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猪生殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:44
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作者 宋志军 宋长绪 +6 位作者 杨增岐 朱道中 武占银 蒋智 林志雄 刘燕玲 张福良 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期98-102,共5页
根据GenBank登录的PRRSV保守基因序列设计合成了引物和探针,并对其进行了筛选;对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。同时用建立的检测方法对组织病料进行了检测,并与常规RT-PCR做了对比。结果显示,... 根据GenBank登录的PRRSV保守基因序列设计合成了引物和探针,并对其进行了筛选;对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。同时用建立的检测方法对组织病料进行了检测,并与常规RT-PCR做了对比。结果显示,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法灵敏度可达5.0×100拷贝/μL,比常规RT-PCR灵敏度高100倍。用该方法对东莞、增城、湛江等地的猪血清和多种组织样品进行了检测。结果,该方法与常规RT-PCR检测方法的阳性符合率为100%。用该方法对3份不同的组织样品进行了重复检测,结果表明,该方法具有良好的重复性,可满足当前PRRS的诊断需要。 展开更多
关键词 猪生殖与呼吸综合征病毒 实时定量RT-PCR TaqMan荧光探针
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猪圆环病毒2型套式PCR检测方法的建立及应用 被引量:20
2
作者 王贵平 蒋智 +4 位作者 宋长绪 高向阳 赵亚华 林志雄 朱道中 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期26-28,共3页
根据GenBank登录的猪圆环病毒 2型 (PCV2 )的全基因组序列 ,设计了 2对引物 ,建立了检测PCV2的套式PCR方法。对该方法用序列分析、酶切等方法进行了鉴定。同时用该套式PCR方法对华南地区 2 87个猪场的 15 6 0份样品进行了检测 ,结果 ,98... 根据GenBank登录的猪圆环病毒 2型 (PCV2 )的全基因组序列 ,设计了 2对引物 ,建立了检测PCV2的套式PCR方法。对该方法用序列分析、酶切等方法进行了鉴定。同时用该套式PCR方法对华南地区 2 87个猪场的 15 6 0份样品进行了检测 ,结果 ,983份为PCV2阳性 ,阳性率为6 3%。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 套式PCR 检测方法 流行病学
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新生儿高胆红素血症围产高危因素分析 被引量:23
3
作者 王玲 何海英 +2 位作者 蒋智 陈坚 莫坚 《中国儿童保健杂志》 CAS 2004年第6期528-529,共2页
【目的】 分析围产因素对新生儿高胆红素血症的影响 ,为临床早期防治及预后判断提供参考依据。 【方法】 对 2 3 0例新生儿高胆红素血症作回顾性临床分析。 【结果】 相关围产因素进行Logistic回归分析表明 :胎膜早破、宫内窘迫、... 【目的】 分析围产因素对新生儿高胆红素血症的影响 ,为临床早期防治及预后判断提供参考依据。 【方法】 对 2 3 0例新生儿高胆红素血症作回顾性临床分析。 【结果】 相关围产因素进行Logistic回归分析表明 :胎膜早破、宫内窘迫、高龄初产、胎龄、剖宫产、出生后头 3d体重下降明显、母乳缺乏已成为新生儿高胆红素血症的主要危险因素。 【结论】 加强围生期保健 ,避免早产、早破水、宫内窘迫 ,恰当掌握剖宫产指征 ,并对高危儿娩出后进行胆红素监测 ,对早防早治有重要意义。 展开更多
关键词 新生儿 高胆红素血症 高危因素
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足月新生儿黄疸光疗效果的影响因素 被引量:20
4
作者 陈坚 蒋智 +1 位作者 孙伟红 叶太荟 《广西医科大学学报》 CAS 2014年第3期483-485,共3页
目的:探讨足月新生儿黄疸蓝光照射治疗(光疗)效果的影响因素.方法:选择2012年6~12月本院儿科收治的足月新生儿黄疸,并行蓝光照射治疗(光疗)治疗70例,按治疗结果分为光疗失败组(18例)和光疗成功组(52例),分析两组患儿Apgar评... 目的:探讨足月新生儿黄疸蓝光照射治疗(光疗)效果的影响因素.方法:选择2012年6~12月本院儿科收治的足月新生儿黄疸,并行蓝光照射治疗(光疗)治疗70例,按治疗结果分为光疗失败组(18例)和光疗成功组(52例),分析两组患儿Apgar评分、红细胞压积、光疗前换血率、使用白蛋白情况、血红蛋白浓度、网织红细胞计数等指标.结果:两组新生儿红细胞压积、光疗前换血率、血红蛋白浓度差异有统计学意义(均P <0.05);两组1,5 min Apgar评分、网织红细胞计数、出现黄疸时间、光疗时间、宫内窘迫及胆红素脑病发生率、肝功能(AST、ALT、γ-GT)差异无统计学意义(均P>0.05).结论:足月新生儿黄疸光疗失败可能与红细胞压积偏低、血红蛋白浓度较低以及光疗前换血有关,应引起临床重视,对出现上述情况的足月新生儿黄疸,建议配合其他治疗手段,改善新生儿结局. 展开更多
关键词 新生儿黄疸 光疗 治疗效果 影响因素
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非洲猪瘟病毒蛋白功能研究进展 被引量:20
5
作者 郭怡德 李冰 +9 位作者 蔡汝健 蒋智 宋帅 勾红潮 李艳 楚品品 杨冬霞 卞志标 李春玲 臧莹安 《动物医学进展》 北大核心 2020年第10期96-101,共6页
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一种由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的猪的高度接触性传染病。ASFV编码的蛋白超过200个,pp220、pp62、p10、p12、p14.5、p17、p22、p30、p49、p54、p72、CD2v、pE248R、pM... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是一种由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的猪的高度接触性传染病。ASFV编码的蛋白超过200个,pp220、pp62、p10、p12、p14.5、p17、p22、p30、p49、p54、p72、CD2v、pE248R、pM1249L、pH240R和j5R是病毒的组装和形成的主要结构蛋白,其中CD2v、p12、p30和p54是ASFV的重要毒力蛋白;已知的非结构蛋白有DP71L、A238L、9GL、pE296R、Ep152R、L38L、DP9GR、A179L、pI215L和PE165R,这些蛋白是ASFV干扰宿主细胞正常代谢和免疫逃避的关键因素。对ASFV蛋白功能的深入了解有助于研究ASFV的致病机制及防控方法。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 结构蛋白 非结构蛋白 蛋白功能
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猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:12
6
作者 张福良 宋长绪 +5 位作者 杨鸣琦 朱道中 蒋智 林志雄 刘燕玲 宋志军 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期248-250,共3页
通过条件优化,以定量的10倍系列稀释质粒pMD—ORF2(含PCV2-ORF2全基因)为标准品,进行荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪圆环病毒2型(PCV2)的荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达1.0×10^6拷贝/μL,线性范围... 通过条件优化,以定量的10倍系列稀释质粒pMD—ORF2(含PCV2-ORF2全基因)为标准品,进行荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪圆环病毒2型(PCV2)的荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达1.0×10^6拷贝/μL,线性范围为10^9~10^0,达10个数量级;对起始浓度为1.0×10^6、1.0×10^5、1.0×10^4拷贝/μL的标准品的最终实际测得值分别为1.000×10^6、0.935×10^5、0.987×10^4拷贝/μL,变异系数分别为2.527%、2.067%、2.092%。该方法的检测灵敏度与套式PCR(nPCR)相当,甚而高于常规PCR。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 荧光定量PCR TAQMAN探针 检测
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华南地区猪圆环病毒3型分子流行病学研究 被引量:14
7
作者 蒋智 蔡汝健 +5 位作者 楚品品 林德锐 勾红潮 李艳 宋帅 李春玲 《广东农业科学》 CAS 2018年第7期116-120,共5页
猪圆环病毒3型(PCV3)是一种新的猪圆环病毒类型,为了解PCV3在华南地区的分布及其分子流行病学,应用荧光定量PCR方法对华南地区的临床样品进行检测,然后对PCV3阳性样品进行全基因组扩增和测序,将获得的7株PCV3核酸序列与国内外参考毒株... 猪圆环病毒3型(PCV3)是一种新的猪圆环病毒类型,为了解PCV3在华南地区的分布及其分子流行病学,应用荧光定量PCR方法对华南地区的临床样品进行检测,然后对PCV3阳性样品进行全基因组扩增和测序,将获得的7株PCV3核酸序列与国内外参考毒株进行遗传变异分析。结果表明,华南地区送检的临床样品和猪场的PCV3阳性率分别为46.3%和69.2%,7株PCV3毒株与国内外的参考毒株同源性为97.4%~99.8%,而ORF2核苷酸及其推导的氨基酸序列同源性分别为96.6%~99.8%和96.7%~99.5%。由此可见,PCV3在我国华南地区已经广泛存在。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 全基因序列 PCR检测 分子流行病学 华南地区
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长江口南槽非均匀细颗粒泥沙起动流速的近似估算 被引量:10
8
作者 程和琴 蒋智 时钟 《泥沙研究》 CSCD 北大核心 2003年第5期37-40,共4页
利用文献中的泥沙起动流速公式,推导出非均匀细颗粒泥沙起动流速近似估算公式。采用长江口南槽定点测量涨落潮过程中水深、水面以下1m的流速与近底床悬沙粒径d95资料,拟合该近似估算公式。估算结果表明:近底床悬沙粒径d95小于0 06mm的... 利用文献中的泥沙起动流速公式,推导出非均匀细颗粒泥沙起动流速近似估算公式。采用长江口南槽定点测量涨落潮过程中水深、水面以下1m的流速与近底床悬沙粒径d95资料,拟合该近似估算公式。估算结果表明:近底床悬沙粒径d95小于0 06mm的细颗粒泥沙起动流速值大于已有水槽实验值。 展开更多
关键词 长江口 细颗粒泥沙 起动流速 近似估算 非均匀
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非洲猪瘟病毒p72蛋白N末端的原核表达及间接ELISA检测方法的建立 被引量:13
9
作者 姜林林 宋帅 +5 位作者 蔡汝健 蒋智 李艳 勾红潮 楚品品 李春玲 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期144-152,共9页
根据非洲猪瘟病毒Pig/HLJ/2018株p72-N末端基因的核苷酸序列,合成p72-N末端648 bp基因序列,连入pET-28a(+)载体进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blotting鉴定后,用重组蛋白p72-N末端作为包被抗原,建立检测猪血清中非洲猪瘟抗体的间接E... 根据非洲猪瘟病毒Pig/HLJ/2018株p72-N末端基因的核苷酸序列,合成p72-N末端648 bp基因序列,连入pET-28a(+)载体进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blotting鉴定后,用重组蛋白p72-N末端作为包被抗原,建立检测猪血清中非洲猪瘟抗体的间接ELISA方法。结果显示,非洲猪瘟病毒p72-N末端648 bp基因片段成功克隆到pET-28a(+)载体中,经诱导表达获得约27 ku的重组蛋白,Western-blotting结果显示,重组蛋白与非洲猪瘟抗体阳性血清具有良好的反应原性。建立的ELISA方法结果显示,重组蛋白p72-N末端的最佳包被浓度为2.5μg/mL,待检血清最佳稀释度为1:100,该方法特异性好,仅与非洲猪瘟抗体阳性猪血清发生特异性反应,敏感度可达1:1 600;批内重复性和批间重复性变异系数均小于10%,与西班牙INGENASA公司非洲猪瘟抗体阻断ELISA检测试剂盒符合率可达93.75%。结果表明,获得的重组蛋白p72-N末端具有良好的反应原性和免疫原性,建立的非洲猪瘟抗体间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p72蛋白N末端 原核表达 间接ELISA
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猪链球菌临床分离株对四环素类抗生素的耐药性和耐药基因分析 被引量:12
10
作者 刘宝玲 楚品品 +6 位作者 李春玲 杨冬霞 蒋智 张昆丽 宋帅 勾红潮 蔡汝健 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第7期2796-2804,共9页
【目的】了解广东地区猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)临床分离株对四环素类抗生素的耐药性及耐药基因携带情况。【方法】采用药敏纸片扩散法对2016-2020年分离自广东地区的34株猪链球菌进行四环素类抗生素耐药分析,并通过PCR方法... 【目的】了解广东地区猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)临床分离株对四环素类抗生素的耐药性及耐药基因携带情况。【方法】采用药敏纸片扩散法对2016-2020年分离自广东地区的34株猪链球菌进行四环素类抗生素耐药分析,并通过PCR方法检测四环素耐药基因tetA、tetC、tetD、tetM、tetO和tetX携带情况。【结果】34株猪链球菌对四环素的耐药率高达100%(34/34),其次为米诺环素82.4%(28/34)、多西环素47.1%(16/34)。34株猪链球菌中3重耐药菌株有15株,占比44.1%(15/34),2重耐药菌株有14株,占比41.1%(14/34),耐1种药物的菌株5株,占比14.7%(5/34)。耐药基因检测结果显示,tetA、tetC、tetD、tetM、tetO和tetX基因携带率分别为0、0、0、14.7%(5/34)、100%(34/34)和0。【结论】广东地区猪链球菌临床分离株四环素类抗生素的耐药率较高,主要携带的四环素耐药基因为tetO和tetM基因。 展开更多
关键词 猪链球菌 四环素类抗生素 耐药性 耐药基因
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蜂毒素分子的改造及其基因在毕赤酵母中的表达 被引量:8
11
作者 赵亚华 董竟南 +3 位作者 崔红 白云 金科华 蒋智 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期45-48,56,共5页
为获得保留有抗菌活性而降低溶血作用的蜂毒素,对蜂毒素的分子结构进行了改造。将第5位的Val变为Arg,第15位Ala变为Arg,删除了第16位的Leu。用PCR技术获得了改造后的蜂毒素基因,将其克隆入酵母表达载体pPICZa-A,获得重组表达质粒pPICZa-... 为获得保留有抗菌活性而降低溶血作用的蜂毒素,对蜂毒素的分子结构进行了改造。将第5位的Val变为Arg,第15位Ala变为Arg,删除了第16位的Leu。用PCR技术获得了改造后的蜂毒素基因,将其克隆入酵母表达载体pPICZa-A,获得重组表达质粒pPICZa-A-MEA。该质粒转化毕赤酵母菌GS115,甲醇诱导下表达,发酵上清液经抑菌活性、溶血活性测定及亲和层析纯化,结果表明,蜂毒素基因成功地在毕赤酵母中表达,经改造后表达的蜂毒素保留了抗菌活性且溶血活性显著降低,经纯化后用Bradford法测定表达蜂毒素的含量约为0.29mg/ml。 展开更多
关键词 蜂毒素 酵母表达载体 基因 溶血活性 保留 毕赤酵母菌 抗菌活性 纯化 重组表达质粒 亲和层析
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猪2型圆环病毒ORF1基因的克隆及表达 被引量:9
12
作者 蒋智 宋长绪 +2 位作者 高向阳 王贵平 赵亚华 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期3-7,共5页
根据GenBank中猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )的ORF1基因序列 ,设计合成了 1对引物 ,对PCV 2广东株 (GD)ORF1基因进行PCR扩增 ,将扩增的ORF1基因克隆入 pMD 18 T载体 ,获得的重组质粒命名为 pMD ORF1。将ORF1的KpnⅠ和XbaⅠ双酶切产物插入原... 根据GenBank中猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )的ORF1基因序列 ,设计合成了 1对引物 ,对PCV 2广东株 (GD)ORF1基因进行PCR扩增 ,将扩增的ORF1基因克隆入 pMD 18 T载体 ,获得的重组质粒命名为 pMD ORF1。将ORF1的KpnⅠ和XbaⅠ双酶切产物插入原核表达载体pBAD/ gⅢC得到重组子 ,命名为 pBAD/ gⅢ ORF1。序列分析表明 ,克隆的ORF1与德国分离株AF2 0 1897核苷酸序列的同源性高达 99.5 % ;与其他PCV 2株的核苷酸序列同源性为 92 .1%~99.9% ,推导的氨基酸序列同源性为 90 .2 %~ 99.5 %。同时 ,测序结果表明 ,克隆的ORF1准确插入了 pBAD/ gⅢC的多克隆位点 ,未改变读码框。用L 阿拉伯糖诱导表达 ,收集菌液进行SDS PAGE和Western blotting分析 ,结果表明PCV 2ORF1在pBAD/ gⅢC中获得了高效融合表达 ,其表达蛋白的分子质量约为 4 1ku。 展开更多
关键词 猪2型圆环病毒 ORF1基因 克隆 表达 蛋白 分子质量
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琼州海峡东口底形平衡域谱分析 被引量:8
13
作者 程和琴 胡红兵 +1 位作者 蒋智 王宝灿 《海洋工程》 CSCD 北大核心 2003年第4期97-103,共7页
1993年用GPY浅地层剖面仪对琼州海峡东口中水道两个水深18~40m的浅段进行网格状探测,通过对探测记录的平衡域谱分析近似计算底形运动速率。探测、分析和计算结果表明:分布在深处的大型不对称沙波平均波长416m、平均波高8 8m,平均运动速... 1993年用GPY浅地层剖面仪对琼州海峡东口中水道两个水深18~40m的浅段进行网格状探测,通过对探测记录的平衡域谱分析近似计算底形运动速率。探测、分析和计算结果表明:分布在深处的大型不对称沙波平均波长416m、平均波高8 8m,平均运动速率0.92cm h;分布在浅处的小型对称、不对称沙波平均波长144m、平均波高4.9m,平均运动速率5 13cm h。虽然这些底形运动速率大于用经验公式和其它理论公式的计算值,却接近于近年来的原位观测值和相似尺度底形风洞实验值,所以平衡域谱分析是一种相对简便准确的小尺度底形稳定性评估方法。 展开更多
关键词 琼州海峡 底形 稳定性 平衡域谱分析 运动速率
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猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:8
14
作者 元永平 丛丽媛 +3 位作者 陈德坤 蒋智 张春红 宋长绪 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2008年第1期15-19,共5页
以纯化复性的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap重组蛋白作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,获得了3株分泌PCV2-Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1C7A4、4F3F5和4G8F7,其染色... 以纯化复性的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap重组蛋白作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,获得了3株分泌PCV2-Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1C7A4、4F3F5和4G8F7,其染色体平均数为98~103,间接ELISA检测3株细胞培养上清效价分别为1:3125、1:3125、1:15625,小鼠腹水效价分别为1:390000、1:390000、1:1950000。ELISA结果显示,1C7A4、4F3F5和4G87F仅与融合表达的PCV2-Cap蛋白反应,而与PET-32a载体表达的蛋白不反应。相加ELISA结果显示3株单克隆抗体对应两个不同的病毒抗原位点。间接免疫荧光结果显示,1C7A4、4F3F5和4G8F7能与PCV2发生反应,而不与PCV1发生交叉反应。结果表明所获得的3株单抗是PCV2型特异性的,为PCV1和PCV2鉴别诊断方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒Ⅱ型 ORF2重组蛋白 单克隆抗体
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崇明岛开发的自然秉赋与制约 被引量:7
15
作者 程和琴 蒋智 陈吉余 《长江流域资源与环境》 CAS CSSCI CSCD 北大核心 2003年第5期417-421,共5页
在21世纪世界环境与发展相互协调的历史背景下,有着自然优势的崇明岛开发成为上海现代化发展第三次飞跃的战略性目标之一。从长江口和崇明岛发育自然和人工控制后自然适应演变规律的历史和现状,探讨实现崇明岛开发的自然秉赋与制约因素... 在21世纪世界环境与发展相互协调的历史背景下,有着自然优势的崇明岛开发成为上海现代化发展第三次飞跃的战略性目标之一。从长江口和崇明岛发育自然和人工控制后自然适应演变规律的历史和现状,探讨实现崇明岛开发的自然秉赋与制约因素,近两千年来长江河口自然演变规律的分析结果表明:弯道侧向环流及其对泥沙的输运对河口沙坝和汊道发育演变以及流域内众多大型工程对河口环流结构的影响研究,将是对长江口综合治理的理论前提,更是崇明岛实现人与自然协调开发的基础。而且,风能、湿地生态功能和岛内沟河网的自然生态功能、湿地生态功能和岛内沟河网的自然生态功能等可再生资源的充分利用可以实现崇明岛的零污染开发和治理。 展开更多
关键词 崇明岛 开发 自然秉赋 环境 弯道侧向环流 泥沙 自然生态功能 可再生资源 治理
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大倾角斜井长曲线提升机运输施工技术 被引量:10
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作者 郭世杰 罗俊荣 +3 位作者 郭德福 康政 温泉 蒋智 《公路》 北大核心 2007年第2期188-193,共6页
传统提升机有轨运输只能直线牵引或短距离斜线牵引,本文介绍了大倾角斜井长曲线提升机运输施工技术,其运输方式有安全性能高、施工速度快、成本低的优点。
关键词 斜井 长曲线 提升机 运输
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早期足月新生儿高胆红素血症的神经行为观察 被引量:8
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作者 王广方 蒋智 +2 位作者 冯琪 刘淑贤 秦振庭 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 1997年第2期97-98,共2页
关键词 高胆红素血症 新生儿 神经行为
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广东省猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因遗传变异分析 被引量:8
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作者 蒋智 楚品品 +2 位作者 陈天宝 李春玲 蔡汝健 《广东农业科学》 CAS 2022年第4期97-105,共9页
【目的】监测2021年广东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)的分子流行动态,为PRRSV综合防控措施的制定提供参考。【方法】在广东省内不同地区PRRSV检测为阳性的37个规模猪场采集... 【目的】监测2021年广东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)的分子流行动态,为PRRSV综合防控措施的制定提供参考。【方法】在广东省内不同地区PRRSV检测为阳性的37个规模猪场采集521份患病猪组织样本进行PRRSV检测。对样本进行ORF5基因测序,采用DNAStar分析ORF5核苷酸的同源性及其推导氨基酸的同源性,并用Mega7.0构建基于ORF5基因的系统遗传进化树。【结果】从37个猪场采集的样品PRRSV阳性率为24.4%,猪场阳性率为45.9%。通过测序分析获得17株来自不同猪场的PRRSV ORF5基因序列,遗传进化分析表明所有毒株均属于北美毒株(PRRSV 2),其中有5株属于Lineage 8(JXA1-like和CH-1a-like)谱系,9株属于Lineage 1(NADC30-like和NADC34-like)谱系,3株属于Lineage 3(QYYZ-like)谱系,没有监测到Lineage 5(VR2332-like)谱系的毒株。17株PRRSV毒株的ORF5基因之间核苷酸序列同源性为81.3%~99.5%,推导的氨基酸序列同源性为80.0%~98.3%。【结论】2021年广东省PRRSV流行株以Lineage 1(NADC30-like和NADC34-like)和Lineage 8(JXA1-like和CH-1a-like)谱系为主,占比分别为52.94%和29.41%,Lineage 3(QYYZ-like)谱系降为次要流行株,占比为17.65%。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) ORF5基因 NADC30毒株 NADC34毒株 遗传变异
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猪源绿色气球菌的分离鉴定及16S rRNA基因序列测定与遗传进化分析 被引量:7
19
作者 张乐宜 李艳 +3 位作者 蔡汝健 刘燕玲 蒋智 宋长绪 《中国农学通报》 CSCD 2014年第29期15-21,共7页
为研究引起广东部分地区猪场仔猪发生急性死亡的致病菌及其系统发育地位,本研究从广东英德、惠州龙门、翁源、汕头等地区猪场急性死亡病仔猪中分离到6株呈α溶血的细菌。通过细菌形态学观察、生化特性鉴定、药敏试验、致病性试验以及16S... 为研究引起广东部分地区猪场仔猪发生急性死亡的致病菌及其系统发育地位,本研究从广东英德、惠州龙门、翁源、汕头等地区猪场急性死亡病仔猪中分离到6株呈α溶血的细菌。通过细菌形态学观察、生化特性鉴定、药敏试验、致病性试验以及16S rRNA基因的序列分析,确定为猪源绿色气球菌,分别命名为HD、WY、ZQ、LM、YD和ST。动物感染试验表明:6株分离菌株均具有不同程度的致病性;药敏结果显示:6株分离株均对头孢曲松、头孢唑啉、恩诺沙星、阿莫西林高度敏感,对新生霉素、利福平、阿米卡星、庆大霉素、多粘菌素B中度敏感,对其他抗生素均耐药;同源性及遗传进化分析结果显示:6株分离株与12株国内外参考菌株核苷酸同源性在93%以上,其中与澳大利亚分离自犬的15MS株同源性最高,为98.1%,与广西分离自猪的GXBL-1株同源性最低,为83.6%;6株分离株与广东分离株和澳大利亚分离株亲缘关系最近,暗示进化不存在明显的地域相关性。本研究确定了广东部分地区引起规模化猪场仔猪发生急性死亡的病原菌,为该菌引起的疾病的防治提供了依据。 展开更多
关键词 绿色气球菌 分离鉴定 16S RRNA 遗传进化分析
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中学物理教学探究性学习活动初探 被引量:7
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作者 蒋智 《物理教学探讨(中教版)》 2001年第7期11-12,共2页
素质教育提出了新的人才观,要求学校必须培养敢于质疑、善于探究、勇于创新的探究型人才.教育要着眼于人的可持续发展,要面向未来.全球的教育专家几乎都有这样的共识:未来的文盲不再是目不识丁的人,而是不会探究学习的人.
关键词 中学物理教学 探究学习 教育专家 面向未来 文盲 探究性学习 教育者 可持续发展 吸收 全球
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