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多学科交叉在中医药复合型人才培养模式中的应用探讨 被引量:18
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作者 葛立 朱振洪 万海同 《中国当代医药》 2010年第4期5-7,共3页
中医中药是中华民族的魂宝,当代中医药学正面临着现代医学和世界新技术革命的严峻挑战。文章分析了目前中医药人才培养模式特点,并从人才培养模式的角度对中医药教育传统特色人才培养如何结合现代科学,在继承的基础上进一步创新进行了... 中医中药是中华民族的魂宝,当代中医药学正面临着现代医学和世界新技术革命的严峻挑战。文章分析了目前中医药人才培养模式特点,并从人才培养模式的角度对中医药教育传统特色人才培养如何结合现代科学,在继承的基础上进一步创新进行了初步探讨,提出了多学科交叉,培养中医复合型人才,是适应21世纪中医药事业发展和人才培养的新思路。 展开更多
关键词 多学科交叉 中医药 人才培养
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3'-甲氧基葛根素对缺血再灌注大鼠脑内氨基酸动态变化的实验研究 被引量:15
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作者 韩进 万海同 +1 位作者 李金辉 葛立 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1023-1027,共5页
目的:研究脑缺血时3'-甲氧基葛根素对谷氨酸、天门冬氨酸、牛磺酸和γ-氨基丁酸的抑制作用,探讨脑缺血损伤再灌注过程中其对神经损伤的保护机制。方法:制作大鼠大脑中动脉阻塞模型,利用脑微透析技术收集大鼠纹状体细胞外液中的氨基... 目的:研究脑缺血时3'-甲氧基葛根素对谷氨酸、天门冬氨酸、牛磺酸和γ-氨基丁酸的抑制作用,探讨脑缺血损伤再灌注过程中其对神经损伤的保护机制。方法:制作大鼠大脑中动脉阻塞模型,利用脑微透析技术收集大鼠纹状体细胞外液中的氨基酸类神经递质,并3'-甲氧基葛根素灌胃治疗;HPLC荧光检测用药前后4种氨基酸的含量变化。结果:3'-甲氧基葛根素可降低缺血时脑组织中兴奋性氨基酸Asp,Glu的浓度,同时使抑制性氨基酸Tau,GABA含量明显降低。结论:3'-甲氧基葛根素能降低缺血引起的脑内兴奋性氨基酸的毒性,调节脑内兴奋性氨基酸的含量。因此,该药改善脑内氨基酸的变化状态是改善和保护急性期脑梗死大鼠脑内神经保护作用机制之一。 展开更多
关键词 3'-甲氧基葛根素 兴奋性氨基酸 抑制性氨基酸 脑缺血再灌注损伤
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正交实验优化复合酶法提取山药多糖工艺研究 被引量:14
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作者 葛立 朱振洪 +2 位作者 沙跃 刘苗 万海同 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期3187-3188,共2页
目的确定山药多糖复合酶法提取的最佳酶配比和最佳提取工艺条件。方法采用蛋白酶、纤维素酶、果胶酶复合处理提取山药多糖。以酶用量、酶作用温度、pH值、提取时间为因素水平,通过正交实验方法研究了3种酶量的最佳配比,及最佳提取工艺... 目的确定山药多糖复合酶法提取的最佳酶配比和最佳提取工艺条件。方法采用蛋白酶、纤维素酶、果胶酶复合处理提取山药多糖。以酶用量、酶作用温度、pH值、提取时间为因素水平,通过正交实验方法研究了3种酶量的最佳配比,及最佳提取工艺条件。结果复合酶法提取山药多糖的最佳工艺条件:纤维素酶用量为1.5%、果胶酶用量为0.5%、酸性蛋白酶用量为2.0%配比,酶作用温度50℃,酶作用pH值为5.5,酶作用时间为60 m in。在此条件下,多糖提取率最高,总糖得率5.38%。结论该方法显著提高了山药多糖的提取率,可为山药多糖的大规模工业化生产提供了可借鉴的新方法。 展开更多
关键词 山药多糖 复合酶法 正交试验 提取
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生态危机的标志性信号——霞水母旺发 今年辽东湾海蜇大面积减产 被引量:11
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作者 葛立 何德民 《中国水产》 北大核心 2004年第9期23-25,共3页
关键词 生态危机 霞水母 辽东湾 海蜇 海水污染 捕捞强度 生态平衡 治理措施
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体外血脑屏障的构建及川芎嗪与葛根素合用对P-gp基因表达的影响 被引量:10
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作者 李金辉 朱振洪 +3 位作者 葛立 张宇燕 杨洁红 万海同 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2118-2121,共4页
目的:探讨川芎嗪葛根素合用对糖氧剥夺诱导的体外血脑屏障(BBB)模型通透性增高的保护作用机制。方法:利用大鼠脑微血管内皮细胞与星型胶质细胞共培养建立体外血脑屏障模型,随机分为正常对照组、模型组、川芎嗪组、葛根素组、葛根素川芎... 目的:探讨川芎嗪葛根素合用对糖氧剥夺诱导的体外血脑屏障(BBB)模型通透性增高的保护作用机制。方法:利用大鼠脑微血管内皮细胞与星型胶质细胞共培养建立体外血脑屏障模型,随机分为正常对照组、模型组、川芎嗪组、葛根素组、葛根素川芎嗪合用组和尼莫地平组,采用测定TEER、γ-GT、AKP活性及LDH含量等方法比较和鉴定BBB的特征,RT-PCR检测各组P-gp的基因表达。结果:与单层细胞模型相比,BMECs与星形胶质细胞共培养电阻抗可达到(252.61±13.14)Ω·cm2,γ-GT、AKP均显著增加(P<0.01),各用药组较模型组均能下调P-gp基因表达(P<0.01),川芎嗪与葛根素合用组较川芎嗪、葛根素单用显著下调P-gp基因表达(P<0.05)。结论:体外BBB构建成功。川芎嗪、葛根素合用下调P-gp的表达,减少对药物泵出外排,其机制可能与其协同增效治疗BBB损伤有关。 展开更多
关键词 血脑屏障 川芎嗪 葛根素 糖氧剥夺 P-糖蛋白
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甲壳素/壳聚糖的化学改性及其研究进展 被引量:6
6
作者 唐振兴 钱俊青 +1 位作者 葛立 何志平 《杭州化工》 CAS 2003年第4期16-19,共4页
概述了甲壳素/壳聚糖及其衍生物的研究情况和最新进展,着重讨论其在化学修饰方面的进展。
关键词 甲壳素 壳聚糖 化学改性 化学修饰
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不同饵料对毛蚶幼体发育的影响 被引量:7
7
作者 葛立 杨玉香 梁维波 《水产科学》 CAS 北大核心 2008年第5期226-229,共4页
在毛蚶人工育苗过程中,使用球等鞭金藻、角毛藻、小球藻、扁藻4种藻类的不同组合投喂毛蚶幼体。结果表明,饵料种类越多,变态率越高,生长速度越快;球等鞭金藻、角毛藻、小球藻、扁藻搭配(体积比1:1:1:1)变态率为30%,出库需(壳长1 mm)27 d... 在毛蚶人工育苗过程中,使用球等鞭金藻、角毛藻、小球藻、扁藻4种藻类的不同组合投喂毛蚶幼体。结果表明,饵料种类越多,变态率越高,生长速度越快;球等鞭金藻、角毛藻、小球藻、扁藻搭配(体积比1:1:1:1)变态率为30%,出库需(壳长1 mm)27 d;球等鞭金藻、角毛藻、小球藻搭配(体积比1:1:1)变态率为29%,出库需29 d;球等鞭金藻、小球藻搭配(体积比1:1)变态率为24%,出库需31 d;角毛藻、小球藻搭配(体积比1:1)变态率为19%,出库需33 d;单一投喂小球藻,变态率为3%,出库需44 d。说明不同饵料间的营养可以互补,多种饵料搭配能为幼体发育提供更全面的营养,饵料多样性是影响幼体培养效果的重要因素。 展开更多
关键词 毛蚶 幼体 饵料 变态率 生长
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甲壳素废水中虾青素与蛋白质絮凝工艺条件的研究 被引量:4
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作者 葛立 唐振兴 谢祥茂 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期45-47,共3页
对含有虾青素的甲壳素废水的絮凝工艺条件进行了研究。试验结果表明,采用明矾作絮凝剂效果最佳;较佳的絮凝工艺条件为:55℃,水浴20min,pH为6.0,絮凝剂用量为20mg/L;经凯氏定氮测得蛋白质和虾青素混合物的回收率达到89.1%。
关键词 回收利用 甲壳素废水 虾青素 蛋白质 絮凝 工艺条件
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黄孢原毛平革菌的降解机制及其应用 被引量:4
9
作者 唐振兴 王素娟 +1 位作者 葛立 何治平 《染料与染色》 CAS 2003年第5期293-296,共4页
黄孢原毛平革菌产生的胞外酶由木素过氧化酶、锰过氧化酶和己二醛氧化酶等组成,对染料废水有降解功能,并具有传统处理方法所无法比拟的优点。 本文对黄孢原毛平革菌的降解机制和在工业上的应用做一简要综述,有16篇参考文献。
关键词 黄孢原毛平革菌 木素过氧化物酶 锰过氧化物酶 降解
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MAP30全长基因的克隆及在巴斯德毕赤酵母中的高效表达研究 被引量:6
10
作者 朱振洪 杨威威 +1 位作者 葛立 万海同 《中国医药生物技术》 CSCD 2010年第2期110-116,共7页
目的研究毕赤酵母中高效表达全长MAP30蛋白及其生物活性。方法根据GeneBank公布的MAP30全序列设计特异性引物,以苦瓜基因组为模板,PCR扩增MAP30全长基因,将该基因插入pPIC9k载体中,经SacI酶切线性化后,电转化至GS115细胞,再通过G418筛选... 目的研究毕赤酵母中高效表达全长MAP30蛋白及其生物活性。方法根据GeneBank公布的MAP30全序列设计特异性引物,以苦瓜基因组为模板,PCR扩增MAP30全长基因,将该基因插入pPIC9k载体中,经SacI酶切线性化后,电转化至GS115细胞,再通过G418筛选,最终获得了高拷贝重组GS115菌株。重组菌株在甲醇诱导下,SDS-PAGE分析表达的特异性条带,运用Pharmacia VDS图像分析软件进行条带密度扫描,得到各条带的扫描曲线图,计算出同一泳道目的蛋白条带峰面积相对于整个曲线所占的百分比,即蛋白纯度,并根据蛋白纯度和上清蛋白总量(Lowry法)计算出发酵上清液中目标蛋白含量。纯化时首先用75%的饱和硫酸铵盐析,然后用Phenyl Sepharose6FF疏水层析,再用CM-sepharoseFF阳离子层析。采用MTT法检测MAP30蛋白对人胃癌细胞株SGC7901的抑制作用。为验证重组MAP30蛋白结构的正确性,采用EDMAN降解法分析N末端8个氨基酸。结果重组菌株在甲醇诱导下,SDS-PAGE分析可见相对分子质量32000的特异性条带,重组蛋白占上清液总蛋白的67%;发酵液经硫酸铵沉淀、疏水和阳离子交换层析后,目的蛋白总回收率为32.4%。MTT法检测结果表明,重组MAP30蛋白具有明显的抑制人胃癌细胞SGC7901的活性,IC50为30μg/ml。N端的8个氨基酸测序进一步证实与理论一致。结论重组MAP30蛋白在毕赤酵母中正确表达,表达产物具有抑制肿瘤细胞的活性。 展开更多
关键词 苦瓜 核糖体蛋白质类 毕赤酵母 基因表达
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响应面法优化水蜈蚣总黄酮的提取及其抗氧化性研究 被引量:5
11
作者 葛立 朱振洪 +2 位作者 陈蒋丽 韩进 万海同 《浙江中医药大学学报》 CAS 2014年第4期461-468,共8页
[目的]确定水蜈蚣总黄酮乙醇提取的最佳工艺条件及其抗氧化性。[方法]采用响应面法优化乙醇提取水蜈蚣总黄酮的条件。在单因素实验基础上,选取乙醇浓度、提取温度、料液比和提取时间为影响因子,应用Box-Behnken中心组合法进行四因素三... [目的]确定水蜈蚣总黄酮乙醇提取的最佳工艺条件及其抗氧化性。[方法]采用响应面法优化乙醇提取水蜈蚣总黄酮的条件。在单因素实验基础上,选取乙醇浓度、提取温度、料液比和提取时间为影响因子,应用Box-Behnken中心组合法进行四因素三水平的试验设计,以水蜈蚣黄酮得率为响应值,进行响应面分析。[结果]乙醇提取水蜈蚣的最佳工艺条件为乙醇浓度60%,提取温度70℃,提取时间5 h,料液比1:40,在优化工艺下,水蜈蚣黄酮的得率达1.969%。实验值与回归模型预测值的相对误差为1.68%。水蜈蚣总黄酮对羟自由基的清除率达25.1%。[结论]基于响应面法分析所得的优化提取工艺条件可靠,水蜈蚣总黄酮对羟自由基的清除作用较好。 展开更多
关键词 水蜈蚣 总黄酮 响应面法 抗氧化性
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毛蚶稚贝池塘中间培育的最适密度研究 被引量:5
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作者 葛立 杨玉香 +3 位作者 赵文 闫喜武 张焕 张淑红 《大连水产学院学报》 CSCD 北大核心 2008年第2期145-148,共4页
在毛蚶Scapharca subcrenata稚贝的中间培育过程中,采用60目、40目和20目3种网袋吊在池塘中进行暂养(共15个密度)。结果表明:60目网袋中每袋放20 000粒稚贝暂养较适宜,毛蚶稚贝平均成活率为81.2%,壳长达(1.89±0.02)mm,壳长日生长为... 在毛蚶Scapharca subcrenata稚贝的中间培育过程中,采用60目、40目和20目3种网袋吊在池塘中进行暂养(共15个密度)。结果表明:60目网袋中每袋放20 000粒稚贝暂养较适宜,毛蚶稚贝平均成活率为81.2%,壳长达(1.89±0.02)mm,壳长日生长为(26.8±0.8)μm;40目网袋中每袋放4 000粒暂养较适宜,毛蚶稚贝平均成活率为75.5%,壳长达(4.38±0.07)mm,壳长日生长为(126.3±3.7)μm;20目网袋中每袋放2 000粒较适宜,毛蚶稚贝平均成活率为92.3%,壳长达(5.80±0.10)mm,壳长日生长为(60.0±3.0)μm。 展开更多
关键词 毛蚶 中间培育 最佳密度 池塘
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三疣梭子蟹土池养殖试验 被引量:4
13
作者 孔维 李昕 +3 位作者 许波 刘宝权 葛立 孙增荣 《水产科学》 CAS 北大核心 2000年第3期30-31,共2页
随着三疣梭子蟹自然资源的锐减 ,进行人工养殖势在必行 ,根据 1 996~ 1 998年连续 3年的土池养殖试验 。
关键词 三疣梭子蟹 土池养殖 养殖技术
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河蟹早期溞状幼体病害防治研究 被引量:6
14
作者 赵立国 葛立 《水产科技情报》 1995年第6期257-259,共3页
在河蟹育苗中常见早期溞状幼体(ZⅠ、ZⅡ)被聚缩虫(Zoothamniumsp)寄生引起细菌性或病毒性感染,造成突发性死亡。作者用孔雀绿、制霉素、氯霉素、高锰酸钾等药物对聚缩虫进行杀灭试验,结果显示以孔雀绿和制霉素的... 在河蟹育苗中常见早期溞状幼体(ZⅠ、ZⅡ)被聚缩虫(Zoothamniumsp)寄生引起细菌性或病毒性感染,造成突发性死亡。作者用孔雀绿、制霉素、氯霉素、高锰酸钾等药物对聚缩虫进行杀灭试验,结果显示以孔雀绿和制霉素的杀虫效果最好。但从早期 状幼体的病害防治效果来看,由于越冬亲蟹是病原体的携带者,因此作者强调防治工作必须从亲蟹暂养时做起,立足于早防早治;且以多种药物综合性措施为妥。 展开更多
关键词 河蟹 育苗 病害 防治 幼体变态
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坚定捍卫“国之大者” 坚决守护“红线底线”
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作者 葛立 《辽宁自然资源》 2024年第3期25-27,共3页
盘山县位于辽宁省西部,成立于1906年,是百年老县,也是盘锦市唯一的县。全县地域面积1980.95平方公里,耕地面积始终稳定在110万亩以上,粮食产量已连续十二年突破10亿斤,是东北重要的粮食生产基地、全国产粮大县和国家现代农业示范区。近... 盘山县位于辽宁省西部,成立于1906年,是百年老县,也是盘锦市唯一的县。全县地域面积1980.95平方公里,耕地面积始终稳定在110万亩以上,粮食产量已连续十二年突破10亿斤,是东北重要的粮食生产基地、全国产粮大县和国家现代农业示范区。近年来,盘山县深入贯彻党中央、国务院关于严格耕地保护的决策部署,全力践行习近平总书记关于耕地保护的重要论述精神,实施了一系列的农田水利骨干工程、高标准农田建设工程、黑土地保护工程、耕地土壤污染治理和修复工程等,真正做到“守好耕地保护红线、筑牢粮食安全底线”。 展开更多
关键词 粮食生产基地 耕地保护 产粮大县 粮食产量 水利骨干工程 地域面积 国家现代农业示范区 修复工程
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大片刨花形态对可饰面定向刨花板力学性能的影响 被引量:2
16
作者 李宏艺 李长贵 +5 位作者 马玉珍 王雅慧 葛立 何明明 付茵茵 朱景振 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第12期39-48,共10页
【目的】探究大片刨花形态对可饰面定向刨花板力学性能的影响,为可饰面定向刨花板的生产原料筛选提供依据。【方法】以杨木大片刨花为试验材料,以刨花板力学性能为考察指标,选择大片刨花长度(70~230 mm)、宽度(10~58 mm)、厚度(0.3~1.1 ... 【目的】探究大片刨花形态对可饰面定向刨花板力学性能的影响,为可饰面定向刨花板的生产原料筛选提供依据。【方法】以杨木大片刨花为试验材料,以刨花板力学性能为考察指标,选择大片刨花长度(70~230 mm)、宽度(10~58 mm)、厚度(0.3~1.1 mm)为影响因素,通过单因素试验研究刨花三维尺寸对所制备可饰面定向刨花板静曲强度(MOR)和内结合强度(IB)的影响,在此基础上运用Box-Behnken响应面法,以可饰面定向刨花板的静曲强度和内结合强度为响应值,以刨花的长(110,150和190 mm)、宽(34,46和58 mm)、厚(0.3,0.5和0.7 mm)3个因素为自变量,设计三因素三水平正交旋转组合试验,对大片刨花三维尺寸组合进行优选。【结果】单因素试验表明,大片刨花三维尺寸对板材的力学性能均有较大影响。大片刨花长度为150和110 mm时,板材的静曲强度、内结合强度分别达到最大值,为17.61和0.63 MPa;大片刨花宽度为46和34 mm时,板材的静曲强度、内结合强度分别达到最大值,为17.05和0.67 MPa;大片刨花厚度为0.5和0.7 mm时,板材的静曲强度、内结合强度分别达到最大值,为24.65和0.62 MPa。三因素三水平正交旋转组合优化试验表明,静曲强度和内结合强度回归模型的拟合系数R2分别为0.9915和0.9443,大片刨花长度和厚度对静曲强度的影响分别达极显著水平(P<0.01)和显著水平(P<0.05),对内结合强度的影响均达到极显著水平(P<0.01);交互作用分析表明,大片刨花长度与厚度、宽度与厚度的交互作用均对静曲强度有显著影响(P<0.05),长度与厚度的交互作用对内结合强度有显著影响(P<0.05)。【结论】最优的大片刨花形态参数为长140 mm、宽40 mm、厚0.5 mm,在该条件下制备的可饰面定向刨花板的静曲强度为20.31MPa,内结合强度为0.49 MPa。 展开更多
关键词 定向刨花板 可饰面板材 刨花形态 力学性能 响应面法
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竹木复合低密度细表面定向刨花板的研制
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作者 葛立 潘秋英 《中国人造板》 2024年第2期11-16,28,共7页
探讨了以毛竹、杉木为原料,以异氰酸酯为胶黏剂并添加增黏剂等多种助剂,制备竹木复合低密度细表面定向刨花板的生产工艺。研究结果表明,在适当增加施胶量的前提下,以毛竹和杉木混合生产竹木复合低密度细表面定向刨花板是可行的,刨花板... 探讨了以毛竹、杉木为原料,以异氰酸酯为胶黏剂并添加增黏剂等多种助剂,制备竹木复合低密度细表面定向刨花板的生产工艺。研究结果表明,在适当增加施胶量的前提下,以毛竹和杉木混合生产竹木复合低密度细表面定向刨花板是可行的,刨花板的密度最低可以做到600 kg/m^(3),且本试验中所制备的竹木复合细表面定向刨花板的物理力学性能随密度加大而提高,优化热压温度、热压压力以及热压时间可明显改善其性能。 展开更多
关键词 竹木复合 细表面定向刨花板 刨花板
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养阴通脑颗粒中黄芪甲苷含量的HPLC-ELSD测定 被引量:4
18
作者 沈滨 万海同 +3 位作者 张宇燕 朱振洪 韩进 葛立 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期2142-2143,共2页
目的确定养阴通脑颗粒中黄芪甲苷含量HPLC测定方法及最佳提取工艺。方法用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷含量,色谱柱为Kromasil C18;乙腈-水(34∶66),流速1.0 ml/min,漂移管温度100℃,载气流速为2.0 L/min。采用微波辅助提取,通过正交设计考... 目的确定养阴通脑颗粒中黄芪甲苷含量HPLC测定方法及最佳提取工艺。方法用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷含量,色谱柱为Kromasil C18;乙腈-水(34∶66),流速1.0 ml/min,漂移管温度100℃,载气流速为2.0 L/min。采用微波辅助提取,通过正交设计考察溶媒用量、微波功率、微波时间,乙醇体积百分数对黄芪甲苷得率的影响。结果方法学考察结果表明,在0.28~4.20μg(r=0.999 4)范围内,黄芪甲苷呈良好的线性关系;精密度RSD为0.35%;加样回收率为97.43%,RSD为2.59%。最佳提取条件为:微波功率70 W,溶媒用量6倍,微波时间20 min,乙醇体积百分数60%。结论该方法测定结果准确稳定,精密度高,最佳提取工艺下黄芪甲苷的得率高。 展开更多
关键词 养阴通脑颗粒 黄芪甲苷 正交试验 高效液相色谱
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利用重组大肠杆菌生产人生长激素发酵工艺的研究 被引量:2
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作者 朱振洪 葛立 刘文洪 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期217-221,共5页
在摇瓶培养和发酵罐培养条件下,研究了E.coli/BL21(DE3)/pET30a(+)-hGH工程菌的不同发酵工艺条件。确立了该工程菌的最优化工艺参数:M9-2培养基,37℃、pH值为6.8-7.4、诱导起始菌体密度为OD600达3.0-4.0,IPTG浓度为1mmol/L,诱导时溶氧... 在摇瓶培养和发酵罐培养条件下,研究了E.coli/BL21(DE3)/pET30a(+)-hGH工程菌的不同发酵工艺条件。确立了该工程菌的最优化工艺参数:M9-2培养基,37℃、pH值为6.8-7.4、诱导起始菌体密度为OD600达3.0-4.0,IPTG浓度为1mmol/L,诱导时溶氧控制为50%以上,补料为10%甘油、5%Yeast extract和5%Tryptone。该工艺条件经过连续三批发酵,证实稳定可行,目的蛋白在胞间质呈可溶性表达,表达量占菌体总蛋白的20%以上。 展开更多
关键词 大肠杆菌 人生长激素 发酵
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猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻保存技术研究 被引量:3
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作者 戴建 芮荣 +2 位作者 武彩红 葛立 卢庆 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2007年第8期34-38,共5页
旨在探讨提高猪GV期卵母细胞冷冻保存效率的可能途径。将EDS、EFS40和ES冷冻保护液用作卵母细胞冻前、冻后程序的处理,但不冷冻,比较3种冷冻保护剂对猪GV期卵母细胞的毒性作用;采用ES液作玻璃化液,比较常规细管法、OPS法和电镜铜网法3... 旨在探讨提高猪GV期卵母细胞冷冻保存效率的可能途径。将EDS、EFS40和ES冷冻保护液用作卵母细胞冻前、冻后程序的处理,但不冷冻,比较3种冷冻保护剂对猪GV期卵母细胞的毒性作用;采用ES液作玻璃化液,比较常规细管法、OPS法和电镜铜网法3种冷冻载体对猪GV期卵母细胞的冷冻效果;并以ES液作玻璃化液,OPS管为冷冻载体,将猪GV期卵母细胞分5组,即对照组、CB+离心处理组、直接冷冻组、CB+冷冻组、CB+离心+冷冻组进行对比处理,比较各处理卵母细胞的冻后存活率与发育率。结果表明,在不同冷冻保护液中,以ES液组合作为玻璃化冷冻液时的毒性作用最低,与对照组间无明显差异(P>0.05);在3种冷冻载体中,用OPS法冷冻猪GV期卵母细胞,所获冻后存活率明显高于电镜铜网法和细管法(65.4%对45.0%和38.6%,P<0.05),并可获得最佳的冻后成熟率(43.3%);猪GV期卵母细胞单纯经细胞松弛素B和离心极化处理,不会严重影响卵母细胞的存活,但卵裂率显著低于对照组(39.0%对52.1%,P<0.05);细胞松弛素B处理或细胞松弛素B+离心极化处理后再进行玻璃化冷冻,并不能提高卵母细胞的冻后存活率与发育率。采用OPS法直接进行GV期卵母细胞的玻璃化冷冻,可获得7.8%的冻后卵裂率,并能获得桑椹胚发育,是一种有效的猪卵母细胞冷冻保存技术。 展开更多
关键词 卵母细胞 玻璃化冷冻
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