回顾的方法,对近年来国内、外有关胃肿瘤的影像组学研究加以综述并分析,阐述影像组学在胃肿瘤的精准诊疗中的优势及其当前的局限性,为今后影... 自2012年影像组学的概念被提出至今,该技术已在临床上得到广泛有效的应用。在此,我们采用文献回顾的方法,对近年来国内、外有关胃肿瘤的影像组学研究加以综述并分析,阐述影像组学在胃肿瘤的精准诊疗中的优势及其当前的局限性,为今后影像组学在胃肿瘤诊疗中的应用提供研究的思路。 展开更多

关键词 胃肿瘤 影像组学 诊疗 综述

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microRNA-212对胃癌细胞系SGC7901迁移和侵袭能力的影响 被引量：4

5

作者 应江辉 蒋佩佩 +3 位作者 金灿灿 庞文洋 蔡一奇 朱冠保 《温州医科大学学报》 CAS 2016年第9期644-648,共5页

目的:研究人microRNA-212(miR-212)对胃癌细胞系SGC7901迁移和侵袭能力的影响。方法:通过化学方法合成人成熟型miR-212抑制基因i-miR-212,分别以25、50、75、100 nmol/L浓度通过脂质体转染方法转染SGC7901细胞,同时设空白组和无序列对... 目的:研究人microRNA-212(miR-212)对胃癌细胞系SGC7901迁移和侵袭能力的影响。方法:通过化学方法合成人成熟型miR-212抑制基因i-miR-212,分别以25、50、75、100 nmol/L浓度通过脂质体转染方法转染SGC7901细胞,同时设空白组和无序列对照组。采用Real-time PCR、细胞计数和Transwell小室等实验方法,分别检测各组细胞miR-212的表达、miR-212对细胞增殖的影响及miR-212对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:各浓度i-miR-212转染SGC7901细胞后,miR-212表达均降低,以50 nmol/L i-miR-212转染组最佳,较无序列对照组降低约94.60%;50 nmol/L i-miR-212转染组与无序列对照组在细胞计数上差异有统计学意义(P<0.01)。在细胞侵袭实验中50 nmol/L i-miR-212转染组透膜细胞明显多于无序列对照组(P<0.01),在迁移实验中i-miR-212转染组(50 nmol/L)的透膜细胞明显多于无序列对照组(P<0.01)。结论:转染成熟型人i-miR-212能使胃癌细胞系SGC7901细胞中miR-212的表达明显下降,并能显著促进胃癌细胞系SGC7901的增殖、迁移及侵袭能力,表明miR-212与胃癌肿瘤细胞的转移具有相关性。 展开更多

关键词 胃癌 microRNA-212 迁移 侵袭 增殖

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MAGE-A3多克隆抗体的制备及在胃癌细胞检测中的应用 被引量：3

6

作者 蔡一奇 程开 +8 位作者 陈旭东 陈孝冬 岑丹维 张婵琼 宋易玲 毛姗姗 叶晓鲜 张丽芳 朱冠保 《温州医科大学学报》 CAS 2017年第5期318-324,共7页

目的:通过原核表达系统制备人黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)蛋白,制备其多克隆抗体,经鉴定后用于胃癌细胞检测。方法:将MAGE-A3全长核酸序列经原核密码子优化后全基因序列合成,克隆至原核表达载体pET21a(+),构建pET21a(+)/MAGE-A3重组质粒,... 目的:通过原核表达系统制备人黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)蛋白,制备其多克隆抗体,经鉴定后用于胃癌细胞检测。方法:将MAGE-A3全长核酸序列经原核密码子优化后全基因序列合成,克隆至原核表达载体pET21a(+),构建pET21a(+)/MAGE-A3重组质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达MAGE-A3蛋白,并经SDS-PAGE及Western blot分析鉴定;纯化后的MAGE-A3蛋白免疫日本大耳白兔制备多克隆血清抗体,用ELISA、Western blot、免疫荧光技术分析该多克隆抗体的特异性,并用免疫组织化学技术鉴定MAGE-A3兔多克隆抗体在人胃癌细胞免疫检测应用中的可行性。结果:成功构建重组质粒pET21a(+)/MAGE-A3,并经原核表达系统表达MAGE-A3蛋白。SDS-PAGE显示目的蛋白分子质量大小约为48 k Da,与预期蛋白大小一致,并以His单抗进行Western blot鉴定,出现了特异性的单一条带。MAGEA3蛋白免疫日本大耳白兔,可诱导兔产生特异性抗体,免疫后第8周达到高峰,经Western blot检测显示多克隆血清可特异性识别靶蛋白,出现阳性单一条带;经免疫荧光检测显示,在MAGE-A3阳性细胞A-375(黑色素瘤细胞株)和SGC-7901细胞(胃癌细胞株)的胞浆内出现荧光团块。表明兔多克隆抗体可特异性识别天然的MAGE-A3蛋白。结合免疫荧光结果后经ELISA检测,可认为该多克隆Ig G抗体效价可达1:40 000;免疫组织化学检测显示在A-375和SGC-7901肿瘤组织的胞浆内出现团块状棕黄色颗粒样沉淀,而在BGC-823肿瘤组织中呈阴性,表明制备的MAGE-A3兔多克隆抗体能够特异性地识别肿瘤组织中MAGE-A3蛋白。结论:通过原核表达系统制备了MAGE-A3蛋白,并免疫兔制备了MAGE-A3蛋白特异性兔多克隆抗体,同时可以特异性地识别人胃癌细胞中的MAGE-A3蛋白,可作为免疫诊断用抗原。 展开更多

关键词 人黑色素瘤抗原A3 原核表达系统 多克隆抗体 胃肿瘤

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hsa_circ_0001322在胃癌组织中的表达及其临床意义

7

作者 武文一 白永愉 +3 位作者 庄晓鹏 蔡一奇 周珠哈 阮小蛟 《温州医科大学学报》 2022年第2期104-108,共5页

目的:探讨hsa_circ_0001322在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:收集2019年10月至2020年4月温州医科大学附属第一医院收治的54例胃癌患者肿瘤组织及其癌旁正常胃黏膜组织,采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胃癌组织及其正... 目的:探讨hsa_circ_0001322在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:收集2019年10月至2020年4月温州医科大学附属第一医院收治的54例胃癌患者肿瘤组织及其癌旁正常胃黏膜组织,采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胃癌组织及其正常胃黏膜组织中hsa_circ_0001322的相对表达量并分析其与临床病理特征的关系。结果:胃癌组织hsa_circ_0001322相对表达量低于癌旁正常胃黏膜组织(0.309 vs.1.000,P<0.05)。临床病理特征关联分析发现淋巴结转移组患者胃癌组织中hsa_circ_0001322的相对表达量低于无淋巴结转移组(0.208 vs.0.391,P<0.05),偏相关分析结果表明排除患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、肿瘤浸润深度和细胞分化程度的影响后,hsa_circ_0001322的表达量与胃癌的淋巴结转移存在负相关(r=-0.587,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示hsa_circ_0001322的相对表达量判断胃癌发生淋巴结转移的曲线下面积(AUC)为0.808,以相对表达量0.254作为截断值时,其敏感度和特异度分别为90.0%和75.0%。结论:hsa_circ_0001322在胃癌组织中相对低表达,并且其表达变化与淋巴结转移显著相关,可能是胃癌诊断和预测淋巴结转移的潜在生物标志物。 展开更多

关键词 circRNA hsa_circ_0001322 胃癌 分化 淋巴结转移

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多线靶向治疗联合减瘤术、介入疗法治疗晚期胃肠外间质瘤1例

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作者 陈珊 蔡一奇 +3 位作者 张琳烨 张晓珂 宋文品 王鹏飞 《温州医科大学学报》 CAS 2022年第8期682-685,共4页

胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是最常见的消化道间叶源性肿瘤,主要发生于消化道,仅少部分发生于肝、肠系膜、腹膜、腹膜后等其他部位[1],称为胃肠外间质瘤(extra-gastrointestinal stromal tumor,EGIST),恶性程度较... 胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是最常见的消化道间叶源性肿瘤,主要发生于消化道,仅少部分发生于肝、肠系膜、腹膜、腹膜后等其他部位[1],称为胃肠外间质瘤(extra-gastrointestinal stromal tumor,EGIST),恶性程度较高。根治性手术切除联合化疗是其主要治疗手段,但部分患者仍会出现复发及转移[2]。现笔者报告晚期子宫直肠间隙内GIST 1例,根治性手术后采用多线靶向药物,联合多次减瘤术、介入术治疗,肿瘤控制较好,并结合该病例复习国内外文献如下。 展开更多

关键词 胃肠外间质瘤 靶向治疗 减瘤术 介入治疗

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人颗粒酶B融合蛋白的原核表达及其免疫血清的制备

9

作者 汪文寰 冯方方 +6 位作者 蔡一奇 张婵琼 岑丹维 宋易玲 郭刚强 张丽芳 李文姝 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期234-238,共5页

目的在原核体系中表达人颗粒酶B(granzyme B,Gzm B)融合蛋白,并制备Gzm B免疫血清多克隆抗体。方法构建Gzm B原核表达重组质粒p ET32a-Gzm B,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达重组Gzm B(r Gzm B)蛋白,镍离子螯合亲和层析柱纯化表... 目的在原核体系中表达人颗粒酶B(granzyme B,Gzm B)融合蛋白,并制备Gzm B免疫血清多克隆抗体。方法构建Gzm B原核表达重组质粒p ET32a-Gzm B,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达重组Gzm B(r Gzm B)蛋白,镍离子螯合亲和层析柱纯化表达产物。以纯化的r Gzm B蛋白为免疫原,皮下多点注射BALB/c小鼠,共免疫3次,分别于免疫后2、4、6周经小鼠尾静脉采血,分离血清,间接ELISA法检测免疫血清中Gzm B特异性Ig G抗体水平,并确定其抗体最大稀释度,免疫斑点试验检测免疫血清多克隆抗体对Gzm B的特异免疫结合特性。结果质粒p ET32aGzm B经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的r Gzm B蛋白相对分子质量为48 000;纯化的r Gzm B蛋白免疫小鼠血清中Gzm B特异性Ig G抗体水平随免疫时间延长至第4周达到高峰,随后维持一定水平;抗体最大稀释度为1∶1 600;r Gzm B免疫血清能够特异地结合Gzm B,显示了其免疫结合特性。结论制备了r Gzm B蛋白和Gzm B小鼠免疫血清多克隆抗体,为后续开展Gzm B的靶向杀伤、靶向检测等应用研究奠定了基础。 展开更多

关键词 颗粒酶B 原核表达 多克隆抗体

原文传递

piRNA在胃癌与正常胃黏膜组织中表达的比较

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作者 蒋佩佩 蔡一奇 +7 位作者 王鹏飞 陈孝冬 金劲激 胡畅远 陈文静 薛向阳 张丽芳 朱冠保 《温州医科大学学报》 CAS 2017年第10期708-712,共5页

目的:分析piRNA在胃癌组织与正常胃黏膜组织中表达的差异性。方法:通过新一代高通量测序技术Solexa对胃癌组织和正常胃黏膜组织进行小分子RNA(s RNA)深度测序,并通过生物信息学分析胃癌组织与正常胃黏膜组织中piRNA的表达差异。根据分... 目的:分析piRNA在胃癌组织与正常胃黏膜组织中表达的差异性。方法:通过新一代高通量测序技术Solexa对胃癌组织和正常胃黏膜组织进行小分子RNA(s RNA)深度测序,并通过生物信息学分析胃癌组织与正常胃黏膜组织中piRNA的表达差异。根据分析结果选取4种piRNA(登录号分别为DQ570956、DQ575659、DQ594126和DQ597128),通过茎环反转录实时定量PCR(简称茎环RT-q PCR)技术验证其存在及其在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达差异。结果:Solexa深度测序结果显示,正常胃黏膜与胃癌组织中测得的piRNA种类在各标本所测得所有s RNA种类中所占的比例差异无统计学意义(Z=0.835,P=0.678);正常胃黏膜组织中测得的piRNA数量在各标本所测得s RNA总量中所占的比例高于胃癌组织,差异有统计学意义(Z=2.167,P=0.042);根据分析结果选取4种piRNA,经茎环RT-q PCR法检测显示,这4种piRNA在胃癌组织中的表达量显著低于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌组织存在多种差异表达的piRNA,且在表达量上与正常胃黏膜组织存在显著性差异,本研究选取的4种piRNA可能参与胃癌的发生发展进程。 展开更多

关键词 胃肿瘤 PIRNA 小分子RNA 聚合酶链反应

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EB病毒潜伏膜蛋白2B表位特异性兔血清抗体的制备和鉴定

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作者 张婵琼 宋易玲 +6 位作者 岑丹维 蔡一奇 叶晓鲜 毛珊珊 蒋朋飞 李文姝 张丽芳 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第10期871-875,880,共6页

目的制备EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白2(LMP2)串联B表位特异的兔血清多克隆抗体。方法利用分子克隆技术,将已鉴定的EBV LMP2蛋白的3个B细胞表位,即RIEDPPFNSLL,TLNLT和KSLSSTEFIPN,以柔性肽(GS)加以串联连接,经原核密码子优化后全基因合成,并... 目的制备EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白2(LMP2)串联B表位特异的兔血清多克隆抗体。方法利用分子克隆技术,将已鉴定的EBV LMP2蛋白的3个B细胞表位,即RIEDPPFNSLL,TLNLT和KSLSSTEFIPN,以柔性肽(GS)加以串联连接,经原核密码子优化后全基因合成,并经BamHⅠ和HindⅢ酶切位点克隆至pET32a(+)载体,测序鉴定正确的重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3),用异丙基硫代-B-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,对表达蛋白进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定。用镍螯合亲和层析柱(Ni-NTA Agarose)纯化表达产物,与佐剂乳化后皮下多点注射日本大耳白兔,隔周免疫1次,共3次。分别于免疫的0、2、4、6、8周取血,采用ELISA方法检测IgG抗体水平,采用Western blot和细胞免疫荧光法检测兔血清抗体的免疫反应性和结合特异性。结果 EBV LMP2B表位重组蛋白可通过原核表达系统进行表达,纯化的表达蛋白免疫兔可产生特异性IgG抗体,效价达1∶30 000。经Western blot法和细胞免疫荧光法鉴定,制备的兔血清抗体可识别LMP2重组蛋白和LMP2天然蛋白。结论成功获得了EBV LMP2串联B表位重组蛋白,制备的兔多克隆血清抗体效价高,特异性强,为LMP2的生物学和免疫学研究奠定了基础。 展开更多

关键词 EB病毒潜伏膜蛋白2 原核表达 抗体制备

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道路桥梁施工中混凝土裂缝成因分析及应对措施

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作者 蔡一奇 《市场调查信息（综合版）》 2020年第9期146-146,共1页

道路桥梁是交通设施中极其重要的一部分,道路桥梁的建设度对居民的出行及社会经济的发展均起到了积极的意义。但是在对道路桥梁工程的特点进行分析后发现,其具有较强的综合性。施工的过程中极易出现裂缝,对施工质量及工程质量均造成了... 道路桥梁是交通设施中极其重要的一部分,道路桥梁的建设度对居民的出行及社会经济的发展均起到了积极的意义。但是在对道路桥梁工程的特点进行分析后发现,其具有较强的综合性。施工的过程中极易出现裂缝,对施工质量及工程质量均造成了较大的影响。本次研究对施工中引发裂缝的成因进行了分析,制定了相应的预防对策。 展开更多

关键词 道路桥梁 施工 建设质量 裂缝成因 预防对策

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