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绵阳地区山羊粪便中捻转血矛线虫的分子鉴定
被引量:
4
1
作者
蒲
善
秋
简克灵
+4 位作者
李波
谢跃
何冉
杨光友
古小彬
《四川畜牧兽医》
2020年第1期25-28,共4页
为鉴定绵阳地区山羊粪便中疑似血矛属线虫虫卵的虫种,本研究提取绵阳地区三个县山羊粪便中疑似血矛属线虫的虫卵DNA 60份,采用PCR技术扩增其核糖体第二内转录间隔区(rDNA ITS-2)基因序列,并与GenBank上公布的捻转血矛线虫同源序列进行...
为鉴定绵阳地区山羊粪便中疑似血矛属线虫虫卵的虫种,本研究提取绵阳地区三个县山羊粪便中疑似血矛属线虫的虫卵DNA 60份,采用PCR技术扩增其核糖体第二内转录间隔区(rDNA ITS-2)基因序列,并与GenBank上公布的捻转血矛线虫同源序列进行比较分析。结果显示:60份疑似血矛属线虫的虫卵DNA样品均得到191bp的ITS-2片段;60条ITS-2序列共形成15条不同的序列,含有17个单变异位点,与GenBank中多株捻转血矛线虫的同源性达95.8%~100%;ML系统发育树显示,本研究得到的15种类型ITS-2序列与已报道的捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)聚类形成一个分支。综上可得,60份来自山羊的血矛属线虫均为捻转血矛线虫。
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关键词
捻转血矛线虫
山羊
分子鉴定
ITS-2
基因多态性
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职称材料
绵羊痒螨兔亚种MMP2基因的转录水平及其重组蛋白间接ELISA的建立
被引量:
1
2
作者
葛优
郑晶
+7 位作者
蒲
善
秋
周宇
黄翠锐
杨光友
谢跃
何冉
徐璟
古小彬
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期567-575,共9页
本研究旨在分析绵羊痒螨兔亚种MMP2基因(PocMMP2)的虫体转录水平,及建立针对重组PocMMP2(rPocMMP2)蛋白抗体的间接ELISA检测方法(iELISA)。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定PocMMP2在不同发育阶段虫体、饱食与饥饿虫体的转录水平,采用...
本研究旨在分析绵羊痒螨兔亚种MMP2基因(PocMMP2)的虫体转录水平,及建立针对重组PocMMP2(rPocMMP2)蛋白抗体的间接ELISA检测方法(iELISA)。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定PocMMP2在不同发育阶段虫体、饱食与饥饿虫体的转录水平,采用原核表达系统获得rPocMMP2,经方阵滴定法优化反应条件,建立rPocMMP2-iELISA,并用该方法检测成都地区有痒螨病流行病史兔场的86份兔血清。结果显示:PocMMP2在雌虫、雄虫、若虫和幼虫阶段均有表达,且在饥饿虫体的转录水平显著高于饱食虫体(P<0.05);rPocMMP2约72 ku,主要存在于包涵体中;rPocMMP2-iELISA临界值为0.223,敏感性和特异性分别为86.0%和83.3%,受试者工作曲线下面积(AUC)为0.876,批内与批间重复性变异系数均小于10.00%;该方法的临床检测呈现74.42%的血清阳性检出率(64/86),高于病原学检出率(10.47%,9/86)。PocMMP2可能参与了绵羊痒螨兔亚种发育和入侵宿主过程,且所建立的rPocMMP2-iELISA有良好的敏感性、特异性和较高的重复性,可用于兔痒螨病的血清抗体检测。
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关键词
绵羊痒螨兔亚种
MMP2
转录水平
原核表达
间接ELISA
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职称材料
题名
绵阳地区山羊粪便中捻转血矛线虫的分子鉴定
被引量:
4
1
作者
蒲
善
秋
简克灵
李波
谢跃
何冉
杨光友
古小彬
机构
四川农业大学动物医学院
四川省绵阳市动物疫病预防控制中心
出处
《四川畜牧兽医》
2020年第1期25-28,共4页
基金
四川农业大学学科“双支计划”(SC-03573070)
文摘
为鉴定绵阳地区山羊粪便中疑似血矛属线虫虫卵的虫种,本研究提取绵阳地区三个县山羊粪便中疑似血矛属线虫的虫卵DNA 60份,采用PCR技术扩增其核糖体第二内转录间隔区(rDNA ITS-2)基因序列,并与GenBank上公布的捻转血矛线虫同源序列进行比较分析。结果显示:60份疑似血矛属线虫的虫卵DNA样品均得到191bp的ITS-2片段;60条ITS-2序列共形成15条不同的序列,含有17个单变异位点,与GenBank中多株捻转血矛线虫的同源性达95.8%~100%;ML系统发育树显示,本研究得到的15种类型ITS-2序列与已报道的捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)聚类形成一个分支。综上可得,60份来自山羊的血矛属线虫均为捻转血矛线虫。
关键词
捻转血矛线虫
山羊
分子鉴定
ITS-2
基因多态性
Keywords
Haemonchus contortus
Goat
Molecular identification
ITS-2
Gene Polymorphism
分类号
S852.731 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
绵羊痒螨兔亚种MMP2基因的转录水平及其重组蛋白间接ELISA的建立
被引量:
1
2
作者
葛优
郑晶
蒲
善
秋
周宇
黄翠锐
杨光友
谢跃
何冉
徐璟
古小彬
机构
四川农业大学动物医学院
中华人民共和国成都海关技术中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期567-575,共9页
基金
四川省科技计划重点研发项目(2019YFN0155)
四川农业大学学科双支计划(2021993259)。
文摘
本研究旨在分析绵羊痒螨兔亚种MMP2基因(PocMMP2)的虫体转录水平,及建立针对重组PocMMP2(rPocMMP2)蛋白抗体的间接ELISA检测方法(iELISA)。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定PocMMP2在不同发育阶段虫体、饱食与饥饿虫体的转录水平,采用原核表达系统获得rPocMMP2,经方阵滴定法优化反应条件,建立rPocMMP2-iELISA,并用该方法检测成都地区有痒螨病流行病史兔场的86份兔血清。结果显示:PocMMP2在雌虫、雄虫、若虫和幼虫阶段均有表达,且在饥饿虫体的转录水平显著高于饱食虫体(P<0.05);rPocMMP2约72 ku,主要存在于包涵体中;rPocMMP2-iELISA临界值为0.223,敏感性和特异性分别为86.0%和83.3%,受试者工作曲线下面积(AUC)为0.876,批内与批间重复性变异系数均小于10.00%;该方法的临床检测呈现74.42%的血清阳性检出率(64/86),高于病原学检出率(10.47%,9/86)。PocMMP2可能参与了绵羊痒螨兔亚种发育和入侵宿主过程,且所建立的rPocMMP2-iELISA有良好的敏感性、特异性和较高的重复性,可用于兔痒螨病的血清抗体检测。
关键词
绵羊痒螨兔亚种
MMP2
转录水平
原核表达
间接ELISA
Keywords
Psoroptes ovis var.cuniculi
MMP2
transcription level
prokaryotic expression
indirect ELISA
分类号
S852.746 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绵阳地区山羊粪便中捻转血矛线虫的分子鉴定
蒲
善
秋
简克灵
李波
谢跃
何冉
杨光友
古小彬
《四川畜牧兽医》
2020
4
下载PDF
职称材料
2
绵羊痒螨兔亚种MMP2基因的转录水平及其重组蛋白间接ELISA的建立
葛优
郑晶
蒲
善
秋
周宇
黄翠锐
杨光友
谢跃
何冉
徐璟
古小彬
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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职称材料
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