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线粒体损伤在脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡中的作用 被引量：6
1
作者 张钊 蒋绪顺 +1 位作者 杨姗 陈雪梅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1137-1143,共7页
目的:探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对血管内皮细胞凋亡的影响及线粒体损伤在其中的作用。方法:LPS刺激体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)后,采用CCK-8检测血管内皮细胞存活率,Western b... 目的:探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对血管内皮细胞凋亡的影响及线粒体损伤在其中的作用。方法:LPS刺激体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)后,采用CCK-8检测血管内皮细胞存活率,Western blot检测HUVECs细胞内Bax、Bcl-2、细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)和Cleaved-caspase 3蛋白的表达,用流式细胞计数检测细胞的凋亡情况,用荧光探针Mitotracker、JC-1、Mito SOX染色检测细胞内线粒体形态及其膜电位的变化,以及线粒体来源活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生水平;用MitoTEMPOL+LPS干预细胞,检测Bax、Bcl-2、Cyt C蛋白表达以及凋亡。结果:LPS浓度依赖性降低细胞存活率(F=99.31,P=0.000)。与对照组相比,LPS可以明显诱导HUVECs细胞凋亡(t=17.184,P=0.000),并呈浓度依赖性增加Cleaved-caspase 3(F=13.52,P=0.001)、Cyt C(F=21.008,P=0.000)和Bax(F=16.325,P=0.000)蛋白表达,并减少Bcl-2(F=17.287,P=0.000)蛋白的表达。LPS刺激后HUVECs细胞内线粒体发生明显的片段化和颗粒状变、线粒体膜电位下降(F=92.286,P=0.000),线粒体来源的ROS产生明显增加(t=5.324,P=0.006)。采用线粒体ROS清除剂(MitoTEMPOL)处理,可抑制LPS刺激的HUVECs细胞Bax(F=19.854,P=0.002)和Cyt C(F=11.594,P=0.009)蛋白表达,增加Bcl-2(F=8.077,P=0.020)蛋白表达,同时降低Cleaved-caspase 3(F=15.941,P=0.004)蛋白表达和减少细胞凋亡(F=57.482,P=0.000)。结论:LPS可以诱导HUVECs细胞凋亡和线粒体损伤,损伤线粒体所释放的ROS可能在LPS诱导的血管内皮细胞凋亡的过程中发挥了重要的作用。 展开更多
关键词 脂多糖 血管内皮细胞 线粒体损伤 活性氧 凋亡
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COMP与糖尿病肾病自噬相关性分析及其功能验证
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作者 魏云鑫 蒋绪顺 +2 位作者 蔡梦瑶 温睿智 杜晓刚 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期847-858,共12页
目的·通过研究高糖环境下肾小球足细胞中软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)与自噬的关系,进一步阐明在高糖环境下足细胞受损的可能机制。方法·从GENE EXPRESSION OMNIBUS(GEO)数据库下载基因表达... 目的·通过研究高糖环境下肾小球足细胞中软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)与自噬的关系,进一步阐明在高糖环境下足细胞受损的可能机制。方法·从GENE EXPRESSION OMNIBUS(GEO)数据库下载基因表达数据集GSE104948,使用GEO2R筛选差异表达基因(differentially expressed gene,DEG),并对筛选出来的DEG进行富集分析。将加权基因共表达网络分析(Weighted Gene Co-Expression Network Analysis,WGCNA)与STRING数据库构建DEG的蛋白互作网络(protein protein interaction network,PPI)获得的相关性最高的关键基因(hub gene)取交集,并再次进行富集分析。体外培养条件永生性小鼠足细胞株,待其分化完全后,采用高糖刺激,Western blotting检测足细胞COMP、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtubuleassociated protein 1 light chain3,LC3/MAP1LC3)等蛋白的表达。进一步通过抑制COMP的shRNA慢病毒载体感染足细胞以抑制COMP表达,并通过嘌呤霉素筛选稳定株,经Western blotting检测稳定株COMP、mTOR、LC3的表达,以观察COMP对自噬的影响。结果·共筛选出362个DEG进行后续分析。在这些DEG中,284个基因上调,78个基因下调。基因本体论(Gene Onotology,GO)术语分析结果显示,糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)数据集中的DEG主要富集于细胞表面受体信号通路、受体结合等。主要富集的京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路包括细胞因子-细胞因子受体相互作用、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)信号通路等。WGCNA和PPI两部分hub基因取交集,验证了64个hub基因,再次用KEGG注释hub基因,发现大部分hub基因富集在“细胞外基质(extracellular matrix,ECM)-受体相互作用”和“PI3K/AKT信号通路”。在64个hub基因中,COMP呈显著高表达(logFC>2),而PI3K/AKT/mTOR信 展开更多
关键词 糖尿病肾病 足细胞 自噬 生物信息学 差异基因 软骨寡聚基质蛋白(COMP)
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血液净化治疗蜂蜇伤相关急性肾损伤患者的护理策略
3
作者 张栩 刘岩 +2 位作者 文杨 蒋绪顺 杜晓刚 《华西医学》 CAS 2024年第7期1137-1139,共3页
严重的蜂蜇伤可导致全身炎症反应并伴有多器官功能损伤,严重者可导致患者死亡。急性肾损伤是严重蜂蜇伤患者的常见并发症,临床上针对此类急性肾损伤患者常采用常规综合治疗合并多元化血液净化治疗手段,能迅速控制病情并减少患者平均住... 严重的蜂蜇伤可导致全身炎症反应并伴有多器官功能损伤,严重者可导致患者死亡。急性肾损伤是严重蜂蜇伤患者的常见并发症,临床上针对此类急性肾损伤患者常采用常规综合治疗合并多元化血液净化治疗手段,能迅速控制病情并减少患者平均住院天数。该文主要探究血液净化治疗蜂蜇伤相关急性肾损伤患者加强临床护理的重要性,尤其是要为患者讲解血液净化治疗相关注意事项、治疗过程中血液通路的护理方法、可能发生的并发症和相对应的护理措施。 展开更多
关键词 蜂蜇伤 急性肾损伤 血液净化 护理策略
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