恶性肿瘤患者凝血功能结果分析 被引量：8

1

作者 周湘红 李霞 +7 位作者 王伟 安邦权 刘姗 袁艳 葛章文 刘子砚 王国川 韩文平 《贵州医药》 CAS 2015年第10期924-925,共2页

恶性肿瘤可导致止凝血功能发生改变,而止凝血功能异常可改变肿瘤细胞活性,以直接或间接影响机体的凝血、纤溶系统,导致患者凝血功能的异常。本文对57例健康体检者和122例不同恶性肿瘤患者进行血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶... 恶性肿瘤可导致止凝血功能发生改变,而止凝血功能异常可改变肿瘤细胞活性,以直接或间接影响机体的凝血、纤溶系统,导致患者凝血功能的异常。本文对57例健康体检者和122例不同恶性肿瘤患者进行血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fib）、D-二聚体（D-D）及纤维蛋白原降解产物（FDP）等6项凝血功能指标检测,并对结果进行分析。 展开更多

关键词 恶性肿瘤 凝血功能 高凝状态 纤溶系统

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HIV病毒感染细胞的体内分布及关键抑制因素

2

作者 宋晓钰 商正玲 +2 位作者 冯勤颖 周信忠 葛章文 《贵州医药》 CAS 2024年第12期1851-1854,共4页

目的 研究HIV感染细胞的体内分布及关键抑制因素,了解HIV在体内的生物学特性,了解艾滋病毒在患者体内的分布,并对抑制因素的分析发现新的治疗靶点和药物,为艾滋病的预防和治疗提供科学依据。方法 采用横断面回顾分析,选取2020年4月至202... 目的 研究HIV感染细胞的体内分布及关键抑制因素,了解HIV在体内的生物学特性,了解艾滋病毒在患者体内的分布,并对抑制因素的分析发现新的治疗靶点和药物,为艾滋病的预防和治疗提供科学依据。方法 采用横断面回顾分析,选取2020年4月至2022年4月贵州某医院感染科接受治疗的艾滋病患者252例为研究对象。按照疾病分期将患者病例分为感染期和艾滋病期,记录两组患者的一般资料,根据两组患者艾滋病毒体内分布、关键抑制因素及不同分期感染病毒载量的分析来判断艾滋病病毒对不同分期患者产生的影响。结果 两组患者的性别、年龄、吸烟史、高血压、糖尿病史、饮酒史等指标比较均无差异(P>0.05);两组患者唾液、汗液和尿液比较均无差异(P>0.05);两组患者未检出率以及各病毒载量的区间差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者血液、精液/阴道分泌物、关节液、腹腔积液中的病毒载量对比差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者体内GP160、GP120、GP41及P24的产生情况比较均无差异(P>0.05);P66、P55、P51、P31、P17的产生情况差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 艾滋病患者血液、精液/阴道分泌物、关节液、腹腔积液中的病毒载量较多,且艾滋病期患者体内的病毒载量要明显高于感染期;艾滋病患者体内P66、P55、P51、P31、P17特异性抗体与感染期患者均有统计学差异,提示可作为艾滋病分期的参考指标。 展开更多

关键词 艾滋病毒 体内分布 抑制因素 病毒载量 感染病毒分析

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无血清培养富集乳腺癌干细胞的初步研究 被引量：4

3

作者 廉芳 葛章文 +2 位作者 李红 陆核 刘杰麟 《贵阳医学院学报》 CAS 2014年第1期12-17,共6页

目的:探讨富集乳腺癌干细胞的方法,以获得稳定数量的肿瘤干细胞。方法:(1)采用无血清悬浮培养方法,从乳腺癌MDA-MB-435细胞中筛选和培养肿瘤干细胞。(2)采用相差显微镜观察含胰岛素和不含胰岛素的无血清培养基中干细胞球形成大小、数量... 目的:探讨富集乳腺癌干细胞的方法,以获得稳定数量的肿瘤干细胞。方法:(1)采用无血清悬浮培养方法,从乳腺癌MDA-MB-435细胞中筛选和培养肿瘤干细胞。(2)采用相差显微镜观察含胰岛素和不含胰岛素的无血清培养基中干细胞球形成大小、数量及随时间生长变化情况。(3)采用荧光显微镜观察Hoechst33342染料对MDA-MB-435肿瘤干细胞染色情况。(4)将MDA-MB-435肿瘤干细胞转入有血清培养基培养诱导分化,观察是否能有分化现象。结果:(1)采用无血清悬浮培养方法筛选和培养MDA-MB-435肿瘤干细胞成功。(2)发现不含胰岛素的无血清培养基中,形成的肿瘤干细胞团数量多且体积大。(3)随着培养时间延长,肿瘤干细胞球数量逐渐增多,体积逐渐变大。(4)Hoechst33342染料对肿瘤干细胞染色鉴定,约有90%肿瘤干细胞蓝色荧光染料较弱,呈暗淡区。(5)MDA-MB-435肿瘤干细胞经含血清培养基再次培养,具有分化功能。结论:含生长因子的无血清培养基培养MDA-MB-435细胞,可生成肿瘤干细胞球;不含胰岛素的无血清培养基更适合作为筛选肿瘤干细胞的培养基。 展开更多

关键词 肿瘤干细胞 乳腺肿瘤 细胞培养 胰岛素 无血清培养基 Hoechst染色

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人类免疫缺陷病毒感染临床分期与特异性抗体免疫印迹条带的相关性研究

4

作者 宋晓钰 商正玲 +3 位作者 冯勤颖 黄山 周信忠 葛章文 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第16期40-43,55,共5页

目的分析贵州省黔东南州地区针对不同人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原的特异性抗体在不同临床分期患者中的表达差异,探究其与获得性免疫缺陷综合征临床分期的关联。方法选取贵州黔东南州307份HIV确诊阳性血液样本,进行特异性HIV抗体免疫印迹... 目的分析贵州省黔东南州地区针对不同人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原的特异性抗体在不同临床分期患者中的表达差异,探究其与获得性免疫缺陷综合征临床分期的关联。方法选取贵州黔东南州307份HIV确诊阳性血液样本,进行特异性HIV抗体免疫印迹试验,并对血液样本进行CD3^(+)CD4^(+)T细胞计数及HIV病毒载量核酸检测,将HIV感染期和艾滋病期的相关指标进行多因素回归分析。结果307例HIV感染者中,男218例,女89例,平均(48.53±16.03)岁,其特异性抗体gp160、gp120、gp41、p66、p51、p31、p55、p24和p17的构成比分别为98.7%、90.9%、92.2%、74.3%、66.4%、86.6%、3.9%、97.4%和73.9%。多因素二元Logistic回归模型分析显示,p24特异性抗体的表达是感染期的影响因素(OR=0.158,95%CI:0.032~0.768,P<0.05)。p24特异性抗体与HIV感染的临床分期有一定相关性(OR=0.217,95%CI:0.005~0.944,P<0.05)。将p24特异性表达时CD3^(+)CD4^(+)T细胞计数与病毒载量比值作为检验变量,将临床分期作为状态变量(艾滋病期=1,感染期=2)绘制受试者工作特征(ROC)曲线,曲线下面积为0.653(95%CI:0.529~0.774,P<0.05)。结论p24特异性抗体的差异表达有望提示患者处于感染期,并可能成为HIV感染患者免疫功能的预警指标。 展开更多

关键词 获得性免疫缺陷综合征 病毒载量 人类免疫缺陷病毒 临床分期

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乳腺癌干细胞BLM、RecQ4蛋白表达变化及意义 被引量：2

5

作者 鲁媛 葛章文 刘杰麟 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第4期17-20,共4页

目的探讨乳腺癌干细胞BLM、RecQ4蛋白表达变化及其临床意义。方法采用无血清培养法从乳腺癌MDA-MB-435细胞中分离乳腺癌干细胞(以下称干细胞),并鉴定。观察MDA-MB-435细胞裸鼠及干细胞成瘤能力,RT-PCR法检测二者ATP结合盒膜转运蛋白G2(A... 目的探讨乳腺癌干细胞BLM、RecQ4蛋白表达变化及其临床意义。方法采用无血清培养法从乳腺癌MDA-MB-435细胞中分离乳腺癌干细胞(以下称干细胞),并鉴定。观察MDA-MB-435细胞裸鼠及干细胞成瘤能力,RT-PCR法检测二者ATP结合盒膜转运蛋白G2(ABCG2)mRNA相对表达量,Western blotting法和免疫组化法检测二者BLM、RecQ4蛋白表达。结果干细胞膜表面CD44+CD24-/low比例明显高于、CD44+CD24+比例明显低于MDA-MA-435细胞(P均<0.05);两种细胞膜表面CD44-CD24+、CD44-CD24-比例比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。裸鼠成瘤实验结果显示,与接种相同密度MDA-MB-435细胞比较,接种干细胞的裸鼠成瘤时间早、肿瘤体积大;干细胞ABCG2 mRNA相对表达量为0.753±0.025,MDA-MB-435细胞为0.563±0.112;两者比较P<0.05。干细胞BLM蛋白表达低、RecQ4蛋白表达高于MDA-MB-435细胞(P均<0.05)。结论乳腺癌干细胞成瘤能力强;细胞BLM蛋白表达降低、RecQ4蛋白表达升高可能为其机制。 展开更多

关键词 乳腺癌 无血清培养 乳腺癌干细胞 RecQ家族解旋酶

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二氢杨梅素对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2

6

作者 刘金河 葛章文 +3 位作者 张望明 晏文涛 刘志 吴昌学 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第10期1140-1144,共5页

目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法:将肺癌A549细胞分为DMY组和对照组,DMY组分成5组,分别加入终浓度1、5、10、15及20mg/L的DMY,对照组加入等量DMSO;各组细胞培养72h时,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,计算DM... 目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法:将肺癌A549细胞分为DMY组和对照组,DMY组分成5组,分别加入终浓度1、5、10、15及20mg/L的DMY,对照组加入等量DMSO;各组细胞培养72h时,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,计算DMY对A549细胞的半数致死量(IC50值);选取IC50值附近浓度的DMY处理细胞,分别在24、48及72h时,采用MTT检测细胞存活率;肺癌A549细胞分为DMY组(终浓度大约为IC50值的DMY)及对照组,细胞培养48h时,采用Hoechst33342/PI双染法结合倒置荧光显微镜检测细胞凋亡,DNAladder凝胶电泳检测细胞内DNA的断裂程度。结果:DMY能显著抑制A549细胞的增殖,细胞抑制率随着DMY浓度的增加逐渐增高(P<0.01),呈明显的浓度依赖性,IC50值为(13.16±0.098)mg/L;以15mg/LDMY处理A549细胞,细胞存活率随着时间的延长逐渐降低(P<0.01),呈明显的时间依赖性;15mg/LDMY孵育A549细胞48h,Hoechst33342/PI染色后荧光显微镜下细胞核内呈现强蓝光,说明细胞处于凋亡状态,DNAladder凝胶实验检测发现凋亡DNA片段明显增加,出现Ladder现象。结论:DMY能抑制肺癌A549细胞增殖并促进其凋亡,可能与染色体DNA断裂有关。 展开更多

关键词 二氢杨梅素 肺肿瘤 癌 细胞增殖 细胞凋亡 DNAladder凝胶电泳

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莽草酸抑制BLM解旋酶活性及肝癌细胞的研究 被引量：2

7

作者 葛章文 吴利 张望明 《中外医疗》 2016年第16期9-11,共3页

目的研究莽草酸(shikimic acid)对BLM解旋酶的生物学特性的影响及对肝癌细胞的抑制作用。方法 2012年11月—2013年7月应用荧光偏振技术研究莽草酸对BLM解旋酶的DNA结合活性,CCK-8检测莽草酸对肝癌细胞增殖的抑制作用。结果培养24 h,A100... 目的研究莽草酸(shikimic acid)对BLM解旋酶的生物学特性的影响及对肝癌细胞的抑制作用。方法 2012年11月—2013年7月应用荧光偏振技术研究莽草酸对BLM解旋酶的DNA结合活性,CCK-8检测莽草酸对肝癌细胞增殖的抑制作用。结果培养24 h,A100(100μmol/L)、A50(50μmol/L)、A25(25μmol/L)三组与不加药对照组相比,抑制率分别为25.73%、21.31%、18.25%,对肝癌细胞HepG2增殖具有抑制作用(P<0.05)。结论 1莽草酸不能结合BLM解旋酶,不能抑制其与DNA的结合,不能抑制BLM解旋酶的生物学活性。2莽草酸对Hp G2细胞的生长有一定的抑制作用,Hp G2细胞的生长抑制作用随药物作用时间的延长有减弱的表现。3莽草酸抑制肿瘤细胞生长的作用机制不是其通过对BLM解旋酶DNA结合活性的抑制来实现的。 展开更多

关键词 莽草酸 BLM解旋酶 DNA结合活性 HpG2 CCK-8

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二氢杨梅素对Bloom解旋酶结构和生物学活性的影响 被引量：2

8

作者 刘金河 张望明 +2 位作者 晏文涛 许键炜 葛章文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1453-1460,共8页

目的二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY),是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗肿瘤等作用,研究DMY对Bloom解旋酶(Bloom helicase,BLM)生物学活性的影响对探索DMY的抗肿瘤机制具有重要意义。方法采用紫外光谱、圆二色谱、荧光偏振和自由磷检... 目的二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY),是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗肿瘤等作用,研究DMY对Bloom解旋酶(Bloom helicase,BLM)生物学活性的影响对探索DMY的抗肿瘤机制具有重要意义。方法采用紫外光谱、圆二色谱、荧光偏振和自由磷检测等方法和技术研究DMY对BLM解旋酶的生物学活性的影响。结果圆二色谱和紫外光谱结果显示,DMY能与BLM解旋酶结合,且有1个结合位点;在0~25μmol·L^-1浓度范围内,DMY对BLM解旋酶的二级结构的干扰能力成正相关,在25~75μmol·L^-1浓度范围内则相反。荧光偏振和自由磷检测实验显示,DMY能结合在BLM解旋酶上,进而抑制BLM解旋酶的解链活性。结论DMY能够竞争性结合于BLM解旋酶的DNA结合位点上,改变BLM解旋酶的空间结构,从而抑制BLM解旋酶与DNA的结合,进而抑制BLM解旋酶的生物学活性。 展开更多

关键词 二氢杨梅素 Bloom解旋酶 生化活性 构象 二级结构 圆二色谱 荧光偏振

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贵州省HIV核酸定量检测在抗体不确定/阴性受检者中的应用 被引量：2

9

作者 李梅 袁薇 +4 位作者 葛章文 杨敬源 刘勇 张淑俊 赵强 《海峡预防医学杂志》 CAS 2022年第6期16-18,共3页

目的探讨HIV核酸定量试验对抗体不确定/阴性者的诊断价值。方法对贵州省3个市2021年1月至10月HIV初筛阳性且在抗体确证试验(WB)中抗体不确定/阴性受检者进行核酸定量检测,并随访追踪。结果3800例受检者男女比1.8∶1,平均(52.3±16.2... 目的探讨HIV核酸定量试验对抗体不确定/阴性者的诊断价值。方法对贵州省3个市2021年1月至10月HIV初筛阳性且在抗体确证试验(WB)中抗体不确定/阴性受检者进行核酸定量检测,并随访追踪。结果3800例受检者男女比1.8∶1,平均(52.3±16.2)岁,医疗机构送检较多(53.5%);WB抗体不确定占16.4%(625例)、阴性占6.6%(251例);不确定和阴性者核酸阳性率分别为21.6%和15.9%;男性(29.7%)和≥50岁(30.8%)的阳性率较高。VL>5000拷贝/mL的175例;VL≤5000拷贝/mL的10例。876例WB不确定/阴性受检者随访率仅9.9%。核酸定量试验与随访WB结果的一致性较好(Kappa=0.935),总符合率97.7%。结论WB不确定/阴性结果结合核酸定量检测,有助于及时发现潜在HIV感染者,应加强对低VL值受检者的追踪随访。 展开更多

关键词 艾滋病 免疫印迹实验 核酸检测 实验室检测

原文传递

WB抗体不确定/阴性受检者HIV-1-RNA检测结果分析

10

作者 李梅 袁薇 +4 位作者 葛章文 杨敬源 刘勇 张淑俊 赵强 《医学动物防制》 2023年第6期517-521,共5页

目的探讨核酸定量检测对诊断HIV-1抗体不确定/阴性受检者感染的临床应用价值。方法收集贵州省3市2021年1月—10月艾滋病初筛实验室进行的筛查实验(酶联免疫吸附法、化学发光和快速检测法)且抗体有反应性的受检者进行免疫印迹法(western ... 目的探讨核酸定量检测对诊断HIV-1抗体不确定/阴性受检者感染的临床应用价值。方法收集贵州省3市2021年1月—10月艾滋病初筛实验室进行的筛查实验(酶联免疫吸附法、化学发光和快速检测法)且抗体有反应性的受检者进行免疫印迹法(western blotting,WB),对WB检测结果为HIV-1抗体不确定/阴性受检者进行随访追踪并增加核酸定量检测作为补充实验,后将初筛试验结果、WB试验结果及核酸定量检测结果纳入统计分析。结果3800例初筛有反应性的受检者经过WB确证为抗体阳性占76.9%、抗体阴性占6.6%、抗体不确定占16.4%。876例WB抗体不确定及阴性受检者核酸定量检测分布显示,病毒载量(viral load,VL)>5000copies/ml有175例,占20.0%;VL水平在250~5000copies/ml有4例,占0.5%;低于检测下限6例,占0.7%;未检出691例,占78.9%。初筛试验不同检测方法间与VL阳性率有明显差异,快速检测法和VL阳性符合率最低,占12.1%,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)占比最高,为25.0%,ELISA随S/CO升高,VL阳性率逐步升高。随访的87例受检者,19例VL>5000copies/ml的受检者WB抗体全部转阳,2例VL为250~5000copies/ml的受检者随访WB抗体转阳,其余未检出的受检者WB抗体全部转阴,核酸定量检测结果与随访诊断结果的一致性较好(Kappa=0.935,P<0.01),总体符合率为97.7%(85/87)。结论筛查试验S/CO值在一定程度上为及时诊断HIV-1感染提供参考依据,核酸定量检测有助于WB抗体不确定/阴性的及时诊断,且经VL诊断的HIV-1感染者体内病毒载量值较高。 展开更多

关键词 免疫印迹法 核酸定量检测 抗体不确定/阴性 早期诊断 筛选试验 实验室诊断

原文传递

汉防己甲素衍生物HL-22对BLM解旋酶生物学特性的影响 被引量：1

11

作者 张望明 葛章文 +4 位作者 刘金河 晏文涛 潘卫东 焦彦朝 刘杰麟 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第5期497-502,507,共7页

目的:探讨汉防己甲素衍生物HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶生物学特性的影响。方法:采用荧光偏振法检测HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶DNA结合活性和解链活性的影响,用孔雀绿-磷钼酸铵比色法检测HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的影... 目的:探讨汉防己甲素衍生物HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶生物学特性的影响。方法:采用荧光偏振法检测HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶DNA结合活性和解链活性的影响,用孔雀绿-磷钼酸铵比色法检测HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的影响,采用紫外吸收光谱法检测HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶构象的影响。结果:33.34μmol/L的HL-22对BLM解旋酶复性后双链DNA(ds DNA)结合活性的抑制率为49.07%、单链(ss DNA)结合活性的抑制率为50.00%,50μmol/L的HL-22对BLM解旋酶DNA解链活性的抑制率为93.58%,100μmol/L的HL-22对BLM解旋酶ATPase活性的抑制率为90.3%。结论:HL-22对BLM^(642-1290)解旋酶的DNA结合活性、解链活性和ATPase活性均有抑制作用。 展开更多

关键词 汉防己甲素衍生物 BLM解旋酶 结合活性 解链活性 ATPASE活性

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汉防己甲素衍生物HL-27对BLM解旋酶生物学特性的影响

12

作者 张望明 葛章文 +3 位作者 晏文涛 潘卫东 焦彦朝 刘杰麟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期934-939,共6页

目的研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶生物学特性的影响。方法利用荧光偏振技术研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶DNA结合活性、解链活性的影响;利用孔雀绿-磷钼酸铵比色法研究汉防己甲素衍生物HL-27对B... 目的研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶生物学特性的影响。方法利用荧光偏振技术研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶DNA结合活性、解链活性的影响;利用孔雀绿-磷钼酸铵比色法研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的影响;利用紫外吸收光谱法研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶构象的影响。结果当HL-27浓度达到33.34μmol·L^(-1)时,其对dsDNA或ssDNA与BLM^(642-1290)解旋酶结合活性的抑制率分别为41.35%、59.54%;当HL-27浓度达到50 μmol·L^(-1)时,其对BLM^(642-1290)解旋酶解链活性的抑制率为78.68%;当HL-27的浓度为100μmol·L^(-1)时,其对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的抑制率为43.8%。结论汉防己甲素衍生物HL-27可以抑制BLM^(642-1290)解旋酶的DNA结合活性、解链活性与ATPase活性。 展开更多

关键词 BLM642-1290解旋酶 HL-27 荧光偏振 结合活性 解链活性 ATPASE活性

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