猪伪狂犬病病毒野毒株与疫苗株荧光定量PCR检测方法的建立和应用 被引量：9

1

作者 王雅婷 赵灵燕 +6 位作者 柴娟 虞一聪 董建斐 倪柏锋 周蕾 徐辉 谢荣辉 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1354-1360,共7页

根据伪狂犬病病毒gD、gE基因序列设计2对引物及其对应的探针,通过对引物、探针浓度的优化,建立了猪伪狂犬病病毒野毒和减毒活疫苗株荧光定量PCR检测鉴别方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪流行性... 根据伪狂犬病病毒gD、gE基因序列设计2对引物及其对应的探针,通过对引物、探针浓度的优化,建立了猪伪狂犬病病毒野毒和减毒活疫苗株荧光定量PCR检测鉴别方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪流行性乙型脑炎病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪博卡病毒、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒均无扩增曲线。野毒株均出现gD和gE基因扩增曲线,而疫苗株只出现了gD基因扩增曲线,表明该检测方法具有良好的特异性。建立的gD和gE基因标准曲线Ct值和模板终浓度在1×10^8~1×10 copies/μL范围内均具有良好的线性关系,灵敏度均可达1×10 copies/μL。对39份猪组织样品进行检测,荧光定量PCR检出5份样品猪伪狂犬病病毒gD、gE阳性,表明这5份猪组织样品为猪伪狂犬病病毒野毒感染。常规PCR检出5份猪伪狂犬病病毒阳性,经测序为野毒感染,2种方法符合率为100%。本研究建立的荧光定量PCR可用于猪伪狂犬病病毒的快速检测和流行病学调查。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 荧光定量PCR

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猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒双重荧光定量PCR方法的建立和应用 被引量：3

2

作者 赵灵燕 张璐 +8 位作者 安慧婷 王雅婷 黄靖 张红丽 董建斐 刘霞 孙仁杰 徐辉 谢荣辉 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期16-22,共7页

根据猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒保守基因序列设计引物和探针,通过优化反应体系,建立了猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒双重荧光定量PCR检测方法,评估了该方法的特异性、敏感性及重复性。结果显示,该方法能特异性扩增猪圆环病毒3型和... 根据猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒保守基因序列设计引物和探针,通过优化反应体系,建立了猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒双重荧光定量PCR检测方法,评估了该方法的特异性、敏感性及重复性。结果显示,该方法能特异性扩增猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒核酸,与猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、日本脑炎病毒、猪圆环病毒1型、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪博卡病毒无交叉反应。猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒的最低检测限均为10 copies/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于3%。用建立的双重荧光定量PCR方法对87份猪组织样品进行检测,结果显示,猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒3型的阳性率分别为17.24%和24.14%。上述结果表明,本研究建立的双重荧光定量PCR方法具有特异、敏感、稳定和快速的优点,可用于猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒鉴别诊断和流行病学调查。 展开更多

关键词 猪圆环病毒3型 猪伪狂犬病病毒 双重荧光定量PCR 鉴别诊断

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猪圆环病毒2,3,4型三重荧光定量PCR检测方法的建立和应用 被引量：5

3

作者 谢荣辉 王雅婷 +9 位作者 安慧婷 黄靖 张红丽 刘霞 冯肖肖 陈伟良 董建斐 张璐 徐辉 赵灵燕 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1523-1528,共6页

为建立同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、3型(PCV3)和4型(PCV4)的方法,根据GenBank中的PCV2、PCV3和PCV4基因保守序列设计引物和探针,通过反应体系优化后,建立同时检测PCV2、PCV3和PCV4的三重荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性、稳定... 为建立同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、3型(PCV3)和4型(PCV4)的方法,根据GenBank中的PCV2、PCV3和PCV4基因保守序列设计引物和探针,通过反应体系优化后,建立同时检测PCV2、PCV3和PCV4的三重荧光定量PCR方法,并对其特异性、敏感性、稳定性、与普通PCR方法的一致性进行评价。结果显示,建立的方法可特异性检测PCV2、PCV3和PCV4,与猪细小病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒1型、猪伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒无交叉反应产生。批间与批内重复性试验变异系数系数均小于3%。对83份猪组织样品进行检测,其中PCV2、PCV3和PCV4阳性率分别为68.67%,28.92%,20.48%。结果表明建立的三重荧光定量PCR方法具有敏感度高、特异性强和稳定性好的优点,可用于PCV2,PCV3,PCV4型的流行病学调查和鉴别诊断。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 猪圆环病毒3型 猪圆环病毒4型 三重荧光定量PCR

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2018-2020年浙江省禽白血病血清学调查及分析 被引量：1

4

作者 孙冰冰 刘霞 +7 位作者 黄晓兵 张璐 黄靖 董建斐 安慧婷 周彩琴 徐辉 赵灵燕 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第1期203-207,共5页

为了解浙江省禽白血病病毒(ALV)流行情况,本研究对2018-2020年浙江省定点监测场点开展ALV J亚群和A/B亚群抗体检测,共检测来自9个地市518个场次的19 224份次鸡血清样品,通过对时间、群间、空间等情况分析,掌握当前浙江省禽白血病感染及... 为了解浙江省禽白血病病毒(ALV)流行情况,本研究对2018-2020年浙江省定点监测场点开展ALV J亚群和A/B亚群抗体检测,共检测来自9个地市518个场次的19 224份次鸡血清样品,通过对时间、群间、空间等情况分析,掌握当前浙江省禽白血病感染及分布情况。结果显示:浙江省ALV-J平均个体阳性率为11.63%,平均场次阳性率为61.78%,ALV-A/B平均个体阳性率为3.52%,平均场次阳性率为39.77%;不同群体、地市均有感染分布。监测结果分析表明,浙江省禽白血病存在一定范围的感染,种鸡场内相对可控但感染有上升,研究结果可为浙江省禽白血病防控、净化提供依据。 展开更多

关键词 禽白血病 血清学 流行病学调查

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2021年浙江省禽流感专项监测与分析 被引量：1

5

作者 冯肖肖 赵灵燕 +5 位作者 刘霞 黄靖 张璐 董建斐 陈伟良 徐辉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期167-175,共9页

为评估高致病性禽流感(HPAI)疫病风险和免疫水平情况,2021年3-5月在浙江省11个地市采集血清、家禽拭子和环境样本4123份,采用血凝抑制试验和荧光RT-PCR方法,检测和分析家禽HPAI强制免疫抗体水平和感染情况。结果显示:H5亚型(Re11)AIV免... 为评估高致病性禽流感(HPAI)疫病风险和免疫水平情况,2021年3-5月在浙江省11个地市采集血清、家禽拭子和环境样本4123份,采用血凝抑制试验和荧光RT-PCR方法,检测和分析家禽HPAI强制免疫抗体水平和感染情况。结果显示:H5亚型(Re11)AIV免疫抗体样本合格率为91.70%,场点合格率为90.00%;H5亚型(Re12)AIV免疫抗体样本合格率为90.42%,场点合格率为92.50%;H7N9亚型(Re3)AIV免疫抗体样本合格率为91.30%,场点合格率为90.00%;家禽总体免疫抗体合格率均在90%以上。不同地区H5亚型(Re11)AIV免疫抗体样本合格率为85.00%~99.17%;H5亚型(Re12)AIV免疫抗体样本合格率为82.71%~94.38%;H7N9亚型(Re3)AIV免疫抗体样本合格率为70.79%~99.17%。不同场点AIV免疫抗体样本合格率为84.49%~97.00%,屠宰场和散养户的AIV免疫抗体样本合格率低于种禽场和规模场。鸡和鸭AIV免疫抗体样本合格率分别在92%和86%以上,鸡的免疫效果要优于鸭。全省未检出H5亚型和H7亚型HPAIV核酸阳性,但监测到其他亚型的低致病性禽流感病毒(LPAIV)的存在。对监测到的AIV阳性样本采用荧光RT-PCR方法进一步分析,103份A型流感样品中发现存在H2(22.33%)、H9(17.48%)、H10(15.53%)、H3(5.83%)和H6(1.94%)5种HA亚型,N3(57.28%)、N8(42.72%)、N2(9.71%)、N6(7.77%)、N9(2.91%)和N1(1.94%)6种NA亚型。103份样品来自12个场点,分别有33.33%和58.33%的场点(屠宰场和市场)检出2种以上HA和NA亚型。家禽流通和屠宰环节中存在不同亚型LPAIV混合感染情况。监测结果表明,HPAI防控措施效果良好,浙江省部分地区免疫效果稍低,但家禽免疫抗体总体水平达到农业农村部要求(70%)以上;浙江省未发现有HPAIV核酸阳性,HPAI疫情发生风险较低,但家禽和环境中存在多亚型LPAIV感染的现象。 展开更多

关键词 高致病性禽流感 监测 免疫抗体 亚型

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浙江省猪圆环病毒2型流行株遗传变异分析

6

作者 张璐 安慧婷 +8 位作者 王雅婷 黄靖 张红丽 董建斐 孙仁杰 刘霞 赵灵燕 徐辉 谢荣辉 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期24-31,共8页

为了解浙江省猪圆环病毒2型(PCV2)基因型和遗传变异情况,本试验对2021年采自浙江省不同地区的27份PCV2阳性病料进行PCV2全基因组扩增、克隆和测序,并将其全基因组、ORF 2基因核苷酸序列及其推导的Cap蛋白氨基酸序列与不同国家和地区的... 为了解浙江省猪圆环病毒2型(PCV2)基因型和遗传变异情况,本试验对2021年采自浙江省不同地区的27份PCV2阳性病料进行PCV2全基因组扩增、克隆和测序,并将其全基因组、ORF 2基因核苷酸序列及其推导的Cap蛋白氨基酸序列与不同国家和地区的流行株进行遗传变异分析。结果显示,27株PCV2流行株之间全基因组和ORF 2基因核苷酸序列同源性分别为91.0%~99.9%和81.7%~99.9%,与不同国家和地区的PCV2参考株之间全基因组和ORF 2基因核苷酸序列同源性为90.7%~99.9%和81.8%~100%。遗传进化树分析显示,27株PCV2流行株分别处于4个分支,其中8株为PCV2a基因型,6株为PCV2b基因型,12株为PCV2d基因型,1株为PCV2e基因型。27株PCV2流行株Cap蛋白的糖基化位点和核定位信号区氨基酸序列呈高度保守,B细胞抗原表位和T细胞抗原表位存在多个氨基酸突变。结果表明,浙江省多种基因型PCV2共存,以PCV2d基因型流行为主。本试验结果对于了解浙江省PCV2流行毒株的基因型和变异状况具有重要的意义。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 基因型 遗传变异分析

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猪丹毒的病原学诊断及药敏试验 被引量：3

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作者 董建斐 虞一聪 +9 位作者 裘贤平 柴娟 王雅婷 周蕾 谢荣辉 张传亮 倪柏锋 赵灵燕 桂平雄 徐辉 《浙江畜牧兽医》 2018年第6期30-32,共3页

宁波市奉化区某猪场生猪存栏720头,其中母猪68头。该场猪群于2018年5月开始发病,病初病猪食欲不振,病重的甚至食欲废绝,精神沉郁,被毛粗乱,体温达到41.5℃以上,病猪粪便干硬呈颗粒状,部分病猪的背部、颈部、臀部、耳根等处出现扁平微凸... 宁波市奉化区某猪场生猪存栏720头,其中母猪68头。该场猪群于2018年5月开始发病,病初病猪食欲不振,病重的甚至食欲废绝,精神沉郁,被毛粗乱,体温达到41.5℃以上,病猪粪便干硬呈颗粒状,部分病猪的背部、颈部、臀部、耳根等处出现扁平微凸起的紫红色疹块,多为方形、菱形或不规则的圆形,指压红色可出现暂时消退;病猪呼吸急促呈腹式呼吸;也有少量病猪出现关节肿胀伴有跛行等临床症状。 展开更多

关键词 病原学诊断 药敏试验 猪丹毒 食欲不振 生猪存栏 腹式呼吸 呼吸急促 临床症状

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浙江省猪群塞内卡病毒感染流行病学调查 被引量：2

8

作者 张红丽 王雅婷 +4 位作者 黄靖 张璐 董建斐 赵灵燕 徐辉 《中国动物检疫》 CAS 2022年第10期1-6,共6页

为了解浙江省猪群塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)流行情况,2017—2020年开展了SVA血清学和病原学检测。结果显示:2018—2020年浙江省猪群SVA抗体个体阳性率分别为21.86%、9.83%、12.79%,群体阳性率分别为83.00%、56.06%、70.89%,整体呈... 为了解浙江省猪群塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)流行情况,2017—2020年开展了SVA血清学和病原学检测。结果显示:2018—2020年浙江省猪群SVA抗体个体阳性率分别为21.86%、9.83%、12.79%,群体阳性率分别为83.00%、56.06%、70.89%,整体呈波动状变化趋势;屠宰场平均个体阳性率为18.35%,高于养殖场(14.86%),差异明显(P<0.01);浙南(19.13%)、浙北(17.01%)的平均个体阳性率显著高于其他区域(10.09%~12.25%)。2017—2020年SVA核酸个体阳性率、群体阳性率总体呈下降趋势,分别由2017年的18.08%、33.80%下降至2020年的1.66%、3.81%;屠宰场屠宰猪群的SVA核酸个体阳性率(8.72%)高于养殖场和无害化处理场病死猪群(3.97%),差异显著(P<0.01);2018—2020年仅在浙南、浙北区域检出SVA核酸阳性。结果表明:浙江省猪群SVA感染有所控制,但流行范围依然较广,部分区域猪群SVA隐性感染较严重,需重视并持续加强猪群SVA感染监测。 展开更多

关键词 塞内卡病毒 流行病学调查 血清学 病原学 隐性感染

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2021年浙江省H9亚型禽流感监测状况的分析 被引量：2

9

作者 冯肖肖 赵灵燕 +5 位作者 刘霞 黄靖 董建斐 张璐 陈伟良 徐辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1245-1251,1289,共8页

为了解浙江省家禽H9亚型禽流感病毒(AIV)HI抗体水平和病毒感染情况,本研究于2021年采集了3 698份禽类血清和16 688份拭子样品,针对前者检测其HI抗体效价,统计分析H9亚型AIV抗体合格率(HI≥24为合格);针对后者经荧光定量RT-PCR检测H9亚型... 为了解浙江省家禽H9亚型禽流感病毒(AIV)HI抗体水平和病毒感染情况,本研究于2021年采集了3 698份禽类血清和16 688份拭子样品,针对前者检测其HI抗体效价,统计分析H9亚型AIV抗体合格率(HI≥24为合格);针对后者经荧光定量RT-PCR检测H9亚型AIV,并统计分析AIV的阳性率。AIV抗体合格率统计结果显示:鸡H9亚型AIV抗体总合格率为87.91%(3 251/3 698),场点AIV抗体合格率为86.36%(38/44)。不同地区家禽H9亚型AIV HI抗体水平均较高,依次为浙西(97.82%,224/229)>浙北(97.59%,1 134/1 162)>浙东(89.61%,716/799)>浙中(79.19%,236/298)>浙南(77.77%,941/1 210)。不同场点家禽H9亚型AIV抗体合格率依次为种禽场(95.89%,839/875)>屠宰场(86.87%,1 376/1 584)>规模场(83.21%,1 006/1 209)。AIV阳性率的统计结果显示,H9亚型AIV总阳性率为2.79%(465/16 688),场点阳性率为22.39%(15/67)。不同地区H9亚型AIV阳性率有差异,依次为浙中(5.00%,18/360)>浙南(3.50%,240/6 855)>浙西(2.68%,11/410)>浙北(2.66%,190/7 141)>浙东(0.31%,6/1 922),其中浙中地区AIV阳性率显著高于其他地区(P<0.05)。市场、屠宰场、规模场的禽类和环境样品中H9亚型AIV的阳性率分别为8.03%(118/1 470)、2.90%(334/11 527)和0.70%(13/1 864),种禽场和野鸟栖息地均未检出H9亚型AIV,其中屠宰场H9亚型AIV阳性率显著高于其他来源的样品(P<0.05)。鸡、鸭拭子样品中H9亚型AIV阳性率分别为3.80%(391/10 289)和0.22%(6/2 702),其场点阳性率分别为28.57%(14/49)和15.79%(3/19);而鹅、鸽子和野鸟样品中均未检测到H9亚型AIV。咽拭子和泄殖腔拭子样品H9亚型AIV的阳性率为2.96%(397/13 401),环境拭子样品H9亚型AIV的阳性率为2.34%(68/2 902),采自浙北、浙东两个野鸟栖息地的粪便样品中均未检测到H9亚型AIV。上述结果表明,浙江省家禽H9亚型AI疫苗免疫抗体水平整体较好,但各地区仍存在低水平的H9亚型AIV流行,尤其是市场和屠宰场中H9亚型AIV感染情况严重。本研� 展开更多

关键词 浙江省 H9亚型禽流感病毒 血清学和病原学检测 分析

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浙江省部分地区猪病毒性腹泻的流行病学调查 被引量：3

10

作者 刘霞 董建斐 +6 位作者 谢荣辉 张红丽 刘爱军 黄靖 黄晓兵 赵灵燕 徐辉 《浙江畜牧兽医》 2018年第3期17-19,共3页

猪病毒性腹泻是一类呈全国性散发流行的急性、接触性肠道传染病。临床上以引起仔猪水样腹泻、呕吐、脱水消瘦甚至死亡为典型症状,成年猪多不可见临床症状或仅有一过性软便。该病病原主要有猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea ... 猪病毒性腹泻是一类呈全国性散发流行的急性、接触性肠道传染病。临床上以引起仔猪水样腹泻、呕吐、脱水消瘦甚至死亡为典型症状,成年猪多不可见临床症状或仅有一过性软便。该病病原主要有猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（transmissible gastroenteritis virus,TGEV）和猪轮状病毒（porcine rotavirus，PoRV），是影响我国生猪养殖业经济效益和健康可持续发展的重要因素之一。 展开更多

关键词 病毒性腹泻 流行病学调查 仔猪 浙江省 猪传染性胃肠炎病毒 猪流行性腹泻病毒 VIRUS 临床症状

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三种兽用消毒剂对伪狂犬病病毒的灭活效果研究 被引量：1

11

作者 董建斐 张璐 +3 位作者 王雅婷 徐辉 赵灵燕 谢荣辉 《浙江畜牧兽医》 2022年第6期8-11,共4页

为了解兽用消毒剂对DNA病毒的灭活效果,本研究选择了猪伪狂犬病病毒为模式病毒开展消毒效果评估,指导消毒灭源工作。经对三种兽用消毒剂在不同浓度、不同作用时间和不同温度下对伪狂犬病病毒的杀灭效果进行实验室评价,结果显示,在20℃... 为了解兽用消毒剂对DNA病毒的灭活效果,本研究选择了猪伪狂犬病病毒为模式病毒开展消毒效果评估,指导消毒灭源工作。经对三种兽用消毒剂在不同浓度、不同作用时间和不同温度下对伪狂犬病病毒的杀灭效果进行实验室评价,结果显示,在20℃和37℃条件下,0.2%戊二醛癸甲溴铵溶液作用5 min,0.05%的碘酸混合溶液作用10 min和有效氯为300 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液作用20 min,均可完全灭活伪狂犬病病毒;在4℃条件下,0.2%戊二醛癸甲溴铵溶液作用30 min,有效氯为300 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液作用40 min仍不能完全灭活伪狂犬病病毒。表明按生产厂家说明书推荐的病毒类和疫源地消毒浓度,在常温下和高温环境下,碘酸混合液、戊二醛癸甲溴铵溶液和二氯异氰尿酸钠均可有效地灭活伪狂犬病病毒,灭活率均在99.99%以上;而低温状态下,戊二醛癸甲溴铵溶液和二氯异氰尿酸钠溶液的灭活效果有所下降,应予以重视,必要时需提高作用浓度。 展开更多

关键词 消毒剂 灭活 伪狂犬病病毒

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两种H7N9流感病毒荧光RT-PCR试剂盒的敏感性和特异性评价 被引量：1

12

作者 冯肖肖 赵灵燕 +5 位作者 刘霞 黄靖 陈伟良 董建斐 张璐 徐辉 《中国动物检疫》 CAS 2022年第10期122-126,共5页

为评价两种(A、B)H7N9流感病毒荧光RT-PCR试剂盒的检测性能,对50份疑似感染H7N9流感病毒的禽拭子样品进行H7N9流感病毒核酸检测,使用TG-ROC分析方法筛选荧光RT-PCR最适Ct值(阈值),通过2×2列联表分析两种试剂盒的敏感性和特异性,并... 为评价两种(A、B)H7N9流感病毒荧光RT-PCR试剂盒的检测性能,对50份疑似感染H7N9流感病毒的禽拭子样品进行H7N9流感病毒核酸检测,使用TG-ROC分析方法筛选荧光RT-PCR最适Ct值(阈值),通过2×2列联表分析两种试剂盒的敏感性和特异性,并用Kappa检验评估其一致性。结果显示:以国家禽流感参考实验室的鸡胚病毒分离鉴定结果为“金标准”,A和B两种试剂盒的敏感性、特异性分别为90.9%(10/11)、56.4%(22/39)和54.5%(6/11)、94.9%(37/39);两种试剂盒检测结果差异较大,Kappa值为0.28。TG-ROC分析得出:A试剂盒的检测阳性最适阈值为33,对应的敏感性和特异性为90.91%和92.31%;B试剂盒的检测阳性最佳阈值为37,对应的敏感性和特异性分别为81.82%和87.18%。通过调整阈值,A试剂盒的敏感性和特异性均达到90%以上,B试剂盒均达到81%以上,Kappa值为0.85,检测结果一致。结果表明,虽然不同H7N9流感病毒荧光RT-PCR试剂盒的检测性能有差别,但通过调整阈值,可以达到检测所需的最适敏感性和特异性,从而增加临床检测结果的可靠性。本研究为H7N9流感病毒检测试剂盒的应用提供了指导。 展开更多

关键词 H7N9 荧光RT-PCR检测试剂盒 TG-ROC 敏感性 特异性

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浙江省猪伪狂犬病病毒分离及其gD和gE基因遗传变异分析 被引量：1

13

作者 谢荣辉 袁秀芳 +6 位作者 王雅婷 安慧婷 董建斐 黄靖 张璐 徐辉 赵灵燕 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1327-1334,共8页

对2018-2019年采自浙江省部分地区的30份猪伪狂犬病病毒阳性病料开展病毒分离鉴定,并进行分离毒株gD和gE基因克隆、测序和变异分析。结果显示,从30份样品中分离到11株猪伪狂犬病病毒;11个分离株之间的gD基因核苷酸及其推导氨基酸的同源... 对2018-2019年采自浙江省部分地区的30份猪伪狂犬病病毒阳性病料开展病毒分离鉴定,并进行分离毒株gD和gE基因克隆、测序和变异分析。结果显示,从30份样品中分离到11株猪伪狂犬病病毒;11个分离株之间的gD基因核苷酸及其推导氨基酸的同源性分别为99.3%~99.9%和98.0%~100.0%,gE基因核苷酸及其推导氨基酸的同源性分别为99.5%~99.9%和99.0%~99.8%;遗传进化分析显示,11株猪伪狂犬病病毒与我国2011年以后流行的毒株亲缘关系较近,与2011年前分离的国内毒株亲缘关系较远,与欧美毒株的亲缘关系更远;与疫苗株Bartha相比,11个分离株的gD和gE基因均存在碱基插入和点突变现象;gE基因推导氨基酸序列第48位均存在天冬氨酸的插入。本试验结果对于了解浙江省猪伪狂犬病病毒流行毒株的分子生物学特征和变异状况具有重要的意义。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 GD基因 GE基因 遗传变异

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5种布鲁氏菌病竞争ELISA抗体检测试剂盒的比较 被引量：1

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作者 虞一聪 桂平雄 +7 位作者 倪柏锋 王雅婷 董建斐 周蕾 柴娟 谢荣辉 赵灵燕 徐辉 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期36-39,共4页

为提高布鲁氏菌病检测诊断能力,采用5种布鲁氏菌病抗体竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)试剂盒对背景清楚的166份牛、羊、猪血清样本进行检测,同时以试管凝集试验(SAT)作为参照方法,测定5种试剂盒的敏感性、特异性、Youden指数及AUC值等参... 为提高布鲁氏菌病检测诊断能力,采用5种布鲁氏菌病抗体竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)试剂盒对背景清楚的166份牛、羊、猪血清样本进行检测,同时以试管凝集试验(SAT)作为参照方法,测定5种试剂盒的敏感性、特异性、Youden指数及AUC值等参数。结果显示,5种试剂盒的敏感性为88.00%~100.00%;特异性为86.21%~99.14%;Youden指数为86.21%~95.69%;AUC值为0.931~0.978;McNemar检验结果显示,5种试剂盒中厂家A、C和E检验结果与SAT结果差异不显著(P>0.05),厂家B和D检验结果与SAT结果差异显著(P<0.05);Kappa一致性检验分析表明,5种试剂盒与SAT结果均有高度的一致性(0.790~0.930);成本-效果分析表明,5种试剂盒优先选择依次为A、C、B、E、D。本试验结果为诊断用试剂盒选择提供参考,从而提高诊断准确性。 展开更多

关键词 布鲁氏菌病 竞争ELISA 试剂盒 比较

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文丘里阀密闭箱PAO检漏及腔体的消毒效果评价

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作者 虞一聪 高文娟 +6 位作者 章杭建 董建斐 王雅婷 周蕾 柴娟 谢荣辉 倪柏锋 《畜牧兽医科技信息》 2018年第4期26-27,共2页

P3实验室通风管道中文丘里阀由于其结构设计中存在泄漏风险,在文丘里阀外周安装密闭箱可消除这一风险,但仍需对该密闭箱是否存在泄漏风险以及箱体内部消毒效果进行评价。本文专门介绍了文丘里密闭箱PAO检漏及其箱体内部H2O2消毒后的消... P3实验室通风管道中文丘里阀由于其结构设计中存在泄漏风险,在文丘里阀外周安装密闭箱可消除这一风险,但仍需对该密闭箱是否存在泄漏风险以及箱体内部消毒效果进行评价。本文专门介绍了文丘里密闭箱PAO检漏及其箱体内部H2O2消毒后的消毒效果评价方法。 展开更多

关键词 PAO检漏 消毒试验 嗜热脂肪地芽孢杆菌

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浙江省一规模猪场副猪嗜血杆菌的分离鉴定

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作者 周蕾 虞一聪 +8 位作者 董建斐 柴娟 王雅婷 刘爱军 谢荣辉 倪柏锋 张传亮 赵灵燕 桂平雄 《中国动物检疫》 CAS 2018年第7期82-85,共4页

2017年12月,浙江省杭州市萧山区某规模猪场保育舍猪群出现高热(41.5℃)、咳嗽、腹式呼吸、关节肿胀伴有跛行和被毛粗乱等临床症状。为确诊疾病,明确病因,剖检2头40日龄病死猪,用接种环刮取肺脏病料接种血平板,再用金黄色葡萄球菌作交叉... 2017年12月,浙江省杭州市萧山区某规模猪场保育舍猪群出现高热(41.5℃)、咳嗽、腹式呼吸、关节肿胀伴有跛行和被毛粗乱等临床症状。为确诊疾病,明确病因,剖检2头40日龄病死猪,用接种环刮取肺脏病料接种血平板,再用金黄色葡萄球菌作交叉划线,于37℃5%CO2条件下培养24 h。结果显示:病料培养血平板上生长出大量半透明、不溶血小菌落,菌落直径为0.5~1 mm;靠近金黄色葡萄球菌菌苔的菌落较大,随着与葡萄球菌生长线距离的增加而变小或不生长,呈"卫星现象"。挑取可疑菌落进行纯化培养,将纯培养物制成菌悬液,以DNA纯化试剂盒提取DNA并进行PCR检测。扩增产物电泳后,被检菌株电泳道出现一条1 090 bp条带,表明该菌株为副猪嗜血杆菌。 展开更多

关键词 副猪嗜血杆菌 细菌鉴定 PCR 规模猪场

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浙江省动物血清库建设与信息化管理

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作者 虞一聪 倪柏锋 +6 位作者 董建斐 王雅婷 周蕾 柴娟 谢荣辉 赵灵燕 徐辉 《中国动物检疫》 CAS 2019年第11期20-24,共5页

动物血清库在动物疫病监测、新发病追踪溯源、流行病学研究等方面发挥了重要作用。国家动物血清库自建设运行以来,为动物免疫情况调查和流行病学调查研究等方面提供了丰富的样本素材。本文分析了浙江省结合计算机数据库管理系统、二维... 动物血清库在动物疫病监测、新发病追踪溯源、流行病学研究等方面发挥了重要作用。国家动物血清库自建设运行以来,为动物免疫情况调查和流行病学调查研究等方面提供了丰富的样本素材。本文分析了浙江省结合计算机数据库管理系统、二维码信息系统、超低温冰箱等而建立的一套动物血清库系统,从硬软件设备、样品录入、样品质量与人员运维管理等层面进行了详阐,以期实现省级动物血清库的系统化与信息化管理,助力今后动物疫病研究工作的有效开展。 展开更多

关键词 动物血清库 疫病监测 新发病 大数据 信息化 二维码信息系统

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一起规模猪场胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及药敏试验

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作者 王雅婷 周蕾 +8 位作者 虞一聪 董建斐 谢荣辉 柴娟 刘爱军 倪柏锋 赵灵燕 桂平雄 徐辉 《浙江畜牧兽医》 2018年第3期31-32,39,共3页

胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae,APP）是猪胸膜肺炎的病原菌,为一种革兰氏阴性、有荚膜、具有典型球杆菌形态的小杆菌。根据是否需要NAD（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）,将其分为生物I型（依赖于NAD）和生物II型（不依赖... 胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae,APP）是猪胸膜肺炎的病原菌,为一种革兰氏阴性、有荚膜、具有典型球杆菌形态的小杆菌。根据是否需要NAD（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）,将其分为生物I型（依赖于NAD）和生物II型（不依赖于NAD）。 展开更多

关键词 胸膜肺炎放线杆菌 规模猪场 药敏试验 分离鉴定 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 革兰氏阴性 病原菌 NAD

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